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《暨南大学》 2011年
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GeXP-PCR技术多重检测食品转基因成分和HPV分型感染

杨梦婕  
【摘要】:目的: 建立基于GeXP多重基因表达遗传分析系统的多重PCR方法,并评价其在食品转基因成分的检测和人乳头瘤病毒HPV分型检测中的初步应用。 方法: 以转基因大豆和转基因菜籽中的转基因成分为研究对象,利用GeXP系统建立多重PCR方法,同时检测六种外源转基因成分(PAT,NOS, CaMV35S, FMV35S,Bar,EPSPS),并与中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《植物及其加工产品中转基因成分实时荧光PCR定性检验方法》进行结果比较。 以中国人常见的五种人乳头瘤病毒(HPV6,11,31,33和52)亚型为研究对象,建立基于GeXP系统的五重PCR方法,并对其进行方法学评价(包括灵敏度、特异性等),并与商业化试剂盒检测结果进行比较。 结果: 在大豆和菜籽的转基因成分检测中,我们成功建立了可同时检测六种外源基因(PAT,NOS, CaMV35S, FMV35S,Bar,EPSPS)的多重PCR体系。在该体系中,我们采用100ng模板量(该量为行标中建议的模板最低量),检测结果与行标建议的荧光PCR检测结果完全一致。 在人乳头瘤病毒HPV的分型研究中,我们成功建立了可同时检测中国人常见的五种HPV亚型(包括两种低危型HPV6,HPV11和三种高危型HPV31,HPV33,HPV52)的五重PCR体系。该方法特异性好,检测灵敏度可达103拷贝/μL。通过对30份临床标本验证,结果与商业化试剂盒检测结果完全一致。 结论: 成功建立了一种新的基于GeXP的多重PCR技术平台,并用于食品中转基因成分检测和HPV分型检测,这为实现高通量、多靶基因的检测提供了新的思路和方法。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:TS207.3

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【参考文献】
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【同被引文献】
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【二级参考文献】
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3 郭世奎;实时荧光定量PCR技术对结直肠癌患者肠道微生态的研究[D];昆明医学院;2011年
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5 刘志国;实时多重荧光PCR快速鉴别布鲁菌方法的建立[D];内蒙古农业大学;2010年
6 郑升博;猪链球菌多重PCR检测方法的建立及屠宰场样品感染率的调查研究[D];上海交通大学;2010年
7 刘宁;PCR扩增16srRNA基因以快速诊断败血症及分型细菌[D];南昌大学;2010年
8 陈晶晶;不同纳米材料对PCR优化作用的研究及机制探讨[D];东华大学;2011年
9 谭景尹;PCR—膜芯片~(?)技术检测结核杆菌耐药基因突变的应用研究[D];广西医科大学;2011年
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