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《暨南大学》 2015年
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副溶血弧菌与溶藻弧菌毒力基因分布与抗生素耐药性分析

冼钰茵  
【摘要】:两种主要食源性弧菌——副溶血弧菌和溶藻弧菌都是海洋生态环境中广泛分布的正常菌群,同时也是重要的病原弧菌,不仅能使水产养殖动物患病,造成巨大的经济损失,还能导致人类食物中毒和胃肠道感染,危害人体健康。鉴于副溶血弧菌和溶藻弧菌具有高度同源性,而现有研究集中在前者,对于溶藻弧菌的致病机理缺乏了解。本论文在毒力相关基因和抗生素抗性两方面的特性比较副溶血弧菌和溶藻弧菌,通过分析与比较两种弧菌毒力基因分布情况及多药耐受现象之间的异同,为了解这两种弧菌的致病机制、耐药机制、流行病学研究和食品安全风险评估提供指导,主要结果如下:1.针对副溶血弧菌和溶藻弧菌的溶血素基因(trh、tdh、tlh)、毒力调控基因(tox R、tox S)和毒力贡献基因(Collagenase、Ure R、Fla A、omp W、Asp A、fur)构建了两套多重PCR体系并运用于从环境和水产品(青口、白贝、和贵妃蚌等)分离的248株副溶血弧菌和128株溶藻弧菌的毒力基因分布调查,发现这11种毒力相关基因在两种弧菌中均有不同程度的分布:tlh、Collagenase、Fla A、omp W和fur基因在两种弧菌中分布较广,tox R和tox S基因次之;而且两种弧菌的毒力基因分布情况都有各自的特点:副溶血弧菌的分离株不携带tdh和trh基因,Asp A、tox R和tox S基因的携带率均超过90%;溶藻弧菌则相反,tdh和trh基因的携带率高达38.28%,Asp A、tox R和tox S基因的携带率远低于副溶血弧菌。本论文所构建的多重PCR体系以水煮法提取的细菌DNA为模板同时检测两种弧菌的多个毒力相关基因,具有低成本、高灵敏度和高通量的特点,可用于基层大规模大范围的毒力相关基因发布调查。2.结合表型分型技术和分子分型技术,通过PCR反应筛选与致病性高度相关的O3、O4型副溶血弧菌后辅以血清凝集实验加以验证,从收集到的248株副溶血弧菌中筛选出8株O3型副溶血弧菌和9株O4型副溶血弧菌,通过限制性内切酶SfiⅠ酶切后进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型,为环境副溶血弧菌致病株的深入研究提供参考。3.本论文采用Kirby-Bauer纸片扩散法研究上述副溶血弧菌和溶藻弧菌分离株对水产养殖业中常用的18种抗生素(氨苄西林、阿莫西林、羧苄西林、头孢噻吩、头孢哌酮、头孢呋新钠、头孢唑啉、庆大霉素、链霉素、阿米卡星、万古霉素、多粘菌素B、四环素、复方新诺明、红霉素、环丙沙星、利福平和克林霉素)的耐药状况,发现两种弧菌都对多种抗生素具有不同程度的抗性,多药耐受情况十分严重,以溶藻弧菌为甚。基于环境中溶藻弧菌的存在比副溶血弧菌更为普遍而且对其研究相对不足的现状,本论文的研究结果不仅能用于指导水产养殖行业抗生素的合理规范应用,还能促进对病原弧菌尤其是溶藻弧菌耐药基因定位和耐药机制的研究。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R378;S941.4

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴学贵;周永灿;欧阳吉隆;戴小连;王世锋;谢珍玉;;海南地区溶藻弧菌耐药性及其质粒多样性的研究[J];水产科学;2012年01期
2 朱海明;邓峰;严纪文;马聪;宋曼丹;赖蔚苳;杨冰;王海燕;何冬梅;王建;柯昌文;;广东省副溶血性弧菌rDNA指纹图谱特征分析[J];华南预防医学;2006年06期
3 陈茂义;胡婕;陈婷;胡静荣;姚永祥;;副溶血性弧菌毒力基因研究进展[J];公共卫生与预防医学;2013年03期
4 胡南霞;马聪;李艳君;;溶藻弧菌分子分型技术的研究进展[J];国际检验医学杂志;2014年13期
5 江晓;任春华;胡超群;;分子分型技术在弧菌研究中的应用进展[J];海洋科学进展;2010年04期
6 林业杰,林勇,林金财,欧剑鸣;海产品携带溶藻弧菌调查[J];海峡预防医学杂志;2000年02期
7 王斌,王翔,王莉明;我国主要养殖贝类微生物性疾病研究进展[J];海洋环境科学;2002年03期
8 陈强;鄢庆枇;马甡;;溶藻弧菌致病性研究进展[J];海洋科学;2006年08期
9 张秋鹏;李华敬;;一起由溶藻弧菌引起食源性疾病的调查[J];疾病监测与控制;2012年06期
10 王中强;邱少富;王勇;孙岩松;宋宏彬;;多位点序列分型技术及其研究进展[J];军事医学科学院院刊;2010年01期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 赵永刚;副溶血弧菌tdh、trh和tlh基因的克隆、表达及基因敲除对其溶血活性的影响[D];中国海洋大学;2010年
2 芮浩鹏;从鱼到人:主要病原性弧菌的致病机理研究[D];华东理工大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 韩佳丽;溶藻弧菌毒力相关基因的检测与保藏方法的研究[D];广东海洋大学;2011年
2 魏霜;溶藻弧菌及其毒力相关基因的检测[D];暨南大学;2013年
3 李林桂;海水弧菌耐药性I类整合子分析与副溶血弧菌分子分型研究[D];四川农业大学;2013年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 叶建生;王兴强;马甡;阎斌伦;;双壳贝类的流行病学研究进展及其可持续发展养殖措施[J];安徽农学通报;2007年03期
2 周建平;;襄樊市肉食品大肠杆菌污染状况的检测[J];安徽农学通报;2008年13期
3 马妍;李健;王斌;王群;刘淇;;工厂化育苗养殖体系内细菌数量动态变化研究[J];安徽农业科学;2008年18期
4 韩斌;华雪铭;周洪琪;钟国防;;玉米蛋白粉替代部分鱼粉对凡纳滨对虾抗病力及非特异性免疫力的影响[J];安徽农业科学;2009年08期
5 宋增福;肖敏;吴静雯;邱军强;;1株林蛙烂嘴病病原菌的分离鉴定及防治药物筛选[J];安徽农业科学;2009年34期
6 洪舒音;;出口冻虾仁中多次检出溶藻弧菌的报告[J];安徽农业科学;2010年10期
7 乔迁;韩娜娜;陈超;杨志;史成银;黄偼;李琪;;致病性假交替单胞菌的分离鉴定及药敏特性研究[J];安徽农业科学;2010年26期
8 王青柏;胡超群;陈偿;徐鹏;;溶藻弧菌Ⅲ型分泌系统vscC基因缺失株的构建[J];安徽农业科学;2012年06期
9 盛维立;汪道发;方遒;;一起由溶藻弧菌所致食物中毒的调查报告[J];安徽预防医学杂志;2008年02期
10 冯颂杰;朱大世;;中草药在鱼病防治中的应用探析[J];现代农业科技;2009年19期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 符生苗;;做好细菌耐药监测,正确合理选择抗生素[A];2011年海南省细菌学检验室间质评工作会议资料汇编[C];2011年
2 马丽萍;姚琳;周德庆;;食源性致病微生物风险评估的研究进展[A];农产品质量安全与现代农业发展专家论坛论文集[C];2011年
3 郝贵杰;沈锦玉;潘晓艺;尹文林;曹铮;;哈维氏弧菌GYC1108-1胞外蛋白酶的制备及免疫原性研究[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
4 雷爱莹;;南美白对虾败血病病原菌(副溶血弧菌)的研究[A];广西水产研究所论文集(2001—2005)[C];2006年
5 陈月忠;黄万红;陈木;;闽粤地区鲍暴发性流行病的病因分析和流行病学研究[A];中国海洋湖沼学会、中国动物学会贝类学分会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
6 陈月忠;黄万红;陈木;;闽粤地区鲍暴发性流行病的病因分析和流行病学研究[A];中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学分会第十一次学术讨论会论文集[C];2003年
7 李月婷;卢士英;周玉;饶星;霍方珍;任洪林;柳增善;;食物中毒性弧菌三联融合毒素基因克隆与表达[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(上册)[C];2009年
8 周凯;贾宏升;李建;;弧菌检测在对虾养殖中的推广应用[A];2012第四届全国现代生态渔业与水环境综合治理技术汇总[C];2012年
9 张丽荣;魏泉德;林毅雄;谭爱军;郑予柯;方艳梅;肖慧洁;;食源性致病菌96微孔板DNA诊断芯片的研制[A];新发传染病研究热点研讨会论文集[C];2013年
10 柯碧霞;谭海玲;李柏生;何冬梅;马聪;刘美真;陈经雕;柯昌文;;2009年广东省副溶血弧菌暴发与散发菌株的病原学特征分析[A];2011广东省预防医学会学术年会资料汇编[C];2011年
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1 张彦娇;盐度和温度对大菱鲆非特异性免疫力的影响及淡水螯虾相关免疫因子的研究[D];中国海洋大学;2010年
2 李永芹;养殖鱼类病原菌检测芯片技术的建立[D];中国海洋大学;2010年
3 彭燕;海燕和中华疣海星的化学成分及其生物活性研究[D];华南理工大学;2010年
4 夏蕊蕊;山东省济南市区废水环境中整合子细菌筛选及耐药性机制研究[D];山东大学;2010年
5 陈伶利;生物功能化粒子/核酸探针技术快速检测病原菌及ATP的研究[D];湖南师范大学;2010年
6 丁鉴锋;皱纹盘鲍溶菌酶及两种蛋白酶抑制因子的克隆与表达[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
7 李贵阳;两株鳗弧菌全基因组序列测定及转录组比较分析[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
8 姜珊;两种水产动物抗菌肽的重组表达工艺优化与药理药效研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
9 岳欣;文蛤弧菌病的病原分析、免疫应答及抗性选育研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
10 杜萍;中国野生毛木耳遗传多样性研究[D];北京林业大学;2011年
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1 王延昭;利用免疫磁珠技术富集肠炎沙门氏菌和金黄色葡萄球菌[D];华中农业大学;2010年
2 徐子男;一种新的鳗弧菌毒力相关因子MItD的功能研究[D];中国海洋大学;2010年
3 孙婧;坎氏弧菌TLH溶血素基因的克隆表达、蛋白纯化及活性研究[D];中国海洋大学;2010年
4 李轩;牙鲆肠弧菌密度感应系统的研究及其信号分子降解菌株的筛选[D];中国海洋大学;2010年
5 乔迁;大菱鲆红体病虹彩病毒核酸疫苗及两种海水名贵鱼类疾病的研究[D];中国海洋大学;2010年
6 杨丽玲;口岸餐饮业卫生监测监督管理研究[D];暨南大学;2009年
7 贺红红;溶藻弧菌双精氨酸蛋白转运系统和六型分泌系统的研究[D];华东理工大学;2011年
8 刘霞;应用PCR-DGGE和rep-PCR技术对大鼠及成人肝硬化肝移植后肠道菌群多样性的研究[D];浙江大学;2011年
9 王亮;灿烂弧菌的鉴定及溶血素检测[D];山东农业大学;2011年
10 李俊;副溶血孤菌丝氨酸/苏氨酸蛋白酶对Ⅵ型分泌系统的调控作用研究[D];西南大学;2011年
【二级参考文献】
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1 毛芝娟,刘国勇,陈昌福;大黄鱼溃疡病致病菌的初步分离与鉴定[J];安徽农业大学学报;2002年02期
2 邵健忠,项黎新,毛树坚,沈志荣;三角帆蚌瘟病病毒的精细结构与基因组及多肽的研究[J];病毒学报;1993年02期
3 邓欢,隋锡林,王志松;对太平洋牡蛎弧菌病的初步研究[J];水产科学;1992年10期
4 陈洪大,于晓莉,叶永庆,张洁;杂色蛤病原菌——溶藻弧菌的分离与回接感染试验[J];水产科学;1993年09期
5 邓欢,陈俅,周泓;海湾扇贝病原菌—黑美人弧菌的分离与致病性[J];水产科学;2003年03期
6 邓欢,陈俅,邓立康,王世胜,周泓;两种弧菌对海湾扇贝幼体致病性研究[J];水产科学;2003年05期
7 蔡俊鹏;刘江涛;王志;;引起南方九孔鲍苗大规模死亡的一株病原菌的分离鉴定及其致病性研究[J];水产科学;2006年07期
8 张新中;张世秀;李海平;符有利;周永灿;谢珍玉;;多重PCR在创伤弧菌快速检测中的应用[J];水产科学;2007年12期
9 王世胜;几种化学试剂对海湾扇贝幼体病害的防治效果[J];水产科学;1994年02期
10 吕豪,魏若飞,吕典壮,唐振东;太平牡蛎(Crassostrea gigas)与大连湾牡蛎(Ostreatalienwhamensis)杂交实验[J];水产科学;1994年06期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 韩佳丽;溶藻弧菌毒力相关基因的检测与保藏方法的研究[D];广东海洋大学;2011年
2 陈雅莉;四川省食品动物源性大肠杆菌耐药性监测及整合子—基因盒检测[D];四川农业大学;2010年
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1 叶剑敏,简纪常,吴后波,吴灶和;溶藻弧菌脂多糖的化学成分分析及其对石斑鱼的毒性[J];水生生物学报;2004年05期
2 陈寅儿,金珊,王国良;鲈鱼溶藻弧菌病的血液生理生化指标研究[J];台湾海峡;2005年01期
3 彭喜春;张宁;冉艳红;桂博;陈龙;;海产品中溶藻弧菌的筛选及其致病因子的研究[J];现代食品科技;2008年04期
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5 徐先栋;谢珍玉;王世锋;宣雄智;周永灿;;致病溶藻弧菌脂多糖对点带石斑鱼毒性和免疫原性的影响[J];海洋科学;2010年03期
6 郝聚敏;李晶蕊;汤学敏;郑江;黎中宝;鄢庆枇;;溶藻弧菌适配子亲和力测定条件的优化及其特异性研究[J];安徽农业科学;2011年32期
7 刘含亮;孙敏敏;王红卫;李庆雷;杨春贵;高红莉;万文菊;王纪亭;;溶藻弧菌热休克蛋白70基因真核表达载体的构建及鉴定[J];中国病原生物学杂志;2011年12期
8 王蓓;梁军;简纪常;鲁义善;蔡双虎;黄郁葱;汤菊芬;蔡佳;吴灶和;;溶藻弧菌免疫胶体金快速检测试纸条的制备[J];广东海洋大学学报;2013年04期
9 熊盼;彭喜春;魏霜;陈沿廷;赵晖;唐书泽;吴希阳;;溶藻弧菌的毒力相关基因及其对小鼠的致病力[J];微生物学报;2014年01期
10 庞欢瑛;陈立明;蔡佳;汤菊芬;王蓓;吴灶和;简纪常;;溶藻弧菌二氢硫辛酰胺脱氢酶基因克隆及其生物信息学分析[J];广东海洋大学学报;2014年01期
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1 郑江;汤学敏;;一种基于适配子的溶藻弧菌的应用检测技术[A];中国水产学会鱼病专业委员会2013年学术研讨会论文摘要汇编[C];2013年
2 鄢庆枇;陈强;邹文政;郭国军;;致病性溶藻弧菌对大黄鱼黏液的黏附研究[A];2007年中国水产学会学术年会暨水产微生态调控技术论坛论文摘要汇编[C];2007年
3 罗鹏;苏婷;胡超群;任春华;;溶藻弧菌的普通溶血现象及相关基因定位[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
4 邬长祥;吴灶和;简纪常;鲁义善;;不同地区溶藻弧菌的分子分型及毒力基因的分布特征研究[A];渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
5 梁海鹰;吴灶和;简纪常;鲁义善;蔡佳;;溶藻弧菌鞭毛蛋白双基因融合表达载体的构建[A];渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
6 陈偿;赵晶晶;刘助红;龙云映;邓益琴;;不同菌相溶藻弧菌的生理生化差异及其分子机制[A];中国水产学会鱼病专业委员会2013年学术研讨会论文摘要汇编[C];2013年
7 李正义;贾俊涛;曹际娟;徐彪;姜英辉;;一株分离自冻墨鱼的溶藻弧菌的鉴定及其低温下细胞脂肪酸的变化[A];第五届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会论文摘要集[C];2013年
8 陈偿;胡超群;张吕平;陈晓燕;沈琪;任春华;;海水养殖动物主要病原细菌—溶藻弧菌的分子生物学研究[A];甲壳动物学分会成立20周年暨刘瑞玉院士从事海洋科教工作55周年学术研讨会论文(摘要)集[C];2002年
9 姚邵云;简纪常;吴灶和;;溶藻弧菌主要外膜蛋白的纯化及其免疫保护性研究[A];中国水产学会第五届青年学术年会摘要集[C];2004年
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1 郝俊香;鲍鱼溃疡病及其防治[N];农民日报;2013年
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1 钱荣华;溶藻弧菌主要毒力相关基因的克隆、表达及其免疫原性研究[D];浙江大学;2007年
2 盛丽莉;病原细菌溶藻弧菌和铜绿假单胞菌中致病相关系统的调控机制[D];华东理工大学;2012年
3 伦立民;文昌鱼谷丙转氨酶组织定位及在LPS和溶藻弧菌处理后急性炎症相关因子的变化[D];中国海洋大学;2008年
4 刘欢;溶藻弧菌群体感应系统元件Hfq和LuxT的功能研究[D];华东理工大学;2012年
5 孙星;养殖文蛤溶藻弧菌、颉颃菌的筛选与鉴定及其颉颃物质的研究[D];南京农业大学;2012年
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1 贺红红;溶藻弧菌双精氨酸蛋白转运系统和六型分泌系统的研究[D];华东理工大学;2011年
2 纪勇;用于溶藻弧菌快速检测的免疫磁珠技术的研究[D];集美大学;2011年
3 郑玉琦;溶藻弧菌耐四种抗生素的蛋白质组学研究[D];广东海洋大学;2011年
4 邬长祥;我国南方养殖海域溶藻弧菌的遗传多样性及部分毒力基因的分布特征研究[D];广东海洋大学;2012年
5 李宏;溶藻弧菌毒力菌株基因缺失突变株的构建及表型初步分析[D];海南大学;2013年
6 韩佳丽;溶藻弧菌毒力相关基因的检测与保藏方法的研究[D];广东海洋大学;2011年
7 郭静;溶藻弧菌相关分离株分子鉴定和生理生态特性研究[D];宁波大学;2012年
8 于鸽;溶藻弧菌噬菌体、菌影疫苗及其对对虾免疫保护性的比较研究[D];广东海洋大学;2011年
9 义家波;病原性溶藻弧菌的饥饿耐受以及复苏研究[D];集美大学;2008年
10 欧阳吉隆;溶藻弧菌毒力菌株特异基因的克隆与表达[D];海南大学;2011年
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