收藏本站
《暨南大学》 2017年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

小檗碱对巨噬细胞中ATP诱导的炎症小体活化的影响及其机制研究

李陈广  
【摘要】:目的:小檗碱是从黄连等药用植物中分离提取的一种异喹啉类生物碱,具有抗氧化、抗糖尿病、抗炎和抗细菌感染等多种药理活性。虽然已有研究报道小檗碱具有直接的抗菌效应,但其对巨噬细胞抗菌功能的影响并不清楚。巨噬细胞中炎症小体的活化是机体抵御细菌感染的重要机制之一。表达在病原微生物上的病原相关分子模式(pathogen associated molecular pattern,PAMP)经巨噬细胞表面或内部的模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)识别以后,诱导细胞表达炎症小体组装必须的相关蛋白(如NLRP3和pro-IL-1β等),从而活化巨噬细胞;活化的巨噬细胞如果进一步受到危险信号(如胞外ATP、尿酸钠晶体等)的刺激,上述蛋白可组装成炎症小体,细胞发生程序性死亡(细胞焦亡),并释放成熟的IL-1β等产物,进一步刺激炎症反应,增强巨噬细胞吞噬和杀伤细菌的功能。为此,本课题主要研究小檗碱对ATP诱导的炎症小体活化和细胞焦亡的影响,并探索其中的可能机制,旨在了解小檗碱通过影响巨噬细胞等固有免疫细胞的功能,从而发挥间接抗菌作用的可能性和免疫药理机制。方法:(1)所用巨噬细胞:J774A.1为小鼠巨噬细胞系;原代巨噬细胞包括腹腔巨噬细胞(TGPM)和骨髓源性巨噬细胞(BMDM):腹腔注射巯基乙酸盐获取TGPM;体外培养小鼠骨髓细胞诱导分化为BMDM。(2)炎症小体活化:巨噬细胞用LPS刺激4 h后,以小檗碱处理1 h,再添加ATP激活炎症小体,以碘化丙锭染色检测细胞焦亡,以免疫印迹法检测炎症小体活化相关的标志分子,以基于微球的免疫测定法(CBA)定量分析可溶性IL-1β。(3)药物作用机制研究:利用AMPK特异性抑制剂Compound C以及siRNA敲低AMPKα抑制AMPK的活性。(4)细菌感染模型研究:小鼠腹腔注射大肠杆菌,灌胃给药,以CBA或免疫印迹分析IL-1β,流式细胞术分析腹腔中性粒细胞的百分比,组织切片分析炎症细胞浸润,琼脂糖培养分析细菌数量,同时分析小鼠存活率。结果:(1)小檗碱能剂量依赖性地增强巨噬细胞中ATP诱导的炎症小体活化,促进细胞焦亡和成熟IL-1β的释放。(2)小檗碱可增强巨噬细胞中ATP诱导的AMPK活性。(3)Compound C或AMPKα敲低阻断AMPK活性可明显逆转小檗碱对ATP诱导的炎症小体活化和细胞焦亡的促进作用。(4)小檗碱能加强体外巨噬细胞对细菌的杀伤作用,并加速体内细菌的杀伤和清除作用,降低腹腔中的细菌数量;而且,该药物还能提高腹腔中的IL-1β的水平,增加腹腔和结肠中的中性粒细胞募集,明显提高感染细菌小鼠的存活率。结论:小檗碱可能通过增强AMPK活性,促进巨噬细胞中炎症小体的活化,强化固有免疫细胞的功能,从而提高对细菌的杀伤与清除作用,间接发挥抗菌效应。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R392

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郑振群;;关于巨噬细胞的几个问题[J];山西医药杂志;1974年12期
2 ;豚鼠巨噬细胞经P_(204)处理后的抗石英细胞毒作用[J];国外医学参考资料(卫生学分册);1976年04期
3 邓侠进;;巨噬细胞的抗癌作用[J];遵义医学院学报;1979年02期
4 陆天才;;疾病对肺巨噬细胞的影响[J];煤矿医学;1982年01期
5 郭瑞清;祝彼得;;一种分离巨噬细胞的简单方法[J];滨州医学院学报;1990年02期
6 谢志坚;巨噬细胞异质性[J];医学综述;2001年06期
7 饶艳;运动及神经内分泌对巨噬细胞功能的调节[J];体育与科学;2002年05期
8 朱金元;;吸烟对肺巨噬细胞的影响[J];浙江医学教育;2003年01期
9 张俊峰;过氧化物酶体增殖物激活受体与单核/巨噬细胞系[J];医学综述;2004年03期
10 韦锦学;顾军;;巨噬细胞的激活诱导死亡[J];生命科学;2006年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 史玉玲;王又明;丰美福;;巨噬细胞激活作用的研究[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
2 吴国明;周辉;;巨噬细胞和创伤纤维化[A];2009年浙江省骨科学学术年会论文汇编[C];2009年
3 李奇;王海杰;;透明质酸对于淋巴结巨噬细胞运动的影响[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
4 刘革修;欧大明;刘军花;黄红林;廖端芳;;丙丁酚在体外能抑制巨噬细胞脂质氧化介导的低密度脂蛋白氧化并调节氧化巨噬细胞的分泌功能[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
5 叶金善;杨丽霞;郭瑞威;;环氧化酶-2/前列腺素E_2在血管紧张素Ⅱ刺激巨噬细胞表达细胞外基质金属蛋白酶诱导因子中的作用[A];第十三次全国心血管病学术会议论文集[C];2011年
6 秦帅;陈希;孔德明;;构建由绿色荧光标记巨噬细胞的转基因斑马鱼系[A];贵州省中西医结合内分泌代谢学术会论文汇编[C];2012年
7 武剑华;徐惠绵;;肿瘤相关巨噬细胞在胃癌中的相关研究[A];第9届全国胃癌学术会议暨第二届阳光长城肿瘤学术会议论文汇编[C];2014年
8 何军;;血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体升高巨噬细胞内胆固醇水平[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年
9 宋盛;周非凡;邢达;;PDT诱导的凋亡细胞对巨噬细胞NO合成的影响[A];第七届全国光生物学学术会议论文摘要集[C];2010年
10 张磊;朱建华;黄元伟;姚航平;;血管紧张素Ⅱ对巨噬细胞(THP-1重细胞)凝集素样氧化低密度脂蛋白受体表达的影响[A];浙江省免疫学会第五次学术研讨会论文汇编[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 通讯员 李静 记者 胡德荣;恶性肿瘤巨噬细胞未必皆“恶人”[N];健康报;2014年
2 兰克;以尝试用巨噬细胞治瘫痪[N];科技日报;2000年
3 薛佳;免疫系统——人体的“卫士”[N];保健时报;2009年
4 记者 胡德荣;铁泵蛋白“维稳”铁代谢作用首次阐明[N];健康报;2011年
5 侯嘉 何新乡;硒的神奇功能[N];中国食品质量报;2003年
6 唐颖 倪兵 陈代杰;巨噬细胞泡沫化抑制剂研究快步进行[N];中国医药报;2006年
7 刘元江;新发现解释肿瘤为何易成“漏网之鱼”[N];医药经济报;2007年
8 本报记者 侯嘉 通讯员 何新乡;今天你补硒了吗[N];医药经济报;2003年
9 左志刚;升血小板药使用注意[N];医药养生保健报;2007年
10 记者 谢雪琳;地铁司机:ATP系统为何没起作用[N];第一财经日报;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 周赤燕;巨噬细胞MsrA对动脉粥样硬化的干预研究[D];武汉大学;2013年
2 章桂忠;TIPE2蛋白调控细胞增殖和炎症的机制研究[D];山东大学;2015年
3 张瑜;DKK1抑制巨噬细胞内脂质沉积及其相关分子机制[D];山东大学;2015年
4 孟涛;异丙酚对心脏收缩功能的抑制作用及其对巨噬细胞分泌功能调节的机制研究[D];山东大学;2015年
5 周兴;基于酵母微囊构建新型口服巨噬细胞靶向递送系统的研究[D];第三军医大学;2015年
6 蒋兴伟;Tim-3对巨噬细胞极化的调控机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2015年
7 刘伯玉;清道夫受体A介导小鼠巨噬细胞吞噬钩端螺旋体研究[D];上海交通大学;2013年
8 杨绍俊;miRNA-155介导ESAT-6诱导巨噬细胞凋亡的分子机制及其在结核诊断中的作用[D];第三军医大学;2015年
9 翟光耀;单核/巨噬细胞Ly6C~(low)亚群在心肌梗死后瘢痕形成期的抗炎特性研究[D];北京协和医学院;2014年
10 韩露;TRB3介导的脂肪组织巨噬细胞极化与糖尿病冠状动脉病变关系的研究[D];山东大学;2015年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李陈广;小檗碱对巨噬细胞中ATP诱导的炎症小体活化的影响及其机制研究[D];暨南大学;2017年
2 马春梅;AP0E~(-/-)小鼠TLR9介导巨噬细胞极化效应对动脉粥样硬化作用的研究[D];福建医科大学;2015年
3 张译丹;盐皮质激素受体拮抗剂调控巨噬细胞表型对实验性矽肺的作用[D];河北医科大学;2015年
4 卢文冉;HCV core蛋白作用的巨噬细胞培养上清对肝细胞生物学性状的影响[D];河北医科大学;2015年
5 李文建;载脂蛋白E影响巨噬细胞因子表达及分型的机制研究[D];河北医科大学;2015年
6 曹爽;高糖对巨噬细胞TLR4信号转导的调节作用[D];河北医科大学;2015年
7 宁程程;肿瘤相关巨噬细胞在子宫内膜癌雌激素敏感性中的作用及机制研究[D];复旦大学;2014年
8 高龙;PLD4在肿瘤相关巨噬细胞抑制结肠癌增殖中的作用研究[D];成都医学院;2015年
9 任虹;感染期子宫颈癌U14细胞荷瘤小鼠抑制巨噬细胞CCL5分泌的机制研究[D];河北医科大学;2015年
10 李美玲;双酚A对小鼠腹腔巨噬细胞极化影响的体外研究[D];安徽医科大学;2015年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026