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《暨南大学》 2017年
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IGFBP2通过ERK1/2信号通路调控RA-FLS细胞生物学行为机制研究

王新亮  
【摘要】:目的:探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2(Insulinlike growth factor binding protein2,IGFBP2)对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)生物学行为的作用,以及IGFBP2对细胞外调节蛋白激酶(Extracellular regulated protein kinases1/2,ERK1/2)的作用。方法:首先,我们原代培养类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)和正常成纤维样滑膜细胞(FLS),并采用q RT-PCR、Western blot及免疫荧光技术检测IGFBP2 m RNA和蛋白在FLS和RA-FLS中的表达水平。其次,RA-FLS细胞被转染si RNA-IGFBP2和si RNA-NC,q RT-PCR检测IGFBP2在RA-FLS细胞中的干扰效果;CCK-8实验检测IGFBP2敲低后对RA-FLS细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测IGFBP2敲低后对RA-FLS细胞凋亡的影响;Transwell检测IGFBP2敲低对RA-FLS细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测IGFBP2敲低对RA-FLS细胞迁移能力的影响。此外,RA-FLS细胞转染IGFBP2 si RNAs 48小时后,提取总蛋白质,Western blot检测RA-FLS中IGFBP2、ERK和p-ERK蛋白的表达水平。结果:IGFBP2在FLS细胞与RA-FLS细胞中表达情况:q RT-PCR和western blot分别在m RNA和蛋白表达水平检测显示IGFBP2在RA-FLS细胞中表达明显高于FLS细胞。敲低RA-FLS细胞中IGFBP2后会抑制RA-FLS细胞增殖、迁移和侵袭能力,RA-FLS细胞凋亡率增加。此外,敲低IGFBP2也会下调p-ERK1/2蛋白表达,但ERK1/2表达无明显变化。结论:IGFBP2在RA-FLS细胞中高表达;IGFBP2可通过ERK1/2信号通路调控RA-FLS增殖、迁移、侵袭和凋亡;敲低IGFBP2表达能够抑制RA-FLS细胞增殖、迁移和侵袭,促进RA-FLS细胞凋亡,说明可以将IGFBP2作为治疗RA的一个潜在靶点进行研究。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R593.22

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