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《暨南大学》 2017年
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右美托咪定对高浓度利多卡因诱导PC12细胞毒性的影响

王琼  
【摘要】:目的:已知高浓度利多卡因具有潜在的神经毒性效应,拟构建利多卡因神经细胞毒性模型,观察右美托咪定对高浓度利多卡因神经细胞毒性的表观遗传调控与机制。方法:首先构建体外高浓度利多卡因PC12细胞毒性模型,观察细胞的活力。在右美托咪定与利多卡因联合处理48 h后检测PC12细胞活力并计算增殖抑制率,检测细胞凋亡水平并检测MAPK信号通路蛋白。通过文献查阅和软件预测miR-let-7b及其可能的靶点蛋白COL3A1,验证二者间的关系,检测miR-let-7b对COL3A1-3’UTR的结合情况,在利多卡因和右美托咪定联合处理后对细胞活力,细胞增殖水平,细胞凋亡水平,细胞迁移和侵袭能力,细胞周期,调亡蛋白等进行检测。结果:利多卡因1mM能明显降低PC12细胞活力。右美托咪定处理过的PC12细胞能够明显增加细胞活力,降低增殖抑制率,抑制细胞凋亡水平,减少MAPK信号通路中的蛋白水平;右美托咪定与过表达miR-let-7b、COL3A1沉默表达均增加细胞活力、细胞侵袭和迁移能力,降低增殖抑制率,抑制细胞凋亡水平,改变细胞周期,上调Bcl-2表达,下调Caspase-3表达。结论:右美托咪定可能通过上调miR-let-7b和/或下调COL3A1水平,减轻高浓度利多卡因诱导的PC12细胞毒性,提示临床上在使用高浓度利多卡因时,可考虑干预miR-let-7b靶点来预防潜在的神经毒性作用,而右美托咪定预处理是个简便、有效的干预方法。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R614

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