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《暨南大学》 2018年
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围产期母儿共生菌及其相关性探讨

黎哲  
【摘要】:第一章孕妇及新生儿菌群构成及变化分析目的:利用高通量测序技术分析孕妇不同时期的肠道菌群、阴道菌群及新生儿不同时期的肠道菌群,探索其构成及变化规律。方法:1.选取计划于暨南大学附属第一医院分娩的系统产检、符合纳入标准的孕妇,于孕32周前签署知情同意书后纳入本研究,随访至新生儿出生14天后。2.收集孕妇孕32-34周粪便标本、阴道分泌物标本,孕足月粪便标本、阴道分泌物标本,新生儿出生胎粪及第3天、第14天粪便标本,进行高通量测序分析,并分析其构成及变化规律。结果:1.孕妇粪便(PMF、PLF)以厚壁菌门、拟杆菌门和放线菌门为主。孕妇阴道分泌物(PML、PLL)以厚壁菌门、放线菌门、拟杆菌门为主。新生儿胎粪(B1F)以变形菌门、厚壁菌门、放线菌门为主。新生儿第3天第15天粪便(B2F、B3F)以厚壁菌门为主,其次为变形菌门和放线菌门。2.孕足月粪便相对于孕32-34周主要表现为酸杆菌门、绿弯菌门减少,严格厌氧型梭菌属减少,Parabacteroides属增多。孕足月的孕妇阴道分泌物相对于孕32-34周表现为厚壁菌门减少,乳酸菌属减少,不动杆菌属增多,鞘氨醇单胞菌属减少。与孕32周比,孕足月肠道菌群特有物种降低,但阴道分泌物特有物种增多。3.新生儿第3天粪便相对新生儿胎粪主要表现出厚壁菌门,放线菌门增多,变形菌门,蓝藻菌门,软壁菌门,酸杆菌门,绿弯菌门均减少。第3天和第14天新生儿粪便在门层面上对比无统计学差异(P0.05)。4.新生儿第3天粪便相对于新生儿胎粪主要表现出链球菌属,肠球菌属,双歧杆菌属增多,不动杆菌属,罗尔斯通菌属,Faecalibacterium属,小杆菌属,Blautia属,鞘氨醇单胞菌属,罗斯氏菌属,[Eubacterium]_coprostanoligenes_group属,Ruminococcaceae属减少。新生儿第14天粪便较第3天表现为肠球菌属减少,严格厌氧型梭菌属增多。新生儿第3天及第14天肠道菌群特有物种较新生儿胎粪骤减。结论:1.孕妇孕足月肠道菌群较孕32-34周有门及属层面变化,肠道菌群特有物种减少。2.孕妇孕足月阴道菌群较孕32-34周有门及属层面变化,阴道菌群特有物种增多。3.新生儿第3天肠道菌群在门层面和属层面较新生儿胎粪均有不同,第14天肠道菌群较第3天仅有属层面不同。新生儿第3天及第14天粪便特有物种较胎粪骤减。第二章胎盘菌群构成及来源相关性分析目的:利用高通量测序分析孕妇胎盘菌群,探索其构成及菌群来源。方法:收集孕妇胎盘标本,利用高通量测序技术进行分析,并选取胎盘前10位菌门及前30位菌属与孕妇肠道菌群、阴道菌群进行关联性分析,探讨其来源规律。结果:1.孕妇胎盘并非无菌的,胎盘菌群门层面及属层面的构成具有很大的个体差异性,胎盘特有物种多达5840个,是孕期肠道及阴道菌群的几百倍甚至一千倍。2.门层面相关性:胎盘变形菌门与孕32-34周阴道菌群相关;胎盘无壁菌门与孕32-34周肠道菌群呈正相关,与孕足月肠道菌群呈负相关。3.属层面相关性:胎盘严格厌氧型梭菌属仅与孕32-34周粪便相关;胎盘梭杆菌属仅与孕32-34周阴道分泌物相关;加德奈菌属仅与孕32-34周阴道分泌物相关;鞘氨醇单胞菌属与孕32-34周阴道分泌物菌群呈正相关,与孕足月肠道菌群呈负相关。结论:1.孕妇胎盘并非无菌,且胎盘菌群构成具有很大个体差异性和较多特有物种。2.胎盘菌群与孕妇肠道菌群和阴道菌群有一定相关性,且相关性主要集中在孕32-34周,提示胎盘部分菌群可能在孕32-34周来源于孕妇肠道及阴道菌群。第三章顺产新生儿肠道菌群来源相关性分析目的:通过分析顺产新生儿肠道菌群与其孕母肠道菌群、阴道菌群以及胎盘菌群之间的相关性,试图探索新生儿肠道菌群建立的来源。方法:通过多元线性回归分析新生儿粪便前10菌门及前30菌属,比较新生儿胎粪、第3天粪便、第14天粪便门层面及属层面肠道菌群与其孕母肠道菌群、阴道菌群及胎盘菌群之间的相关性。结果:1.新生儿胎粪放线菌门与孕妇孕32-34周阴道菌群相关;胎粪酸杆菌门与孕足月孕妇肠道菌群相关。新生儿第3天粪便厚壁菌门与孕妇孕足月肠道菌群相关。新生儿第14天粪便软壁菌门与孕妇胎盘菌群相关。2.胎粪肠球菌属、parabacteroides属、小类杆菌属、Blautia属、瘤胃菌属与孕妇孕32-34周肠道菌群相关。Blautia属和瘤胃菌属与孕妇孕足月肠道菌群相关;双歧杆菌属、葡萄球菌属、厌氧型梭菌属、Akkermansia属和瘤胃菌属与孕妇孕足月阴道菌群相关。coprostanoligenes属相关与胎盘菌属相关。3.新生儿第3天粪便普氏菌属、Blautia属、瘤胃菌属与孕妇孕32-34周肠道菌群相关;乳酸菌属和拟杆菌属与孕妇孕32-34周阴道菌群相关;巨单胞菌属、瘤胃菌属和Blautia属与孕妇孕足月肠道菌群相关;faecalibacterium属和瘤胃菌属与孕妇孕足月阴道菌群相关;葡萄球菌属和奇异菌属与胎盘菌群相关。4.新生儿第14天粪便埃希式杆菌属与孕妇孕32-34周肠道菌群相关;葡萄球菌属、巨单胞菌属与孕妇孕足月肠道菌群相关;链球菌属与孕妇孕足月阴道菌群相关;巨单胞菌属与胎盘菌群相关。结论:1.新生儿出生3天内的肠道菌群的形成主要受孕32-34周肠道菌群、孕足月的孕妇肠道及阴道菌群的影响,而与孕32-34周阴道菌群的相关性较小,胎盘虽然自身含有大量菌群,但影响新生儿肠道菌群形成的菌属数较少。2.随着新生儿出生后时间的延长,其肠道菌群受母体影响的菌属数逐渐减少,出生第14天时较出生前3天锐减。第四章孕期益生菌服用效果比较分析目的:通过对比服用益生菌前后孕妇肠道菌群、阴道菌群、胎盘菌群的变化,并分析其新生儿肠道菌群的构成不同,探讨益生菌服用效果。方法:1.以随机的原则将纳入孕妇随机分成益生菌组和对照组。其中,益生菌组于孕妇孕32-34周取第一次粪便及阴道分泌物标本后,每日服用2次双歧杆菌乳酸菌三联活菌片,每次2片,直至分娩。对照组不服用益生菌。2.对比益生菌组服用益生菌前后肠道菌群及阴道菌群的变化,对比益生菌组和对照组肠道菌群、阴道菌群及胎盘菌群的不同。对比益生菌组与对照组新生儿肠道菌群的不同。结果:1.对照组及益生菌组在服用益生菌前,门属层面物种丰度差异无统计学意义。2.益生菌组服用益生菌后相对于服用前肠道菌群表现为门层面厚壁菌门增多,酸杆菌门减少,属层面罗尔斯通菌属,Blautia菌属增多,Parabacteroides减少;阴道菌群服用益生菌后相对服用前表现为梭杆菌门增加,属层面纤毛菌属,梭菌属,韦荣氏球菌属增多。3.益生菌组相对于对照组服用益生菌后肠道菌群、阴道菌群门层面物种丰度无统计学差异;属层面益生菌组孕妇孕足月肠道菌群相对于对照组表现为Blautia属增多,Roseburia属减少,阴道菌群差异无统计学意义。4.益生菌组相对于对照组胎盘菌群门层面物种丰度无统计学差异,属层面表现为埃希式杆菌属增多。5.新生儿出生胎粪、3天粪便及14天粪便,益生菌组与对照组间门层面菌群差异无统计学意义;属层面菌群差异无统计学意义。结论:1.本研究采用的双歧杆菌乳酸菌三联活菌片口服后并不能使孕妇肠道菌群、阴道菌群对应益生菌改变,仅有部分功能菌群改变。2.本研究采用的双歧杆菌乳酸菌三联活菌片口服后不能使孕妇胎盘菌群对应益生菌改变,仅有部分功能菌群改变。3.本研究采用的双歧杆菌乳酸菌三联活菌片口服后不能使新生儿肠道菌群改变。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R714.7

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