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《暨南大学》 2001年
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琼枝麒麟菜(Eucheuma gelatinae)化学成分的提取、分离、鉴定及初步活性研究

黄丽波  
【摘要】: 本文对采自海南省琼海市麒麟菜养殖基地的红藻琼枝麒麟菜(Eucheuma gelatinae)的化学成分进行了提取分离、结构鉴定、生物活性研究;对其中的蛋 白质类物质Lectin进行了提取、分离纯化及性质研究;对其中的多糖类物质卡拉 胶进行了综合提取工艺研究。 采用真空柱层析、加压柱层析、薄层层析、重结晶等分离纯化方法,从琼枝 麒麟菜的乙醇浸提物中分离出三个化合物(E_1,E_2,E_3),经IR、~1HNMR、~(13)CNMR、 DEPT、~1H-~1H COSY、~1H-~(13)C COSY、MS各项测试鉴定出其中E_1与E_2的结 构分别为胆甾-5-烯-1,3-二醇、胆甾醇,E_3的结构正在推导之中。体外抑 菌生物活性研究表明,化合物E_3对金黄色葡萄球菌,藤黄微球菌有抑菌活性。 通过考察不同的提取溶媒,溶媒用量、提取时间及(NH_4)_2SO_4盐析饱和度对 Lectin的提取分离的影响,确定了琼枝麒麟菜中的Lectin的提取分离条件。采用 缓冲液低温提取、40~90%(NH_4)_2SO_4分级盐析沉淀、Sephadex G-75凝胶过滤层 析纯化得到了Lectin的纯品。SDS-PAGE测得其分子量为29,000。对其性质研 究表明,该Lectin对人A、B、O、AB四种类型血细胞均显凝血活性,其凝血活 性对高温,酸、碱处理有较好的稳定性。 采用正交设计法对提取Lectin后所剩残渣中的卡拉胶的提取工艺进行了研 究,确定了综合提取工艺,实现了麒麟菜的综合利用;同时建立了简便、快速、 准确的卡拉胶含量测定方法。
【关键词】:琼枝麒麟菜 结构鉴定 Lectin 凝血活性 卡拉胶 提取工艺
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:O629
【目录】:
  • 中文摘要4-5
  • 英文摘要5-6
  • 第一章 绪 论6-11
  • 1.1 课题的背景6-10
  • 1.2 本项研究的目的与意义10-11
  • 第二章 琼枝麒麟菜(Eucheuma gelatinae)化学成分的分离与结构鉴定11-18
  • 2.1 前言11
  • 2.2 结果与讨论11-15
  • 2.2.1 化合物E_1的结构鉴定11-14
  • 2.2.2 化合物E_3的结构鉴定14-15
  • 2.2.3 化合物E_2的抑菌活性15
  • 2.3 实验部分15-18
  • 2.3.1 仪器与试剂15
  • 2.3.2 样品处理15-16
  • 2.3.3 乙酸乙酯部分16-17
  • 2.3.4 正丁醇部分17-18
  • 第三章 琼枝麒麟菜(Eucheuma gelatinae)中Lectin的提取分离纯化18-36
  • 3.1 前言18-21
  • 3.1.1 Lectin的定义18-19
  • 3.1.2 Lectin的分布19
  • 3.1.3 Lectin的化学结构19
  • 3.1.4 Lectin的性质19-20
  • 3.1.5 Lectin的生物活性20-21
  • 3.1.6 Lectin的应用21
  • 3.2 材料试剂与仪器设备21-22
  • 3.2.1 材料与试剂21-22
  • 3.2.2 仪器设备22
  • 3.3 实验部分22-26
  • 3.3.1 海藻原料的处理22
  • 3.3.2 凝集活性预实验22-23
  • 3.3.3 EGL提取条件的确定23-24
  • 3.3.4 粗提液中EGL的盐析分离条件的确定24
  • 3.3.5 (NH_4)_2SO_4盐析所得EGL粗品的制备24
  • 3.3.6 EGL粗品的纯化24-25
  • 3.3.7 凝胶过滤层析产物的纯度检查25
  • 3.3.8 EGL的性质测试25-26
  • 3.4 结果与讨论26-34
  • 3.4.1 EGL的提取条件26-28
  • 3.4.2 EGL粗提液的盐析分离条件28-30
  • 3.4.3 EGL粗品的凝胶过滤层析结果30
  • 3.4.4 EGL样品的SDS-PAGE结果30-31
  • 3.4.5 EGL性质测试结果31-34
  • 3.5 讨论34-35
  • 3.6 结论35-36
  • 第四章 卡拉胶综合提取工艺研究36-46
  • 4.1 前言36-39
  • 4.1.1 卡拉胶的(carrageenan)一般介绍36
  • 4.1.2 卡拉胶的生物活性研究进展36-39
  • 4.1.3 卡拉胶的提取39
  • 4.2 实验部分39-42
  • 4.2.1 仪器与试剂39-40
  • 4.2.2 苯酚-浓硫酸法测定水提液中卡拉胶的含量40-41
  • 4.2.3 卡拉胶提取工艺实验41-42
  • 4.2.4 卡拉胶水提液醇沉条件的确定42
  • 4.3 结果与讨论42-45
  • 4.3.1 水提液中卡拉胶的含量42-43
  • 4.3.2 卡拉胶的提取工艺43-44
  • 4.3.3 卡拉胶水提液的醇沉条件44-45
  • 4.4 结论45
  • 4.5 讨论45-46
  • 参考文献46-50
  • 致 谢50-51
  • 附 录51-59

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