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《暨南大学》 2002年
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重组人碱性成纤维细胞生长因子与痴呆脑及其神经细胞凋亡相关基因的实验研究

朱大明  
【摘要】: 目的:研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)对原代培养新生大鼠海马神经细胞的影响和对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的作用。从体内和体外两方面探讨rh-bFGF对神经细胞凋亡的抑制作用及治疗AD的可能性。 方法:采用体外培养新生海马神经细胞,加入聚集状态的Aβ_(25-35)建立AD样神经细胞模型,在正常成年大鼠脑室内注射聚集状态的Aβ_(25-35)建立AD样大鼠模型;实验组给予rh-bFGF。然后对细胞模型检测如下指标:Gimea's,Hoechst33258染色法研究凋亡细胞的形态学变化:Annexin-V法定量分析细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳分析凋亡梯带:Westen-blot分析凋亡相关基因的表达;对大鼠模型检测如下指标:Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力的变化;免疫组化分析海马凋亡相关基因的表达;HE染色法研究脑组织中凋亡细胞的形态学变化。以观察rh-bFGF对老年性大鼠学习记忆障碍、凋亡细胞、凋亡相关基因表达情况的影响。 结果:1在细胞模型上,1)rh-bFGF能改善凋亡细胞的形态学变化。2)rh-bFGF能抑制DNA凋亡梯带的出现,使细胞凋亡率下降。3)rh-bFGF能上调凋亡抑制基因Bcl-2在蛋白水平上的表达,下调凋亡促进基因Bax、ICE在蛋白水平上的表达。2在大鼠模型上,1),定位航行试验中,模型组大鼠平均逃避潜伏期较正常组明显延长,而实验组同模型组比较有显著缩短;空间探索试验中,实验组在平台象限游泳距离百分比明显高于模型组。2)rh-bFGF能改善脑组织中凋亡细胞的形态学变化。3)rh-bFGF能上调凋亡抑制基因Bcl-2在蛋白水平上的表达,下调凋亡促进基因Bax、ICE在蛋白水平上的表达。 结论:研究结果表明,rh-bFGF具有抑制Aβ_(25-35)对神经元的神经毒性作用,能 毕业沦之:H。【小U‘U痴不*仕儿仰汁刎胞州广川只Q山的”分俭M穴 4;:jta 改妒AD痴米人阶的学习l忆能力。几作用机制可能是巡过凋控凋亡相关基因 Bcl-2,Bax,ICE的表达对实1则/]u 说明rl。-bFGF是只 有很 好)I’发前景的AD治疗 药物。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R749.16

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