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羊栖菜多糖的提取工艺、化学结构及部分生物活性研究

王凌云  
【摘要】: 本文对采自广东汕头南澳海藻养殖场的羊栖菜Sargassum fusiforme进行了粗多糖提取工艺的优化研究。并通过对羊栖菜粗多糖进行分离、纯化和水解获得10个样品,对其中部分样品进行了较为深入的生物活性研究。 以多糖提取率为指标,分别讨论了温度、提取时间、加水量及pH值对羊栖菜粗多糖提取率的影响程度,并根据L_9(3~4)正交表确定最佳提取工艺条件为温度80℃,加水量50倍,pH值5及时间5h。 采用乙醇、CaCl_2分级沉淀法与DEAE C-52离子交换柱、Sephadex G-100凝胶柱层析相结合,对羊栖菜粗多糖进行了分离纯化,共得到7个样品。通过控制不同的水解条件,获得3个多糖样品。并检测了上述样品的部分理化指标。 采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法),测定了6个多糖样品对人肝癌细胞的生长抑制率(细胞毒性)。结果显示各样品在体外对肝癌细胞具有一定的生长抑制作用,但其抑制作用较弱。 采用细胞病变(CPE)抑制法和MTT比色法,研究了羊栖菜多糖及其水解样品对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和柯萨奇病毒(CVB_3)的抗病毒活性和对非洲绿猴肾细胞(Vero)的细胞毒性。结果显示,除两个水解样品外,其他样品均表现出了较强的抗病毒活性,且对Vero细胞无明显的毒副作用。研究发现,羊栖菜多糖不仅具有直接杀灭病毒的作用,而且还可进入细胞或吸附在细胞表面,达到抑制或杀伤病毒的效果。初步认为羊栖菜多糖的抗病毒活性与多糖的类型、多糖的水解程度以及硫酸基的含量等因素有关。


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