收藏本站
《暨南大学》 2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

VEGF mRNA反义核酸对白血病细胞药物敏感性的影响

费嘉  
【摘要】: 目的:研究VEGF反义核酸对HL60、K562细胞以及原代白血病细胞存活、生长和药物敏感性的影响;筛选出血管内皮生长因子(VEGF)的高效反义核酸;揭示自分泌VEGF在白血病中的作用 方法:用RNAstructure(version 3.7)软件,选择总自由能(overall ΔG_(37))相对低的反义核酸,共计7条,长度18-20核苷酸,全硫代修饰;反义核酸筛选是在含10%胎牛血清的RPMI1640培养液中,按25μmol/L终浓度加药,作用于HL60、K562细胞,反义核酸作用机理以及对白血病细胞药物敏感性研究是在无血清或低浓度血清状态下进行,采用lipofectin(GIBCO,1mg/ml)试剂转染反义核酸,脂质体与反义核酸的质量比例(μg/μg)为2:1,反义核酸用无血清DMEM溶解,,设置空白对照和随机对照,转染8h,换含10%胎牛血清的DMEM培养基培养64h,,采用胎盼蓝拒染法观察存活细胞数,用MTT法分别求出VEGF反义核酸和化疗药物的半数抑制浓度(IC_(50)),用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白水平,用RT-PCR分析反义核酸对白血病细胞VEGF mRNA表达的影响,用Giemsa染色和流式细胞仪检测白血病细胞凋亡状况。 结果:筛选出6条反义核酸对HL60、K562细胞生长、VEGF蛋白和VEGF mRNA表达有明显抑制作用。与空白对照组(AO)相比,A7组细胞生长抑制率达41.74%、培养液中VEGF蛋白表达抑制率达47.81%,与随机对照组(SCR)相比,最优序列AS7组细胞生长抑制率达31.9%、培养液中VEGF蛋白表达抑制率达51.4%,反义核酸活性与Overall ΔG_(37)密切相关(HL60:r=-0.842,P<0.01 K562:r=-0.8346,p<0.01)。VEGF反义核酸A7可提高HL60、K562细胞对As_2O_3、H、DNR的敏感性,降低化疗药物IC_(50)值,抑制VEGF蛋白表达,促进化疗 学位论文:VEGF m RNA反义核酸对白血病细胞药物敏感性的影响 前言 药物诱导的HL60、K562细胞凋亡,VEGF反义核酸A7能有效抑制原代白血病 细胞存活,与化疗药物联用,可提高化疗药物的敏感性,促进化疗药物诱导的原 代白血病细胞凋亡。 结论门)VEGF反义核酸可有效抑制HL60、K562细胞生长,下调VEGF 蛋白和VEGF mRNA的表达,VEGF反义核酸对HL60、K562细胞生长的抑制 作用呈剂量依赖性。(2)VEGF反义核酸抑制HL60、K562细胞生长的机理是抑 制细胞增殖,而不是促进细胞凋亡。o)VEGF反义核酸可提高HL60. K562细 胞对ASZO3、H、DNR的敏感性,促进化疗药物诱导的HL60、K562细胞凋亡, (4)VEGF反义核酸能有效抑制原代白血病细胞存活,提高原代白血病络胞对 化疗药物的敏感性,促进化疗药物诱导的原代白血病细胞凋亡。(5)计算机辅助 设计有助于获得更好反义核酸。历)内源性VEGF具有促进白血病细胞增殖, 降低白血病细胞对化疗药物的敏感性。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R733.7

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 林莉,王升启,管伟,杨秉呼,胡小电;以胰岛素样生长因子受体1基因为靶的反义寡核苷酸体内外抗肿瘤研究[J];生物化学与生物物理进展;2002年02期
2 王升启;反义寡核苷酸的化学修饰[J];生物化学与生物物理进展;1995年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 宝全,胡祥;p27~(kip1)基因逆转录病毒载体的构建及其对人胃癌细胞系生长抑制作用的研究[J];中国现代普通外科进展;2002年03期
2 李明焕,田铧,刘执玉,宋涛,李贵宝,田广平;ECV304细胞用于三维血管新生的研究[J];中国现代普通外科进展;2004年03期
3 吴国选,伍津津,朱堂友,鲁元刚,毕建军;人皮肤成纤维细胞库的构建[J];实用医药杂志;2005年04期
4 刘毅敏,周红,赵华文,赵先英;自由能与药物分子设计[J];实用医药杂志;2005年11期
5 张志勇;刘德山;宿学家;朱斌;;益气活血中药对肺癌上皮细胞粘附分子表达及侵袭的影响[J];实用医药杂志;2006年03期
6 赵艳;李先梅;蔡烈风;任红波;黄知秀;郑甜;;恶性血液病化疗致粒细胞缺乏78例临床护理[J];齐鲁护理杂志;2011年10期
7 盛修贵,孙广莲,曲牟文,李庆水,马悦冰;人子宫内膜癌细胞系HECCL-1的建立及其生物学特性的初步观察[J];肿瘤防治杂志;2002年02期
8 王磊;陈卫昌;谢学顺;何扬;白霞;;塞来昔布对实验性结肠癌原位移植瘤生长及血管形成的影响[J];中华肿瘤防治杂志;2006年17期
9 彭培建;林忠;廖海;李苏;张力;;吉非替尼对鼻咽癌细胞抑制作用及其对EGFR表达影响的探讨[J];中华肿瘤防治杂志;2009年13期
10 张春,车玉梅,艾群,周丽;应用胰蛋白酶/DNA酶消化法分散人绒毛膜滋养层细胞[J];齐齐哈尔医学院学报;2001年02期
中国重要会议论文全文数据库 前5条
1 刘俊;赵荣祥;丛品;洪钱江;;哺乳动物内耳再生毛细胞前体细胞来源的研究[A];中华中医药学会耳鼻喉科分会第15届学术交流会论文集[C];2009年
2 冯婷;涂文伟;黄娟;李晋蓉;殷仲伟;范营营;李虹;;流感病毒H1N1在MDCK细胞的培养及纯化条件的优化[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
3 吕洛;应康;魏少敏;林惠芬;马来记;毛裕民;;积雪草甙对真皮成纤维细胞胶原合成的诱导作用[A];2004年中国化妆品学术研讨会论文集[C];2004年
4 安立龙;效梅;张土保;董喜芳;许英梅;;不同浓度犊牛血清对三黄鸡原始生殖细胞生长、增殖的影响[A];中国畜牧兽医学会家畜生态学分会第七届全国代表大会暨学术研讨会论文集[C];2008年
5 李广君;王树迎;王慧;侯衍猛;黄丽波;;济宁青山羊发情周期不同阶段LHR在输卵管中的分布及其mRNA表达[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2010年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 费嘉,张洹;VEGF反义核酸与柔红霉素联用对增加髓性白血病细胞化疗敏感性的研究[J];肿瘤防治研究;2004年06期
2 费嘉,张洹;VEGF反义核酸对HL-60细胞作用和机制研究[J];中国实验血液学杂志;2004年05期
3 费嘉,张洹;血管内皮生长因子反义核酸与高三尖杉酯碱联用对白血病细胞的增敏效应[J];广东医学;2005年04期
4 费嘉,张洹;血管内皮生长因子反义核酸增强HL60和K562细胞对As_2O_3的敏感性[J];暨南大学学报;2004年02期
5 王建华,吴岳嵩,黄盛东,姜春鹏;反义VEGF165真核载体的构建[J];第二军医大学学报;2003年01期
6 赵永忠;血管内皮生长因子与消化系肿瘤关系的研究进展[J];国外医学.内科学分册;2002年01期
7 胡海燕;张洹;;以bcl-2为靶标siRNA提高HL-60细胞对三氧化二砷敏感性的探讨[J];中国肿瘤临床;2006年22期
8 谭先杰,刘东远;血管内皮生长因子研究进展与子宫内膜异位症[J];国外医学.妇产科学分册;2000年05期
9 王水,武正炎,范萍,查小明;血管内皮细胞生长因子在乳腺癌组织中的表达及其生物学意义[J];南京医科大学学报(自然科学版);2001年06期
10 毕蕙,李克敏;子宫肿瘤与血管生成[J];中国妇产科临床杂志;2001年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 赵忠芳;吕仁荣;霍然;傅洪滨;徐广琪;;普萘洛尔治疗增生期血管瘤患儿血清中VEGF、MMP-9的变化[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年
2 徐勇;黄仁魏;王东宁;林桂真;林东军;何易;李旭东;林曲;;急性白血病血管内皮生长因子(VEGF)和受体的表达及其临床意义研究[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
3 李飞;李树清;;VEGF表达在局灶性脑缺血后亚低温脑保护中的作用研究[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
4 赵忠芳;吕仁荣;霍然;傅洪滨;徐广琪;;普萘洛尔治疗增生期血管瘤患儿血清中VEGF、MMP-9的变化[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年
5 杜娟;王景美;钱晓萍;刘宝瑞;;COX-2和VEGF在胃癌中的表达和意义[A];中华医学会肿瘤学分会第七届全国中青年肿瘤学术会议——中华医学会肿瘤学分会“中华肿瘤 明日之星”大型评选活动暨中青年委员全国遴选论文汇编[C];2011年
6 田翀;彭晓琳;张嫦慧;唐玉涵;任玮叶;孙秀发;郝丽萍;应晨江;;VEGF在白藜芦醇缓解内皮细胞高通透性的作用[A];营养与慢性病——中国营养学会第七届理事会青年工作委员会第一次学术交流会议论文集[C];2010年
7 陈西华;;小鼠月经模型中Hif-1α对VEGF调节作用的研究[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年
8 梁国刚;;TGF-β1和VEGF在大肠癌中的表达及临床意义[A];第八届全国中西医结合普通外科临床与基础学术会议暨全国中西医结合外科危重病学习班论文汇编[C];2003年
9 廖圣恺;;5-LOX、CD-34、VEGF在涎腺黏液表皮样癌中的表达及意义[A];第八次全国口腔颌面—头颈肿瘤会议论文汇编[C];2009年
10 孙大军;杜建时;王征;臧广生;刘卓;;丹参与VEGF联合应用在动物肢体缺血模型中的实验研究[A];中国中西医结合学会周围血管疾病专业委员会第六届换届暨学术交流会论文集[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 由香港麦迪信医学出版有限公司供稿;VEGF“陷阱”有效抑制肿瘤[N];医药经济报;2002年
2 张中桥;VEGF对乳腺癌的生长起重要作用[N];中国医药报;2002年
3 新华社;VEGF有望成为预防动脉梗塞新药[N];中国医药报;2005年
4 冯世容;肝移植排斥反应研究获突破[N];中国医药报;2000年
5 王婷婷;肿瘤能否“饿死”[N];科技日报;2004年
6 文执 编译;抗癌新靶标 肿瘤内的血管[N];科技日报;2002年
7 王天堂;国产防腐新材料亮相[N];中国化工报;2002年
8 徐峰;肿瘤与血管生成息息相关[N];医药经济报;2001年
9 李俊;慎用“伤心”药[N];农村医药报(汉);2009年
10 蒲昭和;饮茶防癌的奥秘[N];中国医药报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 费嘉;VEGF mRNA反义核酸对白血病细胞药物敏感性的影响[D];暨南大学;2003年
2 陈刚;血管内皮生长因子对肺癌细胞株药物敏感性影响的初步研究[D];中国协和医科大学;2010年
3 张国鹏;两种核素报告基因系统用于监测治疗基因VEGF165表达的基础研究[D];华中科技大学;2010年
4 赵薇;细胞因子GM-CSF、VEGF对大鼠内皮祖细胞功能活性的影响及其信号转导途径的体外研究[D];中国医科大学;2008年
5 董宏伟;大肠癌形成过程中肿瘤血管生成与细胞凋亡的变化及VEGF和p53表达的意义[D];中国医科大学;2002年
6 彭湃;VEGF在慢性创面愈合中的作用及机理研究[D];第一军医大学;2004年
7 范海涛;Survivin与VEGF的检测及二者反义寡核苷酸对膀胱癌的治疗研究[D];吉林大学;2010年
8 杨秀鹏;Tryptase诱导AML骨髓基质细胞高表达VEGF及机制的研究[D];中国医科大学;2010年
9 叶琇锦;成人急性白血病患者骨髓血管新生及相关机理的实验研究和临床意义[D];浙江大学;2002年
10 张聚良;血管内皮生长因子变异体基因的构建、表达及表达产物体内诱导自身抗体产生的研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙洁;VEGF表达及微血管密度与三阴性乳腺癌及非三阴性乳腺癌临床病理特征的关系[D];广西医科大学;2010年
2 齐振平;非小细胞肺癌中VEGF及其受体Flt-1的表达及临床意义[D];大连医科大学;2010年
3 刘小兵;脑胶质瘤VEGF,bFGF,IGFBP-2在血浆和脑脊液的定量分析及意义[D];河北医科大学;2010年
4 张志学;肺腺癌中血管内皮生长因子及其受体的表达与血管生成及预后的关系[D];青岛大学;2001年
5 李磊;VEGF,MMP-2在胃癌中的表达及其与浸润和转移的关系[D];郑州大学;2002年
6 孙丹;Snail、VEGF、MMP-9在肝细胞肝癌中的表达及临床意义[D];山东大学;2010年
7 栾东风;锌对高糖条件下视网膜müller细胞分泌VEGF的影响[D];吉林大学;2010年
8 郭晓斌;在细胞三维立体培养模型中观察VEGF对H460细胞MMP-2表达的影响[D];兰州大学;2010年
9 刘冬梅;高糖环境下脂联素对人心肌细胞增殖及VEGF表达的影响[D];山西医科大学;2010年
10 王文儿;HIF-2α、CCR7和VEGF-C在结肠癌中的表达及意义[D];南华大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026