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《暨南大学》 2006年
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喜树碱对淋巴细胞体外行为的药理学作用

江颖娟  
【摘要】:目的: 通过建立体外淋巴细胞的活化、增殖、细胞周期和凋亡等模型,研究喜树碱(camptothecin,CPT)对淋巴细胞行为的药理学作用及其分子机理,旨在为新型免疫抑制剂的研究和开发提供免疫学理论依据。 方法: 无菌条件下分离小鼠淋巴结,用CPT处理细胞后,加入多克隆刺激剂刀豆蛋白A(concanavalin,ConA)或2-丁酸佛波醇酯(phorbol 12,13-dibutyrate,PDB)与离子霉素(ionomycin,Ion)进行刺激。利用荧光标记单克隆抗体、二乙酰羧基荧光素-琥珀酰亚胺酯(carboxyfluoresceindiacetate,succinimidylester or CFDA-SE,CFSE)染色,结合流式细胞术分析CPT对小鼠T淋巴细胞活化、增殖的影响。 分离小鼠淋巴结,用CPT处理细胞,加入多克隆刺激剂ConA或PDB+Ion。以碘化丙锭(propidium iodide,PI)结合流式细胞术分析细胞周期分布情况,AnnexinV-APC/CFSE双染结合流式细胞术并使用DNA Ladder凋亡检测试剂盒分析细胞凋亡的情况。 培养基中加入CPT处理Jurkat细胞,利用AnnexinV-FITC/PI双染、PI染色、AnnexinV-PE/DiOC_6(3)双染、NAO染色结合流式细胞术分别分析CPT对细胞早期凋亡、细胞周期分布特征,线粒体膜电势(Δψ_m)以及线粒体质量的影响。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R96

【参考文献】
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