刺激隐核虫（Cryptocaryon irritans）的传代、保存及刺激隐核虫病的防治研究

【摘要】：刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans Brown 1951)是一种寄生于热带、亚热带海水鱼类的纤毛虫，引起海水鱼类的“白点病”，近年来，该病对海水养殖业造成了巨大的危害。本论文将对该寄生虫的传代、保存以及综合防治进行系统地研究。论文由六部分组成：刺激隐核虫GD1株的标准化传代方法、低温保存对刺激隐核虫发育的影响、多种化学药物对刺激隐核虫自由生活阶段虫体的杀灭效果、几种口服化学药物对刺激隐核虫的防治效果、卵形鲳鲹对刺激隐核虫的免疫应答和免疫保护、被动免疫卵形鲳鲹防治刺激隐核虫病。 我们用同步发育的刺激隐核虫幼虫感染卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)(167.8±15.1g)，在优化的实验室条件下成功地建立起了刺激隐核虫GD1株传代的标准化体系，至今已稳定地完成了40个循环。这个标准化体系是：在水温27±0.5℃、盐度29～32‰条件下，在22：00～24：00之间，用脱包2hr内的幼虫按8000～15000幼虫。鱼~(-1)的剂量在黑暗中感染鱼体3hr，60hr后鱼皮肤和鳃上出现明显可见的滋养体，在接下来的24hr内几乎所有的滋养体都从鱼体上脱落形成包囊前体，用专门的收虫器收集脱落的包囊前体培养。培养60hr后，包囊开始释放出幼虫，幼虫孵化在24hr后达到高峰，此时收集幼虫进行下一次感染。完成一轮上述循环刚好1周，一轮循环可以收到约1000万个幼虫，产率最高达到122倍。幼虫脱包后存活时间最长达到了36hr以上。刚脱包的幼虫感染率达到64.6％，4hr后的感染率显著下降，8hr后的感染率仅有9.6％。本实验证实，卵形鲳鲹可以作为优秀的宿主用来进行刺激隐核虫的传播，该传代系统的成功建立为以后的研究工作打下了基础。 我们从本实验室的刺激隐核虫传代系统中收集包囊前体和包囊，保存在12℃中，每隔1个月检测一次寄生虫的孵化率和感染力。实验结果显示，寄生虫的孵化率和感染力都随着保存时间的增加而降低。包囊保存1个月后其孵化率和孵