收藏本站
《暨南大学》 2006年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

重组Osterix腺病毒的构建及其对成骨细胞周期影响的初探

李帆  
【摘要】:目的:探索腺病毒表达系统构建的条件,并以此为基础初步研究Osterix对C2C12细胞周期的影响。 方法:采用RT-PCR方法克隆Osterix基因片段,重组到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,经Pme Ⅰ酶切线性化之后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1用电穿孔法共转化进入大肠杆菌BJ5138,进行同源重组。经Pac Ⅰ酶切鉴定后,用脂质体法转染进入293A细胞,包装成重组腺病毒pAd-Osx。扩增、收集病毒颗粒,检测病毒滴度。感染C2C12细胞,用RT-PCR和Western Blotting检测目的基因的转录和表达。用流式细胞仪分析Osx基因对C2C12细胞周期的影响。 结果:成功构建Osterix重组腺病毒载体。收获病毒后,经测定病毒颗粒的滴度大约为2.25×10~8v·p/ml。将上述重组腺病毒pAdEasy-Osx感染C2C12细胞后,RT-PCR和Western blot检测结果证实,Osx基因可在该细胞中转录和表达。与正常细胞相比较,感染细胞增殖率明显上升,G1和G2期的细胞数减少,S期的细胞数增加。 结论:成功构建表达Osterix的重组腺病毒;Osterix具有促进C2C12细胞增殖的作用。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:Q78

手机知网App
【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 徐克武;黄晖;强胜林;;骨折三期辨证治疗对大鼠骨折愈合特异性转录因子表达影响的实验研究[J];甘肃中医学院学报;2012年05期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 张楠楠;不同运动方式对模拟失重大鼠骨密度、骨代谢生化指标及股骨Osterix表达的影响[D];华东师范大学;2010年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 田博;吴彬;逯南南;耿越;;基因治疗用腺病毒载体研究进展[J];科技信息(学术研究);2007年09期
2 苟克勉,安晓荣,田见晖,陈永福;动物乳腺生物反应器的现状和趋势[J];生物工程学报;2002年02期
3 王峰;刁勇;肖卫东;许瑞安;;重组腺相关病毒规模化生物包装技术[J];生物工程学报;2009年11期
4 赵丽琴;席斌;彭华松;;腺相关病毒(AAV)载体研究进展[J];生物技术进展;2012年02期
中国博士学位论文全文数据库 前9条
1 宁云山;人血小板生成素基因表达和调控的初步研究[D];第一军医大学;2001年
2 吴彬;悬浮培养293细胞生产腺病毒的工艺及BB102抗癌剂治疗小鼠Lewis肺癌的实验研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
3 徐莉;人补体调节蛋白基因的克隆、共表达及功能研究[D];武汉大学;2005年
4 刘殿峰;蚓激酶基因在牛乳腺中的表达及其转基因兔的建立[D];吉林大学;2006年
5 曹慧青;共表达CD/TK双自杀基因对血管平滑肌细胞增殖的影响[D];中国协和医科大学;2001年
6 杨向民;全人抗体高效真核表达载体的构建与表面重塑抗体rCAb1[D];第四军医大学;2008年
7 王三红;多基因融合转化技术体系的建立及转化酵母、烟草及八棱海棠的研究[D];南京农业大学;2007年
8 谢宇锋;腺病毒介导的ING4和IL-24共表达对肝癌的抑瘤增效和化疗增敏效应及分子机制[D];苏州大学;2009年
9 张勇;Ad-Flk1-Fc抑制膀胱肿瘤生长及血管生成作用的研究[D];第三军医大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郑若男;双基因共表达的Tet-on载体的构建和检测[D];福建师范大学;2010年
2 张兴海;人胆固醇酯水解酶重组腺病毒载体的构建[D];辽宁医学院;2011年
3 桑璐;利用Cre/lox重组系统筛选友好基因座[D];中国农业大学;2003年
4 徐青;山羊β-酪蛋白启动子指导的通用表达载体及乳腺暂时表达系统研究[D];中国人民解放军军需大学;2003年
5 王云龙;人血清白蛋白乳腺特异表达载体的构建及其在动物乳腺中的瞬时表达[D];吉林大学;2005年
6 杨瑞锋;人t-PA指形区缺失体乳腺特异性表达载体的构建及细胞表达研究[D];西北农林科技大学;2005年
7 陈小华;人IFN-β基因复制缺陷型腺病毒载体的构建[D];郑州大学;2006年
8 李雪;蚓激酶基因在奶牛乳腺中表达的研究[D];吉林农业大学;2006年
9 戴津泼;催乳素和t-PA乳腺共表达载体构建和细胞表达研究[D];西北农林科技大学;2006年
10 田博;规模化悬浮培养哺乳动物细胞生产腺病毒工艺的实验研究[D];山东师范大学;2007年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 耿红梅;郑陆;阎守扶;;运动—雌激素—骨代谢关系的研究进展[J];首都体育学院学报;2008年05期
2 马进,陈杰,丁兆平,张立藩;模拟失重九十天对大鼠长骨生物力学特性的影响[J];第四军医大学学报;1994年03期
3 谭雄进,孙永建,王前,郑磊;模拟失重对不同发育阶段大鼠骨代谢的影响[J];第一军医大学学报;2002年07期
4 乔建瓯,宁光,王铸钢;Osterix:与成骨细胞分化和骨形成有关的转录因子[J];国外医学.内分泌学分册;2004年04期
5 郭敏锋;刘强;孙海飚;;成骨细胞分化调控机制研究新进展[J];国际骨科学杂志;2006年02期
6 王洪志;人体内骨的代谢、骨质疏松与钙[J];衡水师专学报;2000年03期
7 王冰,张舒,吴兴裕;失重对成骨细胞基因表达和细胞功能影响的研究进展[J];航天医学与医学工程;2003年03期
8 付崇建,郁冰冰,杨连甲,张立藩;尾悬吊大鼠骨和骨髓中骨钙素的变化[J];航天医学与医学工程;2003年04期
9 郭芮,胡敏,孙振宇,薛京伟;模拟失重对大鼠下颌骨、腰椎和股骨组织结构的影响[J];航天医学与医学工程;2005年03期
10 曹新生,吴兴裕,吴燕红,杨连甲,张立藩;模拟失重大鼠后肢骨ALP、ACP、Ⅰ型胶原及生物力学的变化[J];航天医学与医学工程;2005年04期
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 王冰;模拟失重环境对大鼠骨肉瘤成骨样细胞MAPK信号转导功能的影响[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
2 郑惠玲;CHIP蛋白对小鼠前成骨细胞增殖与分化的调控[D];西北农林科技大学;2004年
3 张永宽;地塞米松对体外培养的人牙囊细胞成骨特性影响的实验研究[D];第四军医大学;2006年
4 潘贵超;骨折三期治则对家兔骨折愈合X线及BMP-2基因表达影响的实验研究[D];中国中医科学院;2007年
5 牛云飞;持续成骨力值刺激下犬骨盆弓状线骨折愈合的生物学研究[D];第二军医大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张培珍;不同负荷游泳运动对雄性老龄小鼠骨代谢状况影响的研究[D];北京体育大学;2000年
2 刘中博;Runx2能诱导Osterix在非成骨细胞内的基因表达[D];东北师范大学;2005年
3 赵虎;成骨细胞在新型生物反应器内的大规模扩增[D];大连理工大学;2006年
4 杨志;不同重力环境下流体剪切应力对人骨肉瘤成骨样细胞Cbfa1表达的影响[D];第四军医大学;2006年
5 李益广;成骨相关转录因子Osterix启动子调控机制初步研究[D];暨南大学;2006年
6 郭芮;模拟失重对下颌骨的影响[D];中国人民解放军军医进修学院;2007年
7 马涛;跳跃对生长期大鼠骨组织形态计量学和生物力学指标的影响[D];华东师范大学;2007年
8 郑庆云;纵跳对生长期大鼠骨密度、骨代谢生化指标及股骨BMP-2的影响[D];华东师范大学;2007年
9 牛秀荣;不同强度的长期游泳运动对生长期大鼠骨代谢的影响[D];河北师范大学;2007年
10 王攀;重力变化对人骨肉瘤成骨样细胞和脐静脉血管内皮细胞形态、增殖及周期的影响[D];第四军医大学;2007年
【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 梁晓霞;上坡和下坡跑台训练对云卵巢小鼠骨密度、骨代谢生化指标及成骨相关因子mRNA表达的影响[D];华东师范大学;2011年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 熊光明;两个抑制性基因的克隆[J];中国兽医学报;1989年01期
2 王家旺,梁萧,林晨,张雪艳,吴旻;腺病毒E1和E4区基因共存的细胞系的建立[J];科学通报;1997年09期
3 张艳丽;靶向腺病毒[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2001年02期
4 王俊伟;;腺病毒载体在基因治疗中的应用进展[J];科技信息;2011年20期
5 王守良,朱德钟,王华东,李光平,刘启富;鼻病毒与腺病毒抗原关系的观察[J];第三军医大学学报;1980年03期
6 苏霏,齐兵,齐义鹏;一种新的重组腺病毒的构建及其对人肿瘤细胞的影响[J];中国病毒学;1999年04期
7 郝春秋,周永兴,冯志华,李谨革,贾战生,王平忠;HCV结构基因腺病毒表达载体骨架质粒pAd.HCV-S的构建、鉴定及表达[J];医学研究生学报;2001年05期
8 杨佳荟,沈茜;小鼠FasL全长cDNA的克隆与FasL腺病毒载体的构建[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年01期
9 金天明;武迎红;;腺病毒及腺病毒载体的研究进展[J];天津农学院学报;2007年02期
10 陈枫;杜光红;赵新华;;HBsAg腺病毒疫苗载体的构建[J];泸州医学院学报;2007年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张珊文;肖绍文;;腺病毒携带p53基因对人胃癌细胞系放射增敏的作用[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
2 贾红梅;;腺病毒AV127株在非免疫鸭胚中增殖规律的研究[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(下册)[C];2009年
3 谭江琳;彭旭;袁顺宗;马兵;张小容;罗高兴;吴军;;人P311腺病毒表达载体的构建及表达[A];第八届全国烧伤外科学年会论文汇编[C];2007年
4 宋智琦;;MAP_2基因转染抑制恶性黑色素瘤细胞生长的研究[A];2003中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2003年
5 郑晓群;华科;彭颖;黄燕燕;杨军军;李宝青;;婴幼儿腹泻标本中腺病毒的检测及分型[A];2008年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2008年
6 路秀英;杨贵贞;;应用噬菌体展示短肽探索腺病毒表位[A];第七届中国抗炎免疫药理学术会议论文摘要集[C];2000年
7 王安训;黄洪章;;腺病毒介导CD/5-FC系统治疗舌癌的实验研究[A];第一届全国口腔颌面部肿瘤学术会议论文汇编[C];2001年
8 牛建强;夏咸柱;扈荣良;张守峰;黄耕;;应用细菌分子间同源重组机制快速克隆腺病毒基因组的研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
9 王永志;扈荣良;王莘;张守峰;李海涛;肖跃强;夏咸柱;;狂犬病病毒糖蛋白膜外区重组犬-2型腺病毒构建及免疫研究[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
10 陈娟;方怡;付欣;李冰;张锦;冉丕鑫;;氧化抗氧化失衡对腺病毒E1A蛋白活化NF-KB转录活性的影响及机制[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者  邱曙东;上海聚焦“科技小巨人”[N];解放日报;2006年
2 新讯;“胖病毒”可能是肥胖元凶[N];医药经济报;2007年
3 ;瑞士科学家发现病毒侵入细胞的过程[N];中国高新技术产业导报;2001年
4 张建中;肥胖之因也许是病毒[N];健康报;2000年
5 徐铮奎;美国闹流感 全球打喷嚏[N];医药经济报;2008年
6 ;几种呼吸道病毒性疾病表现[N];中国医药报;2006年
7 庄北宁;神秘变异感冒病毒,在美夺10命[N];新华每日电讯;2007年
8 小文;默克公司艾滋病疫苗可能增加感染HIV风险[N];中国医药报;2007年
9 记者 陈威华;病毒侵入细胞的过程已查明[N];新华每日电讯;2001年
10 欣华;肥胖可能由病毒引起并会传染[N];医药经济报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐建国;携带人内皮抑素基因的增殖型腺病毒对结肠癌的治疗作用[D];第二军医大学;2003年
2 郭明高;表面抗体基因在肝移植中抑制乙型肝炎病毒再感染的实验研究[D];第二军医大学;2005年
3 陈雄;携带内皮抑素基因增殖型腺病毒治疗卵巢癌的实验研究[D];第二军医大学;2006年
4 王亚轩;人端粒酶逆转录酶启动子调控的单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因重组腺病毒的构建及治疗膀胱癌的实验研究[D];河北医科大学;2005年
5 陈县城;白介素(IL)-12基因修饰间充质干细胞(MSCs)的抗肿瘤形成与抗转移研究[D];四川大学;2005年
6 苏国强;KDR启动子驱动的双自杀基因靶向治疗乳腺癌的实验研究[D];第一军医大学;2005年
7 韩增胜;腺病毒介导的人乳铁蛋白基因在兔和羊乳腺中高效表达的研究[D];西北农林科技大学;2006年
8 聂明明;hTERT启动子调控的增殖型腺病毒携带内皮抑素基因治疗胃癌的实验研究[D];第二军医大学;2002年
9 李月敏;肿瘤特异性增殖腺病毒CNHK 500治疗乳腺癌的实验研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
10 贾俊;重组腺病毒体外转染内皮细胞的研究[D];武汉大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李帆;重组Osterix腺病毒的构建及其对成骨细胞周期影响的初探[D];暨南大学;2006年
2 柯小亮;涎腺腺样囊性癌转基因治疗研究[D];吉林大学;2009年
3 李永强;P14ARF、P53基因表达与E1B-55KD缺陷型腺病毒治疗恶性肿瘤疗效关系研究[D];广西医科大学;2003年
4 孙钢;Nm23-H1cDNA片段克隆及腺病毒载体的构建[D];昆明医学院;2003年
5 祁霞;腺病毒载体介导血管抑素对小鼠Lewis肺癌的抑制作用[D];吉林大学;2009年
6 浦昀;新型多金属氧酸盐抗甲型流感病毒药效学研究[D];吉林大学;2005年
7 张巍;CNTF基因眼内转移治疗大鼠视神经损伤的实验研究[D];第三军医大学;2005年
8 郭寿贵;人低氧诱导因子1α及其突变型重组腺病毒载体的构建[D];第一军医大学;2005年
9 周及红;莪术油眼用凝胶治疗病毒性角膜炎的药效学研究[D];吉林大学;2006年
10 李敏然;腺病毒介导HBV载体表达双靶位shRNA抑制HBV转基因小鼠体内HBV表达的研究[D];河北医科大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026