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《暨南大学》 2009年
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汉防己甲素对联苯苄唑抗毛癣菌属活性增效作用实验研究

向守宝  
【摘要】: 目的:探讨汉防己甲素(Tet)对联苯苄唑抗毛癣菌属的活性增效作用,为临床治疗难治性皮肤癣菌感染提供新的思路及新的治疗方案提供实验依据。 方法 参照CLSI M38-A方案,采用肉汤微量稀释法测定汉防己甲素对红色毛癣菌的最大非细胞毒性剂量,以此为其联合联苯苄唑的剂量。测定并比较联苯苄唑单独及其联合汉防己甲素时对15株红色毛癣菌标准株的MIC值。 构建须癣毛癣菌引起的豚鼠皮肤癣菌病模型,将造模成功的20只豚鼠按随机数字表随机分为4组,分别外用含1%联苯苄唑、1%联苯苄唑+1%汉防己甲素、1%汉防己甲素和基质的霜剂进行治疗,通过对治疗后的皮损进行评分、皮损真菌学检查和皮损病理组织学检查,探讨汉防己甲素对联苯苄唑抗毛癣菌病动物模型的活性增效作用。 结果 汉防己甲素对红色毛癣菌的最大非毒性剂量是40μg/mL,在该浓度时红色毛癣菌的存活率>95%;联苯苄唑单独及其联合汉防己甲素(40μg/mL)时对15株红色毛癣菌标准株的MIC值范围分别为0.25~1μg/mL和0.0313~0.0625μg/mL;经配对t检验,有统计学意义(t=8.614 P=0.000),可以认为联苯苄唑联用汉防己甲素在体外抗红色毛癣菌活性强于单用联苯苄唑。 对于须癣毛癣菌所致豚鼠皮肤癣菌病动物模型治疗2天时,联苯苄唑治疗组和联苯苄唑+Tet组皮损评分下降,出现差异。经重复测量设计的方差分析可以看出,联苯苄唑+Tet治疗组比联苯苄唑治疗组下降幅度要大,联苯苄唑+Tet治疗组疗效强于联苯苄唑治疗组(F=93.49 P=0.00)。对于须癣毛癣菌性豚鼠皮肤癣菌病动物模型治疗5天时,联苯苄唑+Tet治疗组皮损真菌镜检和培养均阴性,而联苯苄唑治疗组在7天后皮损真菌镜检和培养转阴。须癣毛癣菌性豚鼠皮肤癣菌病动物模型基质组和Tet治疗组皮损无明显改善,局部皮损增厚,鳞屑多,在治疗和观察期间,真菌镜检和培养持续阳性。经重复测量资料的方差分析,对各治疗组皮损评分进行两两比较,联苯苄唑+Tet治疗组效优于联苯苄唑组(P=0.022),而基质组和Tet组没有统计学差异(P=0.552)。在分别取须癣毛癣菌性豚鼠皮肤癣菌病动物模型各组治疗第5天和第10天皮损做组织病理,HE染色和PAS染色,镜下可见联苯苄唑+Tet治疗组在治疗第5天时皮损病理除可见少许中性粒细胞浸润外,皮肤各层未见明显异常,治疗第10天皮损病理为正常豚鼠皮肤组织,PAS染色皮肤各层均未见菌丝。联苯苄唑组治疗第5天时,皮损病理可见角质层轻度肥厚,较多炎症细胞浸润,以中性粒细胞和淋巴细胞为主,PAS染色可见少量菌丝;第10天皮损病理显示:皮肤各层基本正常,未见菌丝。而汉防己甲素治疗组角质层和棘层明显肥厚,较多炎症细胞浸润,第10天皮损病理无明显改善,PAS染色可见较多菌丝。基质治疗组第10天和第5天皮损病理结果比较,炎症反应依然重,角质层和棘层进一步肥厚,并可见角质层炎症湖,PAS染色依然可见大量菌丝。 结论 1.汉防己甲素对红色毛癣菌的最大非细胞毒性剂量为40μg/mL。 2.汉防己甲素对联苯苄唑体外抗红色毛癣菌活性有增效作用。 3.汉防己甲素对联苯苄唑抗须癣毛癣菌性豚鼠皮肤癣菌病动物模型活性有增效作用。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R285.5

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