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《暨南大学》 2010年
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DAA-I的一般药理学及与丹参素的协同作用研究

李树成  
【摘要】: 目的:以天冬氨酸血管紧张素Ⅰ(DAA-Ⅰ)的一般药理学实验为主体,观察DAA-Ⅰ在低、中、高浓度应用时对动物正常情况下生命体征的影响,以评价该药物的安全性与可应用性。其次,观察DAA-Ⅰ单用和与丹参素联合应用时对实验性慢性心力衰竭(CHF)大鼠疾病模型死亡率的影响,以评价DAA-Ⅰ与丹参素合用时的安全性,进而评价两种药物联合应用时是否具有优势。以期为新药开发研究提供科学实验依据。 方法: 1、以完全随机法设立DAA-Ⅰ高浓度组(4053pmol/ml)、DAA-I中浓度组(1013pmol/ml)、DAA-Ⅰ低浓度组(506pmol/ml)和生理盐水对照组4组小鼠,以腹腔注射给药,分别在给药15、30、60、120分钟后,观察其一般行为活动表现变化、用SMART—1小动物行为记录分析系统检测其自发活动变化、用爬杆实验观察DAA-Ⅰ对小鼠协调运动的变化。 2、以完全随机法设立DAA-Ⅰ高浓度组(4053pmol/ml)、DAA-I中浓度组(1013pmol/ml)、DAA-Ⅰ低浓度组(506pmol/ml)和生理盐水对照组4组大鼠,麻醉大鼠后,行气管插管和颈动脉插管,接压力换能器、张力换能器和心电图导联与BL—420E生物机能实验系统相连后,以腹腔注射给药,通过BL—420E生物机能实验系统记录用药后15、30、60、120分钟后的心电图(ECG)、心率、呼吸频率、呼吸动度、收缩压和舒张压的变化。 3、以完全随机法设立丹参素组、DAA-Ⅰ中浓度组(1013pmol/ml)、DAA-I+丹参素组、单纯CHF模型组、生理盐水对照组5组大鼠。先行复制CHF模型,除生理盐水对照组外,各组均予以阿霉素(ADR)(用生理盐水稀释)腹腔注射用药(2mg/kg),每3天用药一次,连续5次后,每7天注射一次,累计用量20mg/kg;生理盐水对照组则予以等量生理盐水同样方法注射,累计用药7周。各组经ADR处理四周后,第五周起给予丹参素组(50mg/kg.d)、DAA-I中浓度组(1013pmol/kg.d)、DAA-Ⅰ+丹参素组(丹参素50mg/kg.d, DAA-I 1013pmol/kg.d)中的大鼠行腹腔注射用药,累计用药4周至实验结束,实验期间观察其食量、尿量和一般行为、精神状态变化及死亡率情况,实验观察持续8周。 结果: 1、小鼠一般行为活动表现:DAA-Ⅰ高浓度组、DAA-Ⅰ中浓度组、DAA-Ⅰ低浓度组和生理盐水对照组的小鼠均皮毛平顺,瞳孔大小如常、转动灵活,行动自如,步态正常,未见流涎、肌肉颤动、恐慌窜跳、大小便明显增多等异常举动。 2、小鼠自发活动:生理盐水对照组的静息时间与DAA-Ⅰ低浓度组和DAA-Ⅰ高浓度组比较有差异,生理盐水对照组的的静息时间更长(α=0.05,P0.05);其余各组两两之间比较,均无明显差异(α=0.05,P0.05) 3、小鼠协调运动:DAA-Ⅰ高浓度组、DAA-Ⅰ中浓度组、DAA-Ⅰ低浓度组和生理盐水对照组中的所有小鼠均达到0级标准,未见向下滑行、掉落、翻正反射消失等协调运动异常表现。 4、大鼠ECG、心率、呼吸频率、呼吸动度:各给药组的ECG、心率、呼吸频率、呼吸动度与生理盐水对照组及各组两两之间比较均无明显差异(α=0.05,P0.05) 5、大鼠收缩压:DAA-Ⅰ中浓度组和DAA-Ⅰ高浓度组的收缩压有明显的下降,DAA-Ⅰ中浓度组和生理盐水对照组比较有差异(α=0.05,P0.05),DAA-Ⅰ高浓度组有显著差异(α=0.05,P0.01);其余各组两两之间比较均无明显差异(α=0.05,P0.05)。 6、大鼠舒张压:DAA-Ⅰ中浓度组和DAA-Ⅰ高浓度组的舒张压有明显的下降,和生理盐水对照组比较有显著差异(α=0.05,P0.01),;其余各组两两之间比较均无明显差异(α=0.05,P0.05)。 7、复制CHF模型后,生理盐水对照组大鼠均无明显异常。其余四组从第3周起,开始出现不同程度的行动迟缓、饮食减少、腹泻等CHF早期表现。至第4周和第5周期间,单纯CHF模型组及各给药组开始出现腹水,单纯CHF模型组相对较早出现,症状严重者可见大鼠嘴唇四周发绀,眼结膜苍白,呼吸急促或微弱,毛发脱落,步态不利或趴伏不动,并出现个别死亡。给药组开始进行给药后,随着给药时间延长,大鼠开始减少死亡,CHF相关症状表现得到改善,尤以DAA-Ⅰ+丹参素组治疗效果较为明显。模型组症状未见明显改善。8周后,解剖模型组大鼠,可见肝脏重度肿大或硬化萎缩,由腹膜炎所导致的纤维性改变,网膜、肠管粘连增生,腹壁结节形成,肠道出现水肿和淤血等,偶而可见血性腹水,与相关文献报道的由ADR诱导所造之CHF模型的相关病理改变符合。 8、复制CHF模型后8周,丹参素组死亡率为40%、DAA-Ⅰ中浓度组(1013pmol/ml)死亡率为40%,DAA-Ⅰ+丹参素组死亡率为30%、单纯CHF模型组死亡率为50%、生理盐水对照组为0%。 结论: 1、DAA-Ⅰ在高、中、低三种剂量下对小鼠的一般行为活动及协调运动均无明显影响。 2、DAA-Ⅰ在中浓度下对小鼠的自发活动无明显影响,在高浓度和低浓度下存在的-定程度的中枢兴奋作用。推测可能为DAA-Ⅰ与AT1受体结合后,具有一定程度的双向调节作用,在低浓度和高浓度时均能激活RAS系统,使血管紧张素Ⅱ生成增加,刺激肾上腺皮质球状带,促使醛固酮分泌,潴留水钠,刺激交感神经节增加去甲肾上腺素分泌,增加交感神经递质,使自发活动增加。 3、DAA-Ⅰ在高、中、低三种剂量下对大鼠的呼吸频率和呼吸动度均无明显影响。印证前人研究认为DAA-Ⅰ是作为消炎痛敏感型的AT1亚型受体,起到拮抗AngⅡ并作用于心血管系统的作用,并不直接影响到呼吸系统。 4、DAA-Ⅰ在高、中、低三种剂量下对大鼠的心率,ECG的三项指标最大值、最小值以及峰峰值均无明显影响,与目前认为的DAA-Ⅰ作用机制一致,即通过拮抗AngⅡ起效的ARB类药物也并不会引起人体心率和ECG的改变。 5、DAA-Ⅰ在高浓度和中浓度下能使大鼠的收缩压和舒张压明显的下降,且二者之间并无明显差异,DAA-Ⅰ在低浓度下对大鼠的收缩压和舒张压均无明显影响。与前人研究结果互相印证,DAA-Ⅰ在低浓度下的作用并不明显,在中浓度和高浓度时起效也并不表现为剂量依赖型药物。 6、确保累积剂量前提下,采用阿霉素复制大鼠CHF模型是可靠有效的,造模后可出现蜷缩倦怠、纳食下降、伴有腹泻、唇周发绀、呼吸急促、毛发枯槁、腹腔积液、个别死亡等一系列CHF体征与症状。 7、DAA-Ⅰ中浓度单用、丹参素单用及DAA-Ⅰ与丹参素联合运用均可明显改善CHF相关症状。其中,DAA-Ⅰ中浓度+丹参素组死亡率达到30%为最低,优于DAA-Ⅰ中浓度和丹参素分别单用时的40%,显示出了一定的协同作用。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R285

【参考文献】
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