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《暨南大学》 2010年
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转基因何首乌毛状根悬浮培养体系对氯代香豆素生物转化研究

胡显镜  
【摘要】: 目的:本研究旨在通过结合有机合成方法与植物生物转化技术的方法来实现对外源化合物的生物转化,并对生物转化的转化条件、转化产量进行考察及对转化产物进行体外活性评价,有望为利用有机合成与生物转化技术工业化生产药用化合物提供科学依据。 方法:本论文首先通过Pechmann反应有机合成底物4-苯基-6-氯-7-羟基-香豆素(CBC01)和4-甲基-6-氯-7-羟基-香豆素(CC01),再利用转基因何首乌毛状根悬浮培养体系对CBC01及CC01进行生物转化,通过TLC和HPLC方法检测转化体系中的转化产物;利用柱层析、重结晶等方法分离纯化转化产物;运用'H-NMR, 13C-NMR、MS等方法鉴定转化产物结构;同时通过HPLC的方法进行生物转化的共培养条件的考察,并通过体外清除DPPH自由基实验来评价生物转化产物体外抗氧化能力。 结果:生物转化产物经结构鉴定分别为4-苯基-6-氯-香豆素-7-O-β-D-葡萄糖苷(CBCP1)及4-甲基-6-氯-香豆素-7-O-β-D-葡萄糖苷(CCP1); CCP1及CBCP1体外清除DPPH自由基的IC50分别为262.84 ug/ml、182.80 ug/ml,明显低于底物CC01及CBC01(CCO1及CBC01体外清除DPPH自由基的IC50分别为390.12及大于400 ug/ml);何首乌毛状根培养体系对CC01及CBC01的生物转化产物主要集中在培养物中,产率较高,其中对CBC01的转化在共培养第七天时候转化率达65.4%,而对CC01的生物转化在共培养5 d后转化率已达90%以上,毛状根培养体系对CCP1及CBCP1的分泌率均较低。
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R282.7

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