收藏本站
《汕头大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

移植人细胞的慢性粒细胞白血病小鼠模型的构建

朱华  
【摘要】:【研究背景】慢性粒细胞白血病(CML)是起源于造血干细胞的恶性骨髓增殖性肿瘤。90%以上患者有Ph染色体,t(9;22)(q34;q11)染色体易位并形成BCR-ABL融合基因,编码酪氨酸激酶,使正常细胞生长凋亡失去调控从而导致白血病的发生。酪氨酸激酶可以作为肿瘤靶向治疗的靶点,上世纪末,酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)的发明与应用,被称为肿瘤靶向治疗的完美典范。但TKIs治疗一旦中止,疾病常常会复发,说明TKIs只能抑制但不能将疾病治愈。新的临床问题重新激活对CML病理生理学机制的深入研究,从干细胞特性和骨髓造血微环境研究CML发病机制,开发新的治疗方案。因此有必要重新建立合理的疾病模型,为体内实验研究奠定可靠基础。 【研究目的】通过移植人类细胞的方法构建疾病模型,特别是在国际上首次应用CML患者骨髓原代细胞在新生NOG小鼠体内构建CML模型,较好地反映疾病在体内的演变过程,为转化医学研究及个体化治疗方案的探索提供一个很好的平台,为CML发病机制的研究、进行新药疗效试验及基因治疗等提供理想的动物模型。 【材料与方法】用三种方法将人细胞移植到小鼠体内:1.通过局部注射把K562细胞移植到NOD/SCID小鼠胫骨骨髓腔,两周后发现局部实体瘤,流式分析实体瘤及小鼠骨髓细胞特异抗原;2.分离CML慢性期患者骨髓单个核细胞,通过颞静脉注射把白血病细胞移植到新生NOG小鼠体内,16周后流式分析检测骨髓移植物情况;3.用慢病毒载体将BCR-ABL融合基因导入人脐带血干细胞并移植给NOG小鼠或种植在MS-5基质细胞培养系统中,从而观察是否可以造成CML模型。 【结果】颞静脉注射CML患者白血病细胞的NOG小鼠,脾脏组织切片可见白血病浸润,骨髓可检测到白血病细胞(表达人特异性标记抗原CD45);将BCR-ABL融合基因克隆到慢病毒载体,转染293T细胞,蛋白分子杂交分析可检测到BCR-ABL(p210)表达,载体克隆成功,可以用于构建动物模型的实验。此部分实验仍在进展中;移植K562细胞的NOD/SCID小鼠,注射部位可形成局部实体瘤,但骨髓中检测不到白血病细胞。 【结论】CML患者骨髓细胞在NOG小鼠体内容易形成白血病,与CML患者临床表现相似,是很好的CML模型;将BCR-ABL融合基因导入人脐带血干细胞,在NOG小鼠内可能建立慢粒样的疾病模型,这方面实验仍在进展中;静脉或胫骨注射K562细胞,不能在NOD/SCID小鼠体内形成白血病,这一途径不适于建立CML模型。
【学位授予单位】:汕头大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R733.7

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李忠俊,陈幸华,滕本秀,孔佩艳,王吉刚,彭贤贵,杨镇洲;白血病骨髓基质细胞促进Jurkat细胞抗药物诱导凋亡研究[J];第三军医大学学报;2005年21期
2 谢志尧;陈竺;;NUP98-HOXA9融合基因与白血病[J];国际输血及血液学杂志;2005年03期
3 李忠俊,滕本秀,陈幸华,孔佩艳,王吉刚,彭贤贵,杨镇洲;白血病骨髓基质细胞对白血病细胞屏蔽效应的体外实验研究[J];癌症;2005年06期
4 李忠俊,陈幸华,刘林,滕本秀,张曦,孔佩艳,王吉刚,彭贤贵,杨镇洲;白血病骨髓基质抑制化疗药物诱导的白血病细胞凋亡[J];重庆医学;2005年05期
5 李覃;王伟;李彤;;白藜芦醇调控白血病JAK1/STAT3信号转导通路的研究[J];中国实验血液学杂志;2008年04期
6 镇涛;陈赛娟;;中药成分靶向治疗急性髓系白血病研究进展[J];中国中西医结合杂志;2009年01期
7 冉茜;单佑安;李忠俊;;CRIF1基因的克隆表达[J];中国输血杂志;2010年12期
8 魏亚明,林继红,夏荣,兰炯采;可移植性人髓系白血病BALB/c小鼠模型建立(英文)[J];中国实验血液学杂志;2005年04期
9 周晓燕;邹琳;;白血病小鼠模型的建立与应用现状[J];分子诊断与治疗杂志;2011年03期
10 李学强;耿东升;刘发;;佳加钙口服液对铅中毒的防治作用[J];实用预防医学;2007年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 徐诚望;付汉江;王莉莉;郑晓飞;于力;;miR-138抑制K562细胞及CML病人肿瘤细胞的增殖[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
2 李慧玉;熊薇;陈小梅;孙黎;黄士昂;;比较白血病细胞衍生微泡及相应白血病细胞microRNA表达谱及分析在白血病中的作用[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
3 赵洁;黄卫国;宋颖;何洁;谭辉;苏琦;;急性早幼粒白血病HL-60细胞动物模型的建立与鉴定[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
4 胡欢开;刘彦信;郑德先;;TRAIL诱导白血病细胞凋亡过程中基因差异表达的研究[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
5 陈信义;高智捷;刘江涛;李自全;王玉芝;;薯蓣皂甙体外抑制白血病细胞增殖研究[A];第六届全国中西医结合血液病学术会议论文汇编[C];2002年
6 钱文斌;金洁;童茵;徐伟来;;急性白血病患者白血病细胞端粒酶逆转录酶及端粒结合蛋白mRNA表达的研究[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
7 殷红;陈子兴;岑建农;王玮;傅建新;姚利;;三丁酸甘油酯诱导白血病细胞增殖抑制、分化、凋亡及其机理的研究[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
8 祝毓琳;张英;杨英;杜金伟;朱平;;常见白血病融合基因筛查在白血病诊断和分型中的意义探讨[A];第四届全国RNA进展研讨会论文集[C];2005年
9 岑建农;陈子兴;李振江;邱桥成;;骨髓间充质干细胞对白血病细胞的作用[A];2005年华东六省一市血液病学学术会议暨浙江省血液病学学术年会论文汇编[C];2005年
10 谢晓宝;邱国强;盛立霞;;γ射线对白血病细胞B7分子、HLA抗原及抗原递呈能力的调节作用[A];2005年华东六省一市血液病学学术会议暨浙江省血液病学学术年会论文汇编[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 米力汪;白血病细胞分化机理新理论[N];科技日报;2006年
2 汪敏 仇逸;科学家提出低氧能够介导白血病细胞分化[N];中国高新技术产业导报;2003年
3 汪敏 仇逸;低氧能够诱导白血病细胞分化[N];新华每日电讯;2003年
4 汪敏 仇逸;低氧利于诱导白血病细胞分化[N];中国医药报;2003年
5 卢晶、余宁宁;我科研人员发现白血病“元凶”[N];人民日报;2005年
6 本报记者 顾介铸 本报通讯员 袁开建;创新,往往只是多问了句为什么[N];新华日报;2011年
7 汪敏 章米力;低氧诱导白血病细胞分化[N];健康报;2005年
8 市二院血液内科副主任医师 王智;治疗白血病贵在坚持[N];无锡日报;2006年
9 游雪晴;我首次用现代方法阐明中药复方治疗白血病机理[N];科技日报;2008年
10 张乐 余宁宁;我国科学家找到白血病致病基因[N];大众科技报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 金薇娜;细胞酸碱内环境对白血病细胞分化及耐药的影响及相关机制研究[D];北京协和医学院;2011年
2 罗依;CML酪氨酸激酶抑制剂分子靶向药物及异基因造血干细胞移植分层治疗研究[D];浙江大学;2012年
3 严俊;靶向脂筏及AMPK杀伤CML细胞的作用与机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
4 殷世亮;高三尖杉酯碱对白血病细胞的凋亡诱导作用及机制研究[D];沈阳药科大学;2011年
5 陶崑;GPI锚定修饰的bcr/abl和mIL-12真核双表达载体的构建及其抗白血病免疫效应研究[D];重庆医科大学;2008年
6 彭智;腺病毒介导的SH2-DED融合肽抑制CML细胞增殖和诱导凋亡的效应研究[D];重庆医科大学;2011年
7 秦群;甲基莲心碱逆转白血病细胞对STI571耐药及机制的研究[D];中南大学;2011年
8 许晓华;钙调素拮抗剂枸橼酸汉防已甲素抗慢性粒细胞白血病作用及其机制研究[D];浙江大学;2012年
9 林宁;人参皂甙Rb1对高脂饮食诱导C57/BL6小鼠肥胖的预防作用及机制探讨[D];第二军医大学;2010年
10 赵刚;细胞色素P450表氧化酶2J2基因过表达对血管紧张素Ⅱ诱导的APOE缺陷小鼠腹主动脉瘤形成的影响及机制[D];华中科技大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 朱华;移植人细胞的慢性粒细胞白血病小鼠模型的构建[D];汕头大学;2011年
2 张玉娟;慢性粒细胞白血病病人Mcl-1基因和bcr/abl基因的表达及临床意义[D];青岛大学;2011年
3 李婧;采用逆转录病毒技术建立人慢性粒细胞性白血病小鼠模型[D];浙江大学;2011年
4 黄猛;格列卫对慢性粒细胞白血病病人FoxO3a和bcr-abl融合基因表达的影响[D];青岛大学;2011年
5 肖宇航;甲基莲心碱增强伊马替尼对CML原代细胞的抑制作用及机制[D];中南大学;2010年
6 张海娇;伊马替尼治疗慢性粒细胞性白血病的分子学监测[D];吉林大学;2012年
7 胡会华;137例CML患者甲磺酸伊马替尼分子学疗效监控及耐药机制分析[D];华中科技大学;2011年
8 陈静;小鼠粒单白血病模型的建立及FK506和CSA对异基因造血细胞的免疫保护研究[D];南方医科大学;2010年
9 郭立杰;ABL-N对L1210细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制[D];河北医科大学;2011年
10 冯江芳;CML细胞硫氧还蛋白还原酶的活力测定及其抑制剂抗白血病的初步研究[D];山西医科大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026