收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

HMGB1的重组及其在血管生成中的作用

林青  
【摘要】:血管生成与多种疾病的发生、发展密切相关。炎症是导致血管异常增生的关键因素,而Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)在炎症应答中起重要作用。因此,本研究拟通过角膜血管生成(corneal neovascularization,CNV)模型,探讨TLR4及其内源性配体——高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box-1,HMGB1)在炎症导致的血管生成中的作用。 实验首先通过分子克隆方法构建HMGB1全长、HMGB1 A box和B box的表达载体,提纯出具有生物活性的重组蛋白,并免疫新西兰兔制备抗HMGB1多克隆抗体,体内、外实验鉴定抗体的纯度、特异性、活性和效价。之后建立小鼠碱烧伤CNV模型,通过基因敲除和拮抗剂阻断等手段,应用实时定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、组织病理学等检测方法,从分子、细胞和整体水平上探讨内源性HMGB1-TLR4信号通路在调节生物活性介质的表达、巨噬细胞的局部活化浸润等方面的作用。 研究结果显示,TLR4基因的缺失可明显抑制碱烧伤CNV的形成,减少烧伤角膜局部巨噬细胞浸润和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等生长因子的生成;而TLR2基因的缺失对CNV形成无明显影响。研究还发现野生型(wild type,WT)CNV模型小鼠角膜局部HMGB1和TLR4表达上调。烧伤角膜局部外用HMGB1活性蛋白可加重WT小鼠CNV的形成及角膜局部巨噬细胞浸润,但却对TLR4-/-小鼠无明显效果;HMGB1刺激体外收集的WT小鼠腹腔巨噬细胞后,其VEGF等生长因子表达上调的幅度显著高于TLR4-/-腹腔巨噬细胞,印证了体内CNV模型HMGB1给药的观察结果。HMGB1和TLR4的特异性拮抗剂眼表给药抑制WT小鼠CNV的形成及角膜局部巨噬细胞浸润,从另一角度说明了内源性HMGB1-TLR4信号通路在CNV形成中的重要作用。 总之,研究结果表明碱烧伤角膜局部内源性HMGB1-TLR4信号通路可增强巨噬细胞的活化浸润以及炎症介质、生长因子的分泌,从而介导CNV的形成。此发现为进一步阐明CNV的发生机理提供新的理论依据,同时也期望可为病理性新生血管相关疾病的防治提供新的思路和方法。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 徐建波;吴河水;张进祥;王琳;金钦文;田元;张景辉;张磊;;氯化钆对内毒素刺激后小鼠巨噬细胞Toll样受体表达的影响[J];中国普外基础与临床杂志;2006年06期
2 高辉;张海玉;单玉兴;;电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞TLR4和转接蛋白MyD88表达的影响[J];吉林大学学报(医学版);2009年01期
3 李明;陈伟强;李岩;高智群;邝枣园;简玲敏;;黄芩苷对脂多糖诱导的巨噬细胞NF-κB活化和炎症因子表达的影响[J];现代生物医学进展;2009年22期
4 张宗梁;巨噬细胞在烧伤感染中的作用研究[J];中华烧伤杂志;2004年01期
5 金顺子,单玉兴,刘树铮;不同剂量X射线诱导体内及体外小鼠巨噬细胞CD14的剂量效应关系[J];吉林大学学报(医学版);2004年04期
6 黄靓;张弛;谭立志;高勇强;王汉群;曾谷清;;HSV-1早早期蛋白0对巨噬细胞凋亡及分泌活性的影响[J];中南医学科学杂志;2011年01期
7 朱振东;贾俊琴;张旋;王庸晋;王殿华;;不对称二甲基精氨酸上调THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞内胆固醇酰基转移酶-1的表达(英文)[J];南方医科大学学报;2010年12期
8 管必隆;李维信;;小白鼠肝脏巨噬细胞的发生和分化[J];解剖学报;1965年04期
9 郭畹华;大脑皮质神经组织体外培养的初步观察[J];新医学;1973年01期
10 王文兴;补体系统的研究进展[J];安徽医科大学学报;1974年02期
11 涂洪章;;组织细胞病[J];国外医学.内科学分册;1974年03期
12 赵玉骅;急性硬化性全脑炎病例(SSPE)时细胞免疫功能的研究[J];国际流行病学传染病学杂志;1976年04期
13 夏佩莹;巨噬细胞对人恶性细胞的破坏作用[J];蚌埠医学院学报;1978年S1期
14 马佳毓;刀豆素A(ConA)对低浓度小鼠脾淋巴细胞的刺激——腹腔渗出细胞的作用[J];国际免疫学杂志;1983年05期
15 叶文源;自身免疫性溶血性贫血[J];中国医师进修杂志;1987年06期
16 何成雄;;中毒性表皮坏死松解症病理中的巨噬细胞[J];国际皮肤性病学杂志;1987年01期
17 尚红生,丁桂凤,邓玉兰,邓鸿业,龙振州;P388D_1传代细胞株产生IL-1效应的初步探讨[J];中国免疫学杂志;1988年01期
18 于一,郭艳茹,孟繁菁,岳旭;巨噬细胞在激活过程中形态和功能的改变[J];解剖学杂志;1988年02期
19 李蓉;张德山;王桂山;;“长寿灵”对小鼠巨噬细胞免疫功能影响的实验研究[J];中医药信息;1988年01期
20 程琪琳,邱德凯,张泳;虫草脂质体对小鼠巨噬细胞的作用[J];现代免疫学;1989年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 ;Low Doses of Bisphenol A Induce Mouse Spermatogonial Cell Proliferation by G-Protein-Coupled Receptor 30 and Estrogen Receptor-α[A];第六届全国环境化学大会暨环境科学仪器与分析仪器展览会摘要集[C];2011年
2 吴畏;;Regulation of Wnt receptor activation[A];第三届细胞结构与功能的信号基础研讨会论文摘要[C];2010年
3 ;β -Adrenergic Receptor Subtype Signaling in the Heart:from Bench to the Bedside[A];第八届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2011年
4 ;Identification of DK3 as a new agonist improving the transcriptional functions of estrogen-related receptor[A];2011年全国药物化学学术会议——药物的源头创新论文摘要集[C];2011年
5 ;Dissociation of FK506 Binding Protein 12.6 from Ryanodine Receptor Type 2 Is Regulated by cADPR but notβ-Adrenergic Stimulation in Mouse Cardiomyocytes[A];第十一次中国生物物理学术大会暨第九届全国会员代表大会摘要集[C];2009年
6 ;Neuronal activity regulate recycling of TrkB receptor[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
7 ;Association of Estrogen Receptor a Gene PvuⅡSite Polymorphisms and Risk of Coronary Heart Disease in Chinese Population:A Meta-Analysis[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
8 ;Functional Study of LRR-RLK Receptor Kinases and CLE Peptide Hormone in Plant Vascular Development[A];植物分子生物学与现代农业——全国植物生物学研讨会论文摘要集[C];2010年
9 ;Suppression of Epidermal Growth Factor Receptor Inhibits Epithelial-Mesenchymal Transition in Human Pancreatic Cancer PANC-1 Cells[A];中华医学会肿瘤学分会第七届全国中青年肿瘤学术会议——中华医学会肿瘤学分会“中华肿瘤 明日之星”大型评选活动暨中青年委员全国遴选论文汇编[C];2011年
10 ;Activation of sigma-1 receptor enhances synaptosomal Ca~(2+) via L-type C~(2+) channel in cortical neuron[A];第十一次中国生物物理学术大会暨第九届全国会员代表大会摘要集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 林青;HMGB1的重组及其在血管生成中的作用[D];汕头大学;2011年
2 朱武飞;自身免疫调节因子对巨噬细胞TLRs表达及其活化类型的影响[D];吉林大学;2011年
3 姚鸣;Rab7b和LAPF负向调控TLRs信号通路的效应与机制的研究[D];浙江大学;2010年
4 WAEL M.K.ELFEIL (维尔);鸭、鹅PRRs的克隆、分析及分布研究[D];吉林大学;2012年
5 吴静;巨噬细胞内DNA-PKcs协同Aire作用调节TLRs的表达[D];吉林大学;2012年
6 颜冬菁;Daintain在巨噬细胞RAW264.7中的功能研究[D];华中科技大学;2011年
7 马翠卿;GAS下调巨噬细胞炎症因子的作用及机制研究[D];河北医科大学;2011年
8 张晓艳;Toll样受体在小鼠受损生精细胞诱导睾丸炎症反应中的功能[D];北京协和医学院;2012年
9 单宁宁;IL-18/IL-18BP在ITP发病机制中的调控及其免疫干预作用探讨[D];山东大学;2010年
10 刘珊;雌二醇和孕酮对牛子宫内膜上皮细胞TLRs表达及功能的影响[D];吉林大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王宁飞;Rab7负向调控巨噬细胞中TLR3/4信号转导通路的研究[D];内蒙古农业大学;2011年
2 黄敏;抗TLR2抗体对TLR2信号转导途径的影响[D];南京医科大学;2010年
3 郭智莉;DHV-Ⅰ对鸭巨噬细胞TLRs信号通路的影响[D];西南大学;2012年
4 吕岩岩;重组hIL-10抗家兔皮肤移植反应中TLRs的变化[D];遵义医学院;2011年
5 孙晓琳;Rab5a蛋白调控巨噬细胞中TLR3/TLR4信号转导通路的研究[D];内蒙古农业大学;2013年
6 徐丽;锌指蛋白zbtb20对巨噬细胞TLR4信号转导的调控作用[D];第二军医大学;2010年
7 彭莉;TLRs在日本血吸虫病肝虫卵肉芽肿形成中的作用与机制初步研究[D];南华大学;2012年
8 陈志霞;WISP1与TLRs激动剂在巨噬细胞中协同促炎机制的研究[D];南昌大学医学院;2013年
9 张娣;鸡Toll受体的初步研究[D];南京农业大学;2011年
10 刘学;基于成纤维细胞模型的TLR3受体激动剂筛选[D];吉林大学;2013年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 兰克;以尝试用巨噬细胞治瘫痪[N];科技日报;2000年
2 冯卫东 刘霞;科学家构建出可模拟血液的人工蛋白[N];科技日报;2009年
3 梅进;改良植物基因研制抗艾滋蛋白[N];大众卫生报;2009年
4 记者 毛黎;科学家成功利用光亮控制蛋白活性[N];科技日报;2008年
5 浙江台州医院营养科 何晓琴;补蛋白一周仨鸡蛋[N];健康时报;2009年
6 唐颖 倪兵 陈代杰;巨噬细胞泡沫化抑制剂研究快步进行[N];中国医药报;2006年
7 刘霞;科学家发现天然抗流感蛋白[N];科技日报;2009年
8 记者 赵凤华 通讯员 王怀民;我科学家“看清”PTB蛋白是如何致癌的[N];科技日报;2010年
9 记者 朱敏丽;海元蛋白生物公司开业[N];泰州日报;2010年
10 记者 许琦敏;“铁泵”蛋白帮助回收铁元素[N];文汇报;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978