收藏本站
《汕头大学》 2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

大鼠血管球囊损伤后血管平滑肌细胞的增殖和凋亡与雷帕霉素的干预

石永英  
【摘要】: 背景:介入治疗是目前国内外广泛开展的冠心病非外科治疗的重要方法。其中经皮冠状动脉腔内成形术(percutaneous transluminal coronary angioplasty,PTCA)有效、简便、安全,是目前应用最多的介入治疗方法之一。近年来,在近百个国家和地区采用该方法治疗冠心病的病例已超过了同期外科搭桥病例数。然而,PTCA后冠状动脉再狭窄(Restenosis,RS)的比例较高,严重影响了PTCA的远期疗效。引起广大临床和基础科研工作者的极大关注,并进行了大量研究。实验室资料显示球囊扩张后再狭窄与血管弹性回缩、血栓的形成和机化,血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)过度增生及细胞外基质的聚集等有关。其中血管平滑肌细胞的过度增殖可能是再狭窄形成的主要原因。对血管进行球囊扩张后,血管内皮和中膜平滑肌细胞受到牵拉、损伤,在修复过程中在一系列生长因子的刺激作用下,VSMC过度增殖、并向内膜方向迁移。因而抑制VSMC过度增殖以防治再狭窄成为广大医务工作者关注和研究的课题。实验研究显示_P27蛋白和雷帕霉素等有较强的抑制细胞增殖的作用。 _p27蛋白是一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclin dependnt 助兴大尝医笋朦硕生~研羌生.早业讼戈. kinase inhibitor, CKI),通过抑制周期蛋白(cydin)和周期蛋白依赖性激 酶(eyelin dependllt kinase,CDK)来调节细胞周期。P 27基因的蛋白表达 形式有l2]:P27kiP,,P27Ick,P27巧c2等,其中P27饰,是最常见的蛋白表达形 式。P 27蛋白的高表达可显著抑制血管平滑肌细胞增殖,有望成为治疗 PTCA后再狭窄的新手段。 雷帕霉素扭apamycin)是一种已应用于器官移植后抗排斥反应的新型 免疫抑制剂,可通过不同途径调节细胞周期而抑制细胞增殖。资料显示 雷帕霉素有抑制P27蛋白降解的作用,但在对VSMC的增殖与凋亡之间 的关系尚无一致意见。 细胞凋亡是指细胞在一定的生理和病理条件下,遵循自身程序而结 束自己生命的过程。动脉球囊扩张后再狭窄过程中,可见有平滑肌细胞 的凋亡,但凋亡出现的时间和凋亡的程度目前尚无一致意见。 目的:本研究拟通过经皮球囊血管内成形术(percutaneous translulninal angioplasty, PTA)建立大鼠腹主动脉球囊损伤模型,研究P27 蛋白水平与血管平滑肌细胞增殖程度的关系及国产雷帕霉素的干预作 用。 方法:雄性SPrague一Dawley(SD)大鼠150只,分笼饲养于标准实 验房(22℃),给予规律光照(12h:12h),自由饮食,随机分假手术组(n=20)、 单纯球囊损伤组(n=40)、梭甲基纤维素组(n=40)和雷帕霉素给药组 (n科0)4组。假手术组单纯分离并结扎颈总动脉;单纯球囊组、梭甲基纤 维素对照组和雷帕霉素组球囊过度扩张损伤腹主动脉;梭甲基纤维素组 术后注射梭甲基纤维素钠液稀o.25m叭g,雷帕霉素组术后注射雷帕霉素 0.25m叭g。术中术后动物死亡10只。各组于术后3天、7天、14天、 21天及28天处死动物,取腹主动脉检测观察:1、常规制片,HE染色观 触兴大尝茵尝朦硕士研兑生‘较企讼戈. 察组织学结构。2、免疫组化法测定。一肌球蛋白和PCNA(Proliferating eeU nuclear antigen)检测大鼠血管平滑肌细胞增殖情况。3、westem一blot 法、流式细胞计数(now cytome甸,FcM)检测大鼠血管平滑肌细胞增 殖、凋亡情况及P27蛋白表达情况。 结果:1大鼠血管经球囊损伤后内皮细胞剥脱,内弹力板破坏、断裂, 7天时平滑肌细胞明显增殖,14天时增殖达到高峰并向内皮细胞层迁移、 增殖,术后28天细胞仍有增殖;雷帕霉素组新生内膜面积比对照组减少 36.4%(0.14士o.o3nunZ vs 0.23士o.o6nnnZ at 14 days,P0.02),内膜z中膜 之比少28.9%(17.7士3.37%vs 28.86士10.25%at 14 days,p0.01)。 2、l)细胞周期:14天时对照组G0一Gl期细胞数占总细胞数68.35士 6.32%,雷帕霉素给药组G0一Gl期细胞数占总细胞数82.55士7,51%,雷帕霉 素组vSMCGO一G,期细胞数明显多于对照组(P0 .01)。2)CDKZ和cydinE: 术后不同时间段各雷帕霉素给药组CDKZ,cycli五E表达均下降,14天时表 达明显低于对照组33.76士2.85 vs 22.83士2.10,和28.32士1.35 vs 18.32士 2.10(P0 .01)。3)术后3天、7天、14天、21天和28天雷帕霉素组 P27肠‘表达均高于对照组(P0.01),其中14天时P27兀p,最高67.4士2.5 vs 33.6士2.7。4)对照组和雷帕霉素组术后3天细胞凋亡率分别为9.1士 1.1%vs 14.2士2.1%,雷帕霉素组比对照组增高24.5士2.6%少0.01);至 7天时逐渐下降,14天、21天、28天时凋亡数降低。 3、雷帕霉素组血胆固醇升高1.28士0.42(术前)vs 1.”士0.47(术 后28天),肾功能、外周血白细胞计数无改变。 结论: 1、球囊过度扩张可损伤动脉血管,损伤后动脉血管平滑肌细胞开始 增殖;损伤后早期可见血管平滑肌细胞凋亡,其后有较低水平的细胞凋 肋义才学茵尝脂硕士研穷全笋.必落戈. 亡。 2、损伤后血管平滑肌细胞碑7蛋白的表
【学位授予单位】:汕头大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R543

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 季曙明,尹广,陈劲松,殷立平,沙国柱,周虹,黎磊石;雷帕霉素联合环孢素A预防肾移植急性排斥反应[J];肾脏病与透析肾移植杂志;2003年02期
2 郑克立,王长希,陈立中,唐孝达,范昱,闵志廉,齐隽,黎磊石,刘志红,季曙明;雷帕霉素联合环孢素和皮质类固醇预防肾移植急性排斥反应的临床研究[J];中华器官移植杂志;2004年04期
3 郭钧岩;雷帕霉素药物洗脱支架的临床疗效[J];中国康复理论与实践;2004年11期
4 徐卫亭,霍勇,陈明,洪涛,李拥军,高炜;雷帕霉素和甲氨蝶呤涂层支架预防支架内再狭窄的实验研究[J];中国介入心脏病学杂志;2004年02期
5 高华,史伟云,谢立信;新型免疫抑制剂雷帕霉素在眼科的应用[J];国外医学.眼科学分册;2004年03期
6 刘幼文,刘强,潘楚梅,金光临,罗剑峰,夏志奇,艾淑智,王凤山;雷帕霉素洗脱支架治疗支架内再狭窄的临床及冠状动脉造影随访观察[J];中华心血管病杂志;2005年05期
7 孙丹凤;房静远;;哺乳动物雷帕霉素靶蛋白及其与肝脏肿瘤关系的研究进展[J];中国实用内科杂志;2006年18期
8 陆云;廖春林;欧阳晓东;马云玉;许小兰;;国产雷帕霉素洗脱支架治疗冠心病的临床应用[J];新疆医学;2006年03期
9 杨明珍;吴德沛;袁艳慧;岑建农;常伟荣;朱子玲;冯宇锋;;雷帕霉素对Balb/C小鼠CD4~+CD25~+T细胞的调节作用[J];中国实用内科杂志;2007年S1期
10 金惠根;刘宗军;杨伟;汪蔚青;施佳;王东毅;方平;汪志华;于宏梅;沈峻;来莺;;直接国产雷帕霉素洗脱支架与裸支架治疗AMI临床疗效比较[J];上海医学;2007年S1期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张彤;梅长林;付莉莉;熊锡山;王丽;戴兵;;骁悉和雷帕霉素对常染色体显性多囊肾病治疗作用的实验研究[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年
2 沈晓芸;刘芳;唐乙;王全兴;;雷帕霉素促进Foxp3~+CD4~+CD25~+Treg细胞产生的分子机制[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
3 华雯;刘慧;夏丽霞;田宝平;陈志华;李雯;沈华浩;;雷帕霉素对哮喘小鼠骨髓嗜酸粒细胞祖细胞分化的影响[A];2011年第三十三届浙江省呼吸系病学术年会暨呼吸疾病诊治新进展学习班论文汇编[C];2011年
4 赵妍敏;周倩;黄河;;雷帕霉素对Jurkat细胞作用及机制研究[A];2007年浙江省血液病学术年会论文汇编[C];2007年
5 李学旺;;雷帕霉素在慢性肾脏疾病治疗中的作用[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会专题讲座[C];2006年
6 蔡勇;陈琰;郑少玲;陈必成;夏鹏;杨亦荣;;雷帕霉素对于蛋白负荷肾病大鼠模型肾脏的影响[A];2007年浙江省器官移植学术会议论文汇编[C];2007年
7 张胜利;祝仕清;牛长群;;国产雷帕霉素在恒河猴的药代动力学研究[A];2002年灵长类实验动物学术交流会论文摘要集[C];2002年
8 程元荣;郑卫;;新分子靶位mTOR与雷帕霉素类药物[A];创新药物及新品种研究、开发学术研讨会论文集[C];2006年
9 尤庆生;陈宏林;孟小勇;;血管外雷帕霉素缓释涂层抑制桥静脉再狭窄的实验观察[A];中华医学会第七次全国胸心血管外科学术会议暨2007中华医学会胸心血管外科青年医师论坛论文集心血管外科分册[C];2007年
10 董莹;黄一飞;皮裕璃;;雷帕霉素对角膜移植术后VEGF的影响[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报特约撰稿人 徐铮奎;雷帕霉素:新用途催生大市场[N];医药经济报;2009年
2 欧飒;或许真有“长寿药”,但真能带来快乐?[N];新华每日电讯;2009年
3 马艳红;雷帕霉素药物释放支架安全、有效[N];中国医药报;2002年
4 方方;雷帕霉素药物支架可降低冠心病再梗率[N];医药经济报;2006年
5 本报记者 冯卫东;雷帕霉素成为首种可延长哺乳动物寿命的药物[N];科技日报;2009年
6 记者 于春;药物支架会增加心脏病患者死亡率[N];科技日报;2006年
7 金义光杜丽娜;抗衰老研究:从基因到药物[N];中国医药报;2007年
8 实习生 李娜 本报记者 袁志勇;新发现可以阻断肿瘤通路吗[N];科技日报;2010年
9 中国医学科学院阜外心血管病医院工程院院士 高润霖;药物涂层支架[N];健康报;2003年
10 高润霖;2006心脏介入治疗破壁之年——迎接药物洗脱支架临床普及应用新时代[N];中国医药报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈光;雷帕霉素类抗肿瘤药物疗效预测的候选生物标记物研究[D];沈阳药科大学;2010年
2 刘海涛;雷帕霉素抑制内皮细胞增殖和迁移:PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号通路的作用[D];第四军医大学;2010年
3 陈希杨;高产雷帕霉素吸水链霉菌的遗传改造和发酵过程优化[D];浙江大学;2011年
4 陈先国;mTORC1和mTORC2调控雷帕霉素介导的前列腺癌DU145细胞AKT和ERK磷酸化[D];华中科技大学;2010年
5 邸若岷;雷帕霉素改善小鼠心肌梗死后心室重构的分子机制研究[D];南京医科大学;2010年
6 孙厚荣;雷帕霉素电纺丝缓释药膜抑制大鼠自体移植静脉狭窄的实验研究[D];山东大学;2012年
7 吴兴利;氧化低密度脂蛋白与胰岛素样生长因子-1促进血管平滑肌细胞生物学改变的信号转导机制及药物干预作用[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
8 谢李;HSP70调控雷帕霉素对鼻咽癌细胞生长抑制作用分子机制研究[D];中南大学;2010年
9 赵莉;TNF-α与过氧化氢通过mTOR非依赖途径激活p85 S6K1[D];南方医科大学;2010年
10 王岚;哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对脂多糖所致急性肺损伤的影响[D];中国协和医科大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 石永英;大鼠血管球囊损伤后血管平滑肌细胞的增殖和凋亡与雷帕霉素的干预[D];汕头大学;2003年
2 许端敏;大鼠球囊损伤后主动脉壁MMP3的变化及雷帕霉素的干预作用[D];汕头大学;2003年
3 陈广顺;雷帕霉素对大鼠肝脏缺血再灌注保护作用的研究[D];中南大学;2010年
4 徐志育;冠心病患者应用国产和进口雷帕霉素药物洗脱支架对比研究[D];山西医科大学;2010年
5 刘真;冠心病“真实世界”国产雷帕霉素洗脱支架长期疗效观察[D];大连医科大学;2010年
6 司强;雷帕霉素在人肺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用[D];郑州大学;2010年
7 李全林;索拉非尼对雷帕霉素诱导的肝细胞癌PI3K/AKT及MAPK信号通路异常活化的拮抗作用[D];复旦大学;2010年
8 寇晓文;雷帕霉素对裸鼠皮下移植胶质瘤VEGF,HIF-1a表达的影响[D];中南大学;2010年
9 陈鹏;雷帕霉素产生菌吸水链霉菌ATCC367817菌体25kD蛋白质的纯化 [D];福建医科大学;2004年
10 孙颖;雷帕霉素诱导大鼠肝星状细胞凋亡的研究[D];福建医科大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026