收藏本站
《华南理工大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

传统发酵酱油生理活性成分的分离鉴定及作用机制研究

李莹  
【摘要】:本文以发酵酱油的生理活性物质为研究对象,在综合评价酱油基本成分指标及抗氧化活性的基础上,利用有机溶剂分级、正相硅胶柱层析、薄层制备层析、核磁共振、高分辨质谱、单晶X射线衍射、二极管阵列液质色谱、气相色谱-质谱联用等分离和鉴定手段,结合细胞模型评价体系,从发酵酱油中分离鉴定得到一种抗溃疡成分和四种具有诱导Ⅱ相酶活性的成分,并探讨其中的β-咔啉在食品模型体系中的形成规律及影响因素,最后对活性成分的分子作用机制进行深入研究,得出Ⅱ相酶诱导剂通过代谢激活和细胞信号传导的途径提高Ⅱ相酶表达的模型。 采用主成分分析(PCA)、聚类分析(CA)和偏最小二乘回归(PLS)等多元回归分析法,探索了41种市售酱油样品的基本成分与抗氧化性的内在关系。结果表明,生产地区、发酵工艺和酱油类型对酱油的品质有显著影响;CA综合各指标对样品归类,评价出抗氧化能力优异的样品集群;根据PLS的分析,对抗氧化性起主要贡献的两个指标是酱油固形物和褐变指数。 运用现代分离鉴定技术对华南地区生产的高盐稀态酱油进行分离纯化,首次在酱油乙酸乙酯提取物(EAE)的非极性部分中鉴定出一种抗溃疡成分——双环内酯素(dihydrocanadensolide),建立了以高精仪器为基础的相关鉴别和科学定量方法。双环内酯素在酱油发酵期间不断累积,发酵90天其在酱醪中的浓度可达169mg/L。在6个月的酱油储存期中,双环内酯素的稳定性较好,其含量在在冷藏储存(4℃左右)的样品中无显著变化,而在室温储存的样品中仅下降了14%。 采用Hepa 1c1c7细胞醌还原酶(QR)活性示踪法,结合柱色谱、薄层制备色谱、核磁共振、高分辨质谱等分离和鉴定技术,从酱油EAE的弱极性部分中分离得到4种QR诱导成分:儿茶酚、大豆苷元、flazin和perlolyrin(后两者为β-咔啉类化合物),它们使细胞的QR活性加倍所需的浓度(CD值)依次为8μM、35μM、42μM和2μM。蛋白免疫印迹证实,这些活性物质诱导QR酶的表达量与诱导QR酶活性相一致。其中,β-咔啉类化合物的QR诱导活性为首次报道。 研究了水相体系条件对四氢β-咔啉产物的形成和QR诱导活性的影响。结果表明,低pH与高温更利于Pictet-Spengler反应的进行,色氨酸与羟甲基糠醛在体系pH是1、4、7时所得产物的CD值分别为4.0、25.1、46.7μg/mL,而pH值为10时,反应产物不存在CD值。色氨酸与香兰素的反应产物也有较好的QR诱导活性(CD值为11.8μg/mL)。此外,基于Pictet-Spengler原理对perlolyin进行有机合成,所得的合成化合物与天然分离化合物的QR诱导活性一致。 以Hepa 1c1c7和Hep G2细胞模型,探讨了酱油癌症预防成分的分子作用机理。结果表明,儿茶酚的作用机制中包含非典型的氧化应激过程,而Flazin、perlolyrin和大豆苷元则产生氧化还原信号。Flazin和perlolyrin的活性发挥须经细胞色素P450的1A2亚族酶进行代谢激活。Perlolyrin的信号传导经由PI3K通路,但未影响转录因子Nrf2的核转录水平;儿茶酚的信号传导是通过抑制p38激酶信号通路,上调了Nrf2的核转移量从而增加了QR酶的表达;flazin则是激活了p38信号通路增强了QR酶的表达,且Nrf2也是其信号转递的一个重要环节。
【学位授予单位】:华南理工大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:TS264.21

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 ;海鸥牌酱油[J];商场现代化;1985年09期
2 ;湖羊牌冷餐酱油[J];商场现代化;1985年09期
3 刘文俊,戚生初,苑绍华;酱油辐照改性研究Ⅰ.过氧化物及其稳定性[J];食品科学;1993年11期
4 何青;酱油卫生质量的调查研究[J];中国调味品;1995年09期
5 王维华,吴竞芳;新型食品防腐剂富马酸二甲酯(DMF)在调味品中防腐作用的研究[J];中国调味品;1995年11期
6 张水华,罗瑞山,陈艳,宋秀光;酱油对活性氧自由基的消除作用研究[J];中国调味品;1996年09期
7 赵金星,刘红薇;生化法制作酱油的初步研究[J];辽宁大学学报(自然科学版);1996年04期
8 ;美食商场[J];中国食品;1998年12期
9 蒋耀庭,刘英;静电场处理酱油改善理化指标的研究[J];中国酿造;1999年03期
10 李宁洲;低盐固态酱油生产过程中各因素的控制[J];中国酿造;2004年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 冯云子;赵谋明;;高盐稀态酱油制作过程中工艺关键点对风味物质形成的影响[A];管产学研助推食品安全重庆高峰论坛——2011年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨全国食品科学与工程博士生学术论坛论文集[C];2011年
2 冯云子;赵谋明;欧阳珊;徐欢欢;陈之瑶;;酱油制曲过程中脂类物质的变化研究[A];2010年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨华南地区农产品加工产学研研讨会论文摘要集[C];2010年
3 梁国明;楼福乐;童国英;;超滤法精制酱油和食醋的研究应用[A];第二届全国膜分离技术在食品工业中应用研讨会论文集[C];2006年
4 沈育芬;周新月;陈移亮;林耀辉;;灵芝酱油的研制[A];全国第6届食用菌学术研讨会论文集[C];2001年
5 刘毅;李富茹;徐幼芝;戴尧天;;酱油强化铁的方法探讨[A];中国营养学会第四届全国学术会议论文摘要汇编[C];1984年
6 姜宏;曲青;梁晓宇;;单离子扫描技术测定酱油中3-氯-1,2-丙二醇的研究[A];新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C];2002年
7 王学文;原小寓;于泓;;离子排斥色谱法测定酱油中的有机酸[A];第11届全国离子色谱学术报告会论文集[C];2006年
8 杨峥;李连生;邓旭;李非;石煌;;酱油中香气成分的剖析[A];北京食品学会青年科技论文集[C];1992年
9 香婷;;关于提高原池浇淋酱油出品率的研究[A];北京食品学会2004年论文集[C];2004年
10 蒋耀庭;;电场对香气成分的影响[A];中国物理学会第九届静电学术年会论文集[C];2000年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 王明亮 刘浦泉;北京酱油食醋抽查合格率高[N];新华每日电讯;2003年
2 本报记者 林懿 实习生 杨彦;一瓶小酱油 可做大文章[N];重庆日报;2004年
3 邓晓兵;湖北酱油四成不合格[N];中国食品质量报;2003年
4 王传涛;郭德纲当教授别只“打酱油”[N];深圳商报;2011年
5 ;酱油食用小常识[N];吉林农村报;2008年
6 本报记者 姜兴;劣质酱油何时休[N];中国食品质量报;2000年
7 记者 段世文;酱油醋须亮明出身[N];新华每日电讯;2000年
8 咎爱宗;酱油与醋咋卖[N];经理日报;2002年
9 谭少容;酱油食醋有了“国标”与“行标”[N];光明日报;2001年
10 文一;新型酱油:调出营养健康味[N];中国旅游报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李莹;传统发酵酱油生理活性成分的分离鉴定及作用机制研究[D];华南理工大学;2011年
2 高献礼;高盐稀态酱油在发酵和巴氏杀菌过程中风味物质形成和变化的研究[D];华南理工大学;2010年
3 董菁;含有异喹啉、β-咔啉骨架的具有生理活性化合物的合成新方法研究及其应用[D];华东理工大学;2012年
4 张艳芳;多菌株制曲促进酶系优化与提高酱油质量的研究[D];江南大学;2009年
5 邹忠杰;九节菖蒲、泥胡菜*及宽叶大戟化学成分研究[D];中国协和医科大学;2006年
6 张朴永;咔啉类和吡咯类海洋生物碱及其类似物的设计、合成与生物活性研究[D];中国海洋大学;2010年
7 解华东;液质发酵食品紫外光谱特性研究及鉴真技术体系建立[D];西北农林科技大学;2010年
8 杨建香;六种中国南海红树林内生真菌次级代谢产物的研究[D];中山大学;2010年
9 郑燕玲;海洋活性生物碱fascaplysin的分子药理学研究[D];宁波大学;2010年
10 徐涤;海带外生菌的初步研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郑家概;酱油中氨基酸特征图谱分析研究及生产工艺鉴定[D];华南理工大学;2010年
2 冯志成;酱油多菌种发酵风味物质的形成与应用研究[D];安徽工程大学;2010年
3 黄毅;酱油中氨基酸和香气的分析及质量评价[D];河北农业大学;2012年
4 侯宗霞;提高酱油残渣中蛋白质利用率的研究[D];暨南大学;2012年
5 胡华;羟脯氨酸的测定及其在酱油掺假鉴定中的应用[D];西南大学;2010年
6 贾吉丰;平湖老鼎丰酱园研究[D];华东师范大学;2010年
7 谢显华;酱油发酵过程微生物群落结构的动态研究[D];华南理工大学;2010年
8 罗龙娟;不同制曲和发酵工艺条件对高盐稀态酱油品质的影响[D];华南理工大学;2011年
9 刘浏;β-咔啉衍生物的合成及其抗肿瘤活性研究[D];湖南师范大学;2011年
10 杨冰;β-咔啉类生物碱的合成及其生物活性[D];西北农林科技大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026