豆制品转基因检测方法的研究

【摘要】：近年来，转基因技术的研究取得了极大的发展。2013年，全球转基因作物种植面积为1.75亿公顷，与1996年的170万公顷相比，增长了100倍多。目前，对于转基因食品的安全性尚无定论，但出于其可能存在的不可预知的潜在危险，消费者纷纷要求对转基因食品具有知情权和选择权。根据我国的相关规定，销售的食品若含有转基因成分，应该予以标识，但实际生活中，很多产品都未按照规定进行标识，而进入加工环节的转基因原料更难以进行有效监管。因此，转基因产品的检测成为有效实施监管的一个重要工具。 目前，常用的转基因食品检测方法主要为核酸定性PCR法，实时荧光PCR法及LAMP技术。对常用的检测方法进行比较研究，可选择合适的方法进行检测，从而提高检测的效率及准确度。本论文主要研究内容和结果如下： ⑴豆制品DNA提取方法的比较与筛选。选取豆腐、豆干、油豆腐、腐竹、腐乳5种豆制品，分别用改良CTAB法、改良试剂盒法及磁珠法提取DNA，对提取得到的DNA的浓度、纯度等进行比较。结果表明，改良CTAB法虽然步骤繁复，但提取得到的DNA较好地满足研究要求，也能适用于5种不同的豆制品，单个样品的费用也较低，适合在大批量的检测中使用。 ⑵豆制品转基因成分检测方法的研究。在稳定性、灵敏度和特异性等方面，对核酸定性PCR法、实时荧光PCR法及LAMP技术进行比较。结果表明3种方法都能满足我国现行标准的检出限的要求，但不同外源基因的检出限有一定差别。 ⑶广州市售豆制品转基因情况的调查。采用改良CTAB法提取大豆DNA，利用核酸定性PCR法、实时荧光PCR法及LAMP技术对外源基因CaMV35S，NOS和EPSPS进行检测。研究结果表明，在检测的159份散装豆制品中，87份检出转基因成分；在48份预包装豆制品中，18份检出转基因成分。散装豆制品无任何食品标签，预包装豆制品也均无转基因食品标识，因此亟待加强监管。