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《华南理工大学》 2002年
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重组人源抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌和巴氏毕赤酵母中的表达、纯化与性质鉴定

熊盛  
【摘要】:乙型肝炎病毒感染是全球性公共卫生问题,现有3.5 亿患者受其困扰,能和乙肝病毒表面特异性位点结合并封闭其侵袭肝细胞活性的单克隆抗体和抗体片段是唯一能用于紧急预防的生物制品。本文在前期工作的基础上,将筛选到的抗HBsAg Fab 片段改造成单链抗体(single-chain Fv against HBsAg, HBscFv),分别在大肠杆菌和巴氏毕赤酵母中表达,并对表达产物进行纯化及体内外生物学活性和理化性质鉴定。 采用基因重叠延伸拼接法构建抗HBsAg 单链抗体基因,测序确认后,亚克隆至原核表达载体pQE-40,获得表达质粒pQE-HBscFv,并转入宿主菌E.coli M15[pREP4],获得工程菌M15[pQE-HBscFv];工程菌经IPTG 诱导后,合成大量重组HBscFv,其含量可达菌体总蛋白的31.2%;进一步实验表明,重组HBscFv主要以包涵体的形式存在于细胞质中;将表达质粒pQE-HBscFv 转化有利于二硫键形成的氧化还原系统缺陷型宿主菌E. coli Origami(DE3),产物仍为包涵体;对包涵体进行简单复性后测定复性产物活性,结果表明,重组HBscFv 具有特异性结合HBsAg 活性。 对大肠杆菌表达的HBscFv 包涵体进行纯化和复性。优化条件诱导HBscFv表达,获得的包涵体采用4 种方案分别进行纯化,发现以IMAC 一步法纯化可得纯度超过85%的HBscFv,IMAC/GF 组合方案可得纯度超过97%的蛋白;对纯化的包涵体采用多种方法复性,发现透析法比稀释法或层析柱原位复性法效率更高,在透析复性法中,盐酸胍透析复性法比尿素透析复性法效率要高;在最优的复性条件下,蛋白回收率为(61.08±1.45)%,相对比活性为(2.66±0.13) A450/630 U/μg;在摇瓶培养阶段,重组HBscFv 的纯化产量为34.7 mg/L。 对重组HBscFv 的生物学活性和理化性质进行鉴定。非竞争酶免疫法亲和常数测定结果表明,HBscFv 是中等亲和力抗体,亲和常数为(2.30±0.32)×107 M-1;利用转基因小鼠测定重组HBscFv 在体内的中和活性,发现重组HBscFv 具有体内中和活性,中和效价为31.58 U/mg。应用MALDI-TOF MS 测定HBscFv 分子量,发现HBscFv 分子量为27314Da,与理论值相差只有8Da;对HBscFv 进行肽质量酶谱分析,结果在质谱图上找到超过60%的酶解片段,并且包含N 末端的5 个连
【学位授予单位】:华南理工大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R392

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【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 王秀敏;烟草蚀纹病毒CP、HC-Pro基因克隆及与甘蔗花叶病毒之间交互保护作用的研究[D];西北农林科技大学;2006年
2 张建新;西瓜花叶病毒基因组全序列分析及其蚜虫体内受体蛋白的分离与鉴定[D];西北农林科技大学;2007年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 高荣凯,王琰,朱迎春,刘群英,化冰,高兴举;抗乙肝病毒表面抗原单链抗体在大肠杆菌中的高效表达[J];海军总医院学报;1996年04期
2 毛春生,宋宏彬,李季枝,于长明,王海涛;抗HBsAg抗体Fab段在大肠肝菌中的高效表达与复性[J];免疫学杂志;1999年04期
3 粟宽源,任向荣,余宙耀,张宜俊,高辉,杨安钢;工程化人源性抗-HBs Fab片段抗原结合位点的研究[J];上海免疫学杂志;1999年06期
4 余宙耀,粟宽源,任向荣,曾平鲁,张宜俊,高辉,高磊;工程化人源性抗-HBs Fab抗体的制备、纯化和鉴定[J];上海免疫学杂志;1999年02期
5 朱迎春,王琰,高荣凯,刘群英,化冰,陈宇萍;大肠杆菌表达的单链抗体柱复性的研究[J];生物化学与生物物理进展;1999年02期
6 杨剑莹,惠静毅,李光地,汪垣,袁汉英,李育阳;带有PreS的重组乙肝表面抗原在毕赤酵母中的表达[J];生物化学与生物物理学报;2000年02期
7 王学,王海涛,陈万荣,徐静;人抗体组合文库的构建和抗HBsAg噬菌体抗体的筛选[J];生物化学与生物物理学报;1997年02期
8 高辉,高磊,纪宗玲,路凡,陈南春,陈苏民,余宙耀,张宜俊,尤玉琴,粟宽源;一株人源性抗HBsAg抗体Fab片段的筛选及序列分析[J];细胞与分子免疫学杂志;1998年02期
9 熊盛,林剑,洪岸,刘杰森,张玲,李志英,姚汝华;pET3c衍生载体的构建及应用研究[J];药物生物技术;2001年01期
10 李光富,唐家琪;基因工程抗体在临床上的应用[J];药物生物技术;1999年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王建平;柴立和;;蛋白质分子网络的分形结构[J];安徽农业科学;2007年06期
2 李艳琴;王振海;秦建华;李潭清;;鸡球虫病免疫防治研究进展[J];安徽农业科学;2008年13期
3 蔡渡江;王联结;;基于电子效应的氨基酸分类与二级结构的倾向性分析[J];安徽农业科学;2010年36期
4 李少芬;有机化学教学中导入新课的几种方法[J];安徽卫生职业技术学院学报;2002年01期
5 王晓慧;;基因组研究和后基因组研究[J];安徽卫生职业技术学院学报;2006年03期
6 方瑾,宋今丹;抗人大肠癌单链抗体基因的克隆与表达[J];癌症;2002年07期
7 付明哲;王联结;刘选治;;α-螺旋中2,3位氨基酸残基对螺旋结构稳定性的影响[J];安徽农业大学学报;2011年06期
8 赵宝华,张莉;基因工程抗体的种类与应用[J];保定师专学报;2001年02期
9 何红霞,貌盼勇,侯俊,朱雷,洪世雯,王琰;人源单克隆抗人免疫缺陷病毒1型抗体Fab段基因的获得[J];病毒学报;2000年04期
10 杨巍,包永明,段延龙,安利佳;日本蝮蛇蛇毒碱性磷脂酶A_2同源物的分离及鉴定[J];动物学报;2003年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 庄绪静;曹雅忠;李克斌;尹姣;;同源建模和分子对接方法的应用与发展[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
2 李新民;党琦;;天佛参口服液(TFS)诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡及机理探讨[A];2011年中华名中医论坛暨发挥中西医优势防治肿瘤高峰论坛论文集[C];2011年
3 于国英;朱莉;韩志武;;鲐鱼消化道中蛋白酶提取条件的研究[A];2006年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2006年
4 于国英;朱莉;韩志武;;鲐鱼消化道中蛋白酶提取条件的研究[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年
5 李兆隆;郭红玲;常彩琴;涂政;肖卫民;王明鑫;王俭;;鼠抗人转铁蛋白单链抗体基因的表达——人转铁蛋白基因工程抗体的研制(5)[A];中国法医学最新科研与实践(一)——全国第六次法医学术交流会论文精选[C];2000年
6 张国文;陈秀霞;;牛蒡苷与人血清白蛋白的相互作用[A];2009年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会论文集[C];2009年
7 郑志明;金社胜;肖希龙;候晓林;;抗诺氟沙星噬菌体单链抗体库的构建与筛选[A];中国畜牧兽医学会食品卫生学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2010年
8 ;中医眼科学[A];中医学与中药学学科发展报告(2006)[C];2006年
9 张天;李祥龙;周荣艳;李兰会;任玉红;赵驻军;;不同物种Oct-1基因编码区生物信息学分析[A];中国畜牧兽医学会养羊学分会2012年全国养羊生产与学术研讨会议论文集[C];2012年
10 李勇;陈星;赵新荣;胡白和;郝玲;李竹;;同型半胱氨酸致细胞凋亡与畸胎发生的关系[A];达能营养中心青年科学工作者论坛优秀论文集1999年第5期[C];1999年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王冰;降解丝素放线菌的分离鉴定、发酵条件优化及其降解机制研究[D];山东农业大学;2009年
2 程敬丽;源自内生真菌的倍半萜类新颖高效抑菌化合物的衍生合成与生物活性研究[D];浙江大学;2010年
3 包梅荣;油茶种子成熟调控蛋白基因的分离克隆及功能研究[D];中南林业科技大学;2010年
4 陈欣;蛋白质在不同界面的识别、吸附及稳定性研究[D];浙江大学;2009年
5 顾全;基于集成智能的膜蛋白受体结构与功能研究[D];东华大学;2010年
6 高杨;人源Survivin N-端剪切体的体外生物学和谱学研究[D];吉林大学;2011年
7 王硕;两种多肽类药物结构的谱学研究[D];吉林大学;2011年
8 张胜利;蛋白质与RNA中的若干问题研究[D];大连理工大学;2011年
9 徐旻;氧氟沙星酰腙配合物的结构、抗氧化活性及与生物大分子的相互作用[D];兰州大学;2011年
10 王晓黎;水杨酸对黄瓜幼苗碳代谢的调节机制[D];内蒙古农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 闫晓敏;鱼源Fab噬菌体抗体库的筛选、鉴定及抗SAs抗体的可溶性表达[D];华中农业大学;2010年
2 张艳萍;蛋白质序列的数学描述及其应用[D];浙江理工大学;2010年
3 吕文兵;杜氏盐藻异养转化藻株的鉴定及初步功能分析[D];郑州大学;2010年
4 张伟;分子光谱法研究蛋白质与小分子的相互作用及其分析方法研究[D];郑州大学;2010年
5 史舵;基于主成分分析方法的蛋白质亚细胞定位[D];大连理工大学;2010年
6 兰任;基于并行混合粒子群算法的蛋白质结构预测[D];大连理工大学;2010年
7 李昂;中、日白姑鱼的形态学和遗传学研究[D];中国海洋大学;2010年
8 刘胜;高温菜籽粕蛋白质的提取及其酶法改性[D];南京财经大学;2010年
9 李志勇;离子液体双水相对某些生物分子的萃取分离性能研究[D];河南师范大学;2010年
10 赵海宁;大黄多糖的分离纯化及结构研究[D];华东理工大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈炯,陈剑平;Potyvirus属成员基因组全序列的简并引物PCR和RACE扩增方法[J];病毒学报;2002年04期
2 赵荣乐,郑光宇;西瓜花叶病毒-2新疆株的纯化[J];北京师范大学学报(自然科学版);2003年05期
3 李凤梅,崔崇士,张耀伟;西瓜花叶病毒的研究进展[J];东北农业大学学报;2002年04期
4 万莉,刘俊君,彭学贤,黄学森;西瓜花叶病毒2号外壳蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达[J];果树科学;1996年01期
5 邓少丽,罗阳;荧光定量PCR技术及其在临床上的应用[J];国外医学(临床生物化学与检验学分册);2002年05期
6 王小红;荧光定量PCR技术研究进展[J];国外医学(分子生物学分册);2001年01期
7 黄庆华;田阳县1999年春西瓜暴发病毒病[J];广西植保;1999年03期
8 王锡锋,周广和;大麦黄矮病毒介体麦二叉蚜和麦长管蚜体内传毒相关蛋白的确定[J];科学通报;2003年15期
9 李大伟,牛胜鸟,韩成贵,刘庆元;西瓜花叶病毒2号山西分离物外壳蛋白基因核苷酸序列分析[J];河南农业大学学报;2000年04期
10 王颖,余道坚,康林,章桂明,金显忠,杨伟东,黄佩卿,吴琼,陈枝楠,储成才,程颖慧;应用PCR技术检测饲料中的转基因成分[J];农业生物技术学报;2002年02期
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 朱俊华;马铃薯Y病毒衣壳蛋白基因片段长度和结构对RNA介导抗病性的影响[D];山东农业大学;2003年
2 廖晓兰;几种植物病原原核生物实时荧光PCR检测方法的研究[D];湖南农业大学;2003年
3 王道荣;转移相关基因CD44和胃癌关系的研究[D];南京医科大学;2003年
4 余瑛;人酸性成纤维细胞生长因子在大肠杆菌和酵母中的表达、纯化及其特性分析[D];重庆大学;2003年
5 韦传宝;一个侵染浙贝母的马铃薯Y病毒属新成员——浙贝母花叶病毒的鉴定[D];浙江大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 龚杰万;mae和misgurin两种基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达[D];暨南大学;2002年
2 郑育声;重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽的构建及其在毕赤酵母中的表达[D];暨南大学;2002年
3 于宗振;A型肉毒毒素Hc段基因在大肠杆菌及毕赤酵母中的表达[D];中国农业大学;2003年
4 李璟;区别伪狂犬病病毒株和疫苗株的荧光实时定量PCR方法的建立[D];四川农业大学;2004年
5 陈艳;淀粉液化芽孢杆菌中性植酸酶基因在大肠杆菌和毕赤酵母中的高效表达[D];浙江大学;2004年
6 尹双辉;猪瘟病毒主要抗原蛋白在毕赤酵母和大肠杆菌中的表达[D];甘肃农业大学;2004年
7 董流昕;转基因抗草甘膦大豆参比分子的构建[D];北京林业大学;2005年
8 张丽娜;小麦抗白粉病相关基因的克隆研究[D];西北师范大学;2005年
9 邓念华;Real-time PCR检测HSV-2的方法学建立及初步应用[D];重庆医科大学;2005年
10 刘金香;应用实时定量PCR的方法检测BCR-ABL mRNA水平的研究[D];吉林大学;2005年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 马琼;吴云锋;杨艳;王秀敏;郝兴安;;烟草蚀纹病毒对玉米矮花叶病防治效果的研究[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2007年11期
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 马琼;用烟草蚀纹病毒防治玉米矮花叶病的研究[D];西北农林科技大学;2007年
2 纪玲玲;烟草脉带花叶病毒CP基因的原核表达及免疫金标试纸条的研制[D];西北农林科技大学;2008年
3 睢韡;湖北省烟草病毒病毒原种类的鉴定[D];华中农业大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张智清,姚立红,侯云德;含P_RP_L启动子的原核高效表达载体的组建及其应用[J];病毒学报;1990年02期
2 宋宏彬,毛春生,王学,徐德忠,王海涛;人源抗HBsAg噬菌体抗体的筛选及其重链基因结构分析[J];第四军医大学学报;1998年05期
3 韩凤连,杨文俊,刘深,王琛,杨守纯,曹阳,程云;抗乙肝病毒前S(2)蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步应用[J];解放军医学杂志;1988年05期
4 向军俭;陈彤;邹海燕;林剑;曾桂华;;重组碱性成纤维细胞生长因子生物活性检测方法的研究[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);1993年01期
5 余宙耀,粟宽源,任向荣,曾平鲁,张宜俊,高辉,高磊;工程化人源性抗-HBs Fab抗体的制备、纯化和鉴定[J];上海免疫学杂志;1999年02期
6 毛春生,宋宏彬,李季枝,杜桂鑫,陈薇,王海涛;轻链替换提高抗HBsAg噬菌体抗体的结合力[J];中华肝脏病杂志;1999年01期
7 程云,罗清华,周继文,杨守纯,韩风连,戎广亚,曹阳,季伟;HBV PreS2单链噬菌体抗体基因在噬菌体载体中的克隆及初步表达[J];中华微生物学和免疫学杂志;1995年01期
8 程云,周继文,罗清华,杨守纯,韩风连,戎广亚,张建宗,乔小江,曹阳;HBV Pre S2 3B9单抗轻、重链可变区基因的分离,序列分析及单链可变区抗体基因的构建[J];中华微生物学和免疫学杂志;1995年03期
9 陈竞华,王琰,刘群英,王雅明,徐建军,刘华;人源性噬菌体抗体库的构建及HBsAg人单抗的筛选[J];中华微生物学和免疫学杂志;1995年03期
10 王琰,刘群英,徐建军,王雅明,陈竞华;人抗-HBs Fab段基因的序列分析及表达[J];中华微生物学和免疫学杂志;1995年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 熊盛,任向荣,唐永红,粟宽源,余宙耀,罗勇,王一飞,李久香;人源抗HBsAg单链抗体在巴氏毕赤酵母中的表达[J];生物工程学报;2003年01期
2 沈树泉,周筱梅,黄强,许志元,王爱东,杜子威;抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ39单链抗体的构建及初步表达[J];中华神经外科杂志;1997年05期
3 温伟红,赵晶,于翠娟,许彦鸣,金明,王成济,杨安钢;抗人HBsAg单链抗体基因的构建及其在COS-7细胞中的表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2003年02期
4 任向荣,熊盛,唐永红,粟宽源,陈文吟,郑业华,余宙耀;人源性抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌中的表达及活性测定[J];中国免疫学杂志;2002年12期
5 罗良生,王爱东,黄强;人源化抗CD3单链抗体在大肠杆菌中的表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2002年03期
6 肖代雯;黄宇;沈昕;邢薇;刁智娟;刘静;雷萍;陶娟;沈关心;;抗TfR单链抗体—AP融合蛋白的构建、表达与鉴定[J];医学分子生物学杂志;2006年04期
7 余自强;董宁征;白霞;戴兰;阮长耿;;抗血小板糖蛋白VI单链抗体的制备和功能研究[J];现代免疫学;2006年01期
8 唐勇,甄永苏;抗Ⅳ型胶原酶单链抗体的表达及其对肿瘤细胞侵袭的抑制作用[J];癌症;2001年08期
9 董军,黄强,兰青,周丽英,王爱东;PCR定点诱变改造低效价抗胶质瘤单克隆抗体的初步报告[J];江苏医药;2001年11期
10 王翔,俞炜源;缺失突变法研究尿激酶——单链抗体融合基因在大肠杆菌中的高表达[J];药物生物技术;1999年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王长军;唐家琪;李先富;潘秀珍;操敏;;抗人红细胞血型抗原噬菌体单链抗体的研究[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
2 王洪利;舒建昌;;单链抗体在肝脏疾病中应用的研究进展[A];广东省肝脏病学会2007年年会论文集[C];2007年
3 孙娜娜;王欲晓;周丽君;王刚;;人源性抗大疱性类天疱疮抗原BP180-NC16A单链抗体的构建及表达[A];2009全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2009年
4 张惠中;;细胞内生成的抗整合酶单链抗体阻断HIV-1复制的实验研究[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
5 王欲晓;乔媛媛;周丽君;;人源性抗蓖麻单链抗体的分离纯化和活性鉴定[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
6 汪世华;胡开辉;杨燕凌;邱君志;;基因工程单链抗体研究[A];2005全国第二届核酸疫苗研讨会论文集[C];2005年
7 齐兴军;姬宝印;于洪枢;;从业人员乙型肝炎感染状况调查[A];吉林省预防医学学术座谈会论文集[C];2004年
8 林志伟;汪世华;王宗华;;抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇单链抗体(DON-ScFv)在枯草芽孢杆菌中高效表达与分泌[A];中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集[C];2006年
9 温伟红;薛茜;孟艳玲;杨安钢;;可内化的人源性抗HBsAg单链抗体用于siRNA靶向输送的研究[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年
10 杨燕凌;;酶(蛋白)融合技术研究[A];华东地区农学会学术年会暨福建省科协第七届学术年会农业分会场论文集[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 许晓岚;我区将对乙型肝炎流行病学展开调查[N];内蒙古日报(汉);2008年
2 上海市第六人民医院教授、主任医师 潘钰卿;乙型肝炎需早治[N];上海科技报;2000年
3 上海中医药大学 胡义扬;乙型肝炎如何预防[N];上海中医药报;2004年
4 市传染病医院副主任医师 周红燕;乙型肝炎能否彻底治愈?[N];无锡日报;2005年
5 郭新会 北京佑安医院 主任医师;直面乙型肝炎[N];中国劳动保障报;2009年
6 李赛玲;朱军;乙型肝炎辨治研究[N];中国医药报;2003年
7 本报记者 张雷 实习记者 陈丽莹;乙型肝炎携带病毒≠患病[N];医药经济报;2004年
8 刘士敬 博士;乙型肝炎为何多为慢性的[N];中国医药报;2000年
9 昌吉州人民医院传染病分院副院长 主治医师 巩维进;乙肝不可怕 治疗很重要[N];昌吉日报;2009年
10 孔明云;治疗乙型肝炎经验方七则[N];中国中医药报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 熊盛;重组人源抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌和巴氏毕赤酵母中的表达、纯化与性质鉴定[D];华南理工大学;2002年
2 胡学军;抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20-47)单链抗体基因克隆及其在大肠杆菌和烟草中的表达[D];大连理工大学;2002年
3 田媛;前列腺癌细胞结合单链抗体的筛选、表达纯 化及其功能初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
4 李月红;抗ICAM-1单克隆抗体与单链抗体的制备及其生物学特性研究[D];吉林大学;2005年
5 陈德宇;前列腺素D合成酶在男性生殖中的基础及应用研究[D];南京师范大学;2005年
6 邵长利;抗人红细胞单链抗体融合HIV-1gp41抗原肽双功能分子的制备与鉴定[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
7 万忠海;抗PEA单抗和单链抗体制备及在绿脓感染中的应用[D];吉林大学;2008年
8 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
9 付建芳;溶藻弧菌抗独特型抗体基因工程疫苗的研究[D];第四军医大学;2005年
10 余自强;抗血小板胶原受体糖蛋白VI单克隆抗体的制备和功能研究[D];苏州大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 薛茜;含Arg9的人源性抗HBsAg单链抗体/EGFP融合蛋白的基因构建、表达及内化活性的研究[D];第四军医大学;2006年
2 徐飞虎;抗肺癌单链抗体偶联绿色荧光蛋白基因的构建及表达研究[D];浙江大学;2003年
3 赵蕾;抗鸡传染性支气管炎病毒单链抗体原核表达质粒的构建及其间接ELISA筛选方法的建立[D];上海交通大学;2011年
4 张薇;抗T-2毒素单链抗体的制备及该毒素对细胞毒性影响的初步研究[D];福建农林大学;2010年
5 王溪桥;大容量人源肝癌核糖体展示单链抗体库的构建[D];兰州大学;2010年
6 江淼;抗活化血小板表面受体全套单链抗体噬菌体展示文库的构建和筛选[D];苏州大学;2003年
7 纪秋野;抗蓖麻毒素单链抗体的构建、表达、纯化及功能测定[D];黑龙江八一农垦大学;2010年
8 张庆丽;抗EGFRvⅢ特异性单链抗体的构建及其靶向性研究[D];南华大学;2011年
9 杨福辉;抗人大肠癌单克隆抗体ND-1的基因工程双价单链抗体的构建、表达及活性检测[D];中国医科大学;2004年
10 刘晓雷;抗伏马菌素B_1单链抗体的制备[D];福建农林大学;2010年
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