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《华南理工大学》 1997年
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大蒜细胞SOD诱导调控与重组野生稻TI基因表达的研究

曾庆平  
【摘要】:为了发展我国的抗衰老和抗艾滋病药物生物技术,研究了大蒜SOD的高效诱导与协同调控以及野生稻TI基因的体外重组与异源表达。结果表明,物理应激与化学应激均可提高培养细胞中的SOD活力。其中,冷胁迫与热休克诱导时细胞的SOD活力分别提高67%和30%,变温冷胁迫和间隙热休克诱导细胞的SOD活力则分别是对照的1.72倍和1.71倍。经水杨酸诱导的细胞,其SOD活力比对照提高84%,水杨酸与冷胁迫以及热休克互作诱导的SOD活力为对照的2.08倍和3.65倍。这项成果为SOD的规模化发酵生产奠定了基础,并为培养和诱导条件的进一步优化做好了准备。研究发现,物理或化学应激首先激发胞外H_2O_2的瞬时释放,然后再诱导胞外POD活力的持续升高。在氧化应激初期,胞内外POD活力呈现“外升内降”的动态变化。自由基引发剂与自由基清除剂互为拮抗,二者从正负两个方面影响调节着胞外POD活力。甲基紫精诱导的胞外POD活力高于对照,而硫脲诱导的胞外POD活力则低于对照。水杨酸能抑制CAT活力而使H_2O_2水平升高,半胱氨酸则能诱导CAT活力并使H_2O_2水平降低。GSSG和NADP可能具有提高H_2O_2水平的作用,而GSH和NADPH可能具有降低H_2O_2水平的作用。胞外H_2O_2水平可能受POD控制,而胞内H_2O_2水平可能由CAT调节。因此,H_2O_2可能是植物细胞氧化应激信号传导分子。 野生稻TI基因的序列分析表明,它不仅与栽培稻TI高度同源(氨基酸水平的同源性高达74%),而且与所比较的其它植物TI和某些种子贮藏蛋白(特别是一些具有重要生理功能的植物蛋白质)部分同源,并且与动物及人TI的活性位点周围的氨基酸残基的种类相似。同时,根据种子贮藏蛋白超基因家族提出了种子贮藏蛋白系统分类法。另一方面,通过对克隆的野生稻TI基因的体外重组和遗传转化,已将其成功地转移到E.coli菌株中,并经IPTG诱导和SDS-PAGE检测观察到外源TI基因表达的融合蛋白。经细胞裂解粗提取,发现外源基因表达产物对胰蛋白酶具有抑制活性。这项成果将有助于今后深入进行蛋白质结构与功能的研究,并为TI基因的蛋白质工程改良与基因工程生产和育种打下基础。
【学位授予单位】:华南理工大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:1997
【分类号】:Q943.2

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘虹,顾红雅,陈新,潘乃穟,陈章良;水稻中一种抗真菌蛋白的分离与特性分析[J];高技术通讯;1994年02期
2 罗明典;;转基因植物研究新进展[J];高技术报导;1994年03期
3 朱祯,李向辉,孙勇如,孙宝林,李玉英,侯云德;转基因水稻植株再生及外源人α-干扰素cDNA的表达[J];中国科学(B辑 化学 生命科学 地学);1992年02期
4 鲍一明,储瑞银,韩晋华,张会,潘乃禾遂,顾孝诚,陈章良;天花粉蛋白基因的克隆、序列测定及在大肠杆菌和烟草中的表达[J];中国科学(B辑 化学 生命科学 地学);1992年09期
5 王宇光,郭建春,郑学勤;西红柿CU/ZnSOD基因在大肠杆菌中高效表达的研究[J];热带作物学报;1995年S1期
6 郑硕;;植物毒蛋白[J];生物化学与生物物理进展;1987年04期
7 陈雨亭,郑荣梁;SOD脂质体及临床应用[J];生物化学与生物物理进展;1989年01期
8 孙建忠,王克夷;植物凝集素的超级家族[J];生物化学与生物物理进展;1994年02期
9 陈瑗,周玫;氧化应激与cfos和cjun转录和AP-1激活[J];生物化学与生物物理进展;1995年05期
10 曾昭惠,张宗玉;自由基对线粒体DNA的氧化损伤与衰老[J];生物化学与生物物理进展;1995年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 胡建国;邓剑平;束霞霞;汪贻华;蒋立科;;N~+注入在促进栝楼种子萌发生长上的应用[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年11期
2 全先庆,高文;盐生植物活性氧的酶促清除机制[J];安徽农业科学;2003年02期
3 李凤玲;徐培洲;肖祎;张红宇;汪旭东;吴先军;;植物凝集素及其在抗虫基因工程中的应用[J];安徽农业科学;2006年03期
4 张彩莹;;不同来源的超氧化物歧化酶部分理化性质比较研究[J];安徽农业科学;2007年15期
5 徐翠莲;胡文明;;核糖体失活蛋白及其抗病毒转基因研究[J];安徽农业科学;2007年35期
6 江力;陈炜平;;烟草叶片发育过程中抗坏血酸-谷胱甘肽循环清除H_2O_2的研究[J];安徽农业科学;2008年29期
7 董琦;黄磊;梁素明;宋长水;王爱萍;;窄行稀条播对小麦衰老指标的影响[J];安徽农业科学;2009年23期
8 田玉强;朱维树;张勇;李悦;刘峻杉;;青藏高原高寒草甸光合特征研究简述[J];安徽农业科学;2009年25期
9 袁燕;戴晓畅;王德斌;刘开庆;陈子牛;樊传章;;蒜头果蛋白的急性毒性试验[J];安徽农业科学;2009年28期
10 王飞;丁玉;陈明达;鞠明里;尹瑞卿;;天花粉蛋白的纯化技术进展及其药理概况[J];安徽农业科学;2010年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙艳;杨淑英;冯伟;韦小云;;H_2O_2诱导黄瓜幼苗抗高温胁迫能力的研究[A];中国园艺学会第六届青年学术讨论会论文集[C];2004年
2 程华;李琳玲;常杰;许锋;王燕;程水源;;植物抗氧化酶的研究进展[A];2008园艺学进展(第八辑)——中国园艺学会第八届青年学术讨论会暨现代园艺论坛论文集[C];2008年
3 张桦;王希东;侯新东;吴阳升;张强;石庆华;喻梅辉;;红豆草胰蛋白酶抑制剂性质的研究与一级结构的测定[A];中国生物化学与分子生物学会农业生物化学与分子生物学分会第六次学术交流会论文集[C];2004年
4 王雪;王省芬;马峙英;张桂寅;李喜焕;;黄萎病菌胁迫条件下棉花叶片的蛋白质组分析[A];中国棉花学会2006年年会暨第七次代表大会论文汇编[C];2006年
5 梅宁;王琦;梅汝鸿;;益微超氧化物岐化酶(SOD)研发历程[A];第六届全国SOD学术研讨会论文集[C];2009年
6 黄麦平;周忠会;隋建国;;“富硒SOD大枣”新产品的研制[A];第六届全国SOD学术研讨会论文集[C];2009年
7 钟杨生;徐秋云;林健荣;王叶元;范兰芬;;高温干燥对家蚕胚胎发育影响的蛋白质表达谱分析[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(2)[C];2009年
8 刘衬丽;査宏贤;王东;李兵;管京敏;俞燕芳;许雅香;沈卫德;;家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因Serpin-6的原核表达[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(2)[C];2009年
9 ;Effect of Abscisic Acid on Cold Resistance of Centipedgrass[A];中国草学会草坪专业委员会第六届全国会员代表大会及第九次学术研讨会论文汇编[C];2004年
10 王晴川;刘广芬;;生物毒素研究概况[A];第一届中国毒理学学术会议论文集[C];1993年
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1 种培芳;荒漠植物红砂、白刺和沙拐枣抗旱指标及抗旱性综合评价研究[D];甘肃农业大学;2010年
2 郑小坚;家蚕类胰岛素基因BBX-B8的功能研究[D];苏州大学;2010年
3 李荣春;新型季铵化壳聚糖衍生物的制备及其抑菌和抗氧化活性研究[D];新疆农业大学;2010年
4 李静;抗盐菌根菌Paxillus与吸水剂提高树木耐盐机制研究[D];北京林业大学;2011年
5 姜天甲;主要食用菌采后品质劣变机理及调控技术研究[D];浙江大学;2010年
6 崔金霞;一氧化氮和MAPK在油菜素内酯诱导黄瓜抗氧化防御中的作用[D];浙江大学;2010年
7 陆燕元;干旱胁迫及复水过程中转Cu/Zn SOD和APX基因甘薯生理生化响应机制研究[D];西北农林科技大学;2010年
8 黄志;丛枝菌根真菌对甜瓜抗旱性的生理效应及分子机制的研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 赵静;异色瓢虫低温胁迫耐受性及其越冬策略的研究[D];山东农业大学;2011年
10 张丽青;嗜热毛壳菌超氧化物歧化酶基因的克隆、表达及转基因烟草耐盐性研究[D];山东农业大学;2011年
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1 葛静微;猪血中超氧化物歧化酶(SOD)和血红素的提取及SOD的应用研究[D];华中农业大学;2010年
2 林少航;外源甲基紫精对盐胁迫下黄瓜叶片抗氧化酶与DNA甲基化的影响[D];山东农业大学;2010年
3 孙彦丽;类囊体膜磷脂酰甘油不饱和度对番茄耐盐性的影响[D];山东农业大学;2010年
4 黄春旭;应激诱导肉仔鸡氧化损伤的机制研究[D];山东农业大学;2010年
5 赵云霞;马铃薯L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶基因在番茄中的功能分析[D];山东农业大学;2010年
6 方艳;环境胁迫对葡萄愈伤组织中抗氧化酶及白藜芦醇含量的影响[D];甘肃农业大学;2010年
7 马绍英;LED不同光对葡萄离体试管苗生理生化特性效应的研究[D];甘肃农业大学;2010年
8 许志恒;紫菜中抗紫外线活性物质的提取及其性质的研究[D];中国海洋大学;2010年
9 黄业伟;毛竹对盐胁迫的生理响应及耐盐相关基因的表达分析[D];浙江农林大学;2010年
10 陈湘瑜;花生组织特异表达抗黄曲霉相关基因的载体构建[D];福建农林大学;2010年
【二级参考文献】
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1 张智清,姚立红,侯云德;含P_RP_L启动子的原核高效表达载体的组建及其应用[J];病毒学报;1990年02期
2 杨同成;李田土;胡馀男;;赤小豆胰蛋白酶抑制剂对人体精子体外抑制作用及其作用机理的初步探讨[J];福建师范大学学报(自然科学版);1989年03期
3 钱瑞卿;顾梓伟;张秀兰;朱仕钦;张文勤;傅瑶红;翁秋璇;吴元伟;刘永福;徐珊珍;金善炜;田庚元;汪猷;;天花粉蛋白的化学 Ⅱ.天花粉蛋白N-端部分氨基酸顺序的测定[J];化学学报;1981年Z1期
4 顾梓伟;钱瑞卿;金善炜;钱薇薇;徐珊珍;张丽青;张秀兰;姚月珍;刘永福;朱仕钦;曹伯巽;汪绍福;汪强华;张伟君;刘寅曾;傅瑶红;汪猷;;天花粉蛋白化学 Ⅳ.天花粉蛋白的基本一级结构[J];化学学报;1984年09期
5 霍克克,虞兰兰,陈新杰,李育阳;酵母高稳定载体的构建及人-αA干扰素在酵母中的高表达和分泌[J];中国科学(B辑 化学 生命科学 地学);1992年09期
6 鲍一明,储瑞银,韩晋华,张会,潘乃禾遂,顾孝诚,陈章良;天花粉蛋白基因的克隆、序列测定及在大肠杆菌和烟草中的表达[J];中国科学(B辑 化学 生命科学 地学);1992年09期
7 孙宝林,李向辉,孙勇如,赵世民,陈炬;籼稻原生质体高频分裂及植株再生[J];科学通报;1989年15期
8 孙大业,唐军,李红兵;细胞外钙调素的研究及其意义[J];科学通报;1995年13期
9 张鑫生;;衰老理论中的自由基学说[J];青海医药杂志;1991年01期
10 周光炎,郑泽镜,陆德源;天花粉蛋白治疗艾滋病——安全性、疗效与机理[J];上海免疫学杂志;1992年02期
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1 谭廷华,何西利,姚有良,赵桂兰;鸡胚活性蛋白研究[J];天然产物研究与开发;1995年02期
2 铁翠娟,张怀,张博润,王少华;修饰SOD及未修饰SOD的稳定性比较研究[J];微生物学通报;1999年02期
3 史宝忠;人体内的抗氧化体系浅析[J];晋东南师范专科学校学报;2002年02期
4 顾洪雁,袁均林,王建和,何毅;温度对猪血提取超氧化物歧化酶的影响[J];华中师范大学学报(自然科学版);2002年03期
5 许爱华,陈华圣,王玲,王茜;银杏外种皮多糖对不同状态小鼠血清SOD和MDA形成的影响[J];中国中药杂志;1998年12期
6 刘冰,陆耀飞;超氧化物歧化酶对果蝇寿命的影响[J];镇江医学院学报;2000年02期
7 欧芹,王桂杰,杨晶,王玉民,李世莉,白书阁,白晶;小鼠组织胶原随龄变化与SOD活性和LPO含量关系的研究[J];中国老年学杂志;1998年06期
8 成侃,王懿,占世坤,胡秉诚,王如瑶,成柏华;人体半导体激光外照射的疗效及其作用机理研究——血浆肽类神经递质及其与免疫,血粘度,抗氧化等活性的相关观察[J];激光生物学报;2000年02期
9 李耀维,冯文新,张素梅;He-Ne激光对金针菇SOD高产株的诱变效应[J];激光生物学报;2002年04期
10 李扬,丁喜顺,魏建民,周平,扎拉嘎胡;沙棘超氧化物岐化酶(SOD)的提取与化学修饰[J];内蒙古农业大学学报(自然科学版);2002年03期
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1 马丽俐;Paul Wang;;栀子对紫外光诱导的豚鼠光老化的模型血清和皮肤超氧化物歧化酶(SOD)的影响[A];中医美容——2010年中华中医药学会中医美容分会学术年会论文集[C];2010年
2 李彬先;张惠营;;肺心病血液流变学与超氧化物歧化酶(SOD)及血气、酸碱相关性研究[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
3 徐辉;冷静;沈彤;朱启星;;三氯乙烯致敏豚鼠肝脏MDA含量和SOD活力的测定[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
4 熊训斌;;维持剂量糖皮质激素联合锦鸡儿、超氧化物歧化酶(SOD)成功治疗肾病综合征一例[A];第28次全国中医儿科学术大会暨2011年名老中医治疗(儿科)疑难病临床经验高级专修班论文汇编[C];2011年
5 何富文;张西洲;崔建华;陈涛;王咏梅;;进驻不同海拔高度健康青年尿SOD和血乳酸的变化[A];迎接新世纪——2000年全国微循环与血液流变学学术研讨会论文汇编[C];2000年
6 黄宏兴;;中药骨康方对去势大鼠血清中SOD和MDA调控的研究[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
7 黄俊杰;赵善民;黄彦峰;农文田;邓彩霞;颜小芳;吴贤俊;陈永兰;;川芎对慢性衰老小鼠大脑皮层SOD和MDA的影响[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年
8 辛广;张兰杰;陈华;张博;;南果梨不同温度贮藏后SOD活性研究[A];中国化学会第十三届有机分析与生物分析学术会议论文集[C];2005年
9 田燚;常亚青;马增艳;;刺参超氧化物歧化酶基因SOD的克隆及序列分析[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
10 程发峰;郭少英;钟相根;鲁艺;王庆国;;清开灵注射液治疗局灶脑缺血模型的时间窗研究及对血清SOD的影响[A];第八届博士生学术年会论文摘要集[C];2010年
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1 王珩 陈哲 本报记者 王富亮;人类健康的保护神——植物SOD[N];大众科技报;2009年
2 记者 王富亮 通讯员 陈哲;SOD学术研讨会开幕[N];大众科技报;2009年
3 王珩;人类健康的保护神——植物SOD[N];大众科技报;2009年
4 本报记者 王富亮 通讯员 陈哲;助推科普进社区,让更多的人了解植物SOD[N];大众科技报;2009年
5 兆军 原驰 遥远;我国拥有大批量生产人源SOD能力[N];吉林日报;2010年
6 记者 张兆军;我国拥有大批量生产人源SOD能力[N];科技日报;2010年
7 魏崇赞 记者 张雁飞;江苏省首家SOD果蔬生产企业成立[N];中国食品质量报;2010年
8 记者 张文智 通讯员 张军剑;庆城“SOD”奶蜜苹果论个卖[N];甘肃经济日报;2010年
9 记者任福安;宁夏SOD富硒枸杞鲜果新鲜出炉[N];中国食品报;2009年
10 记者 高菲;仁存渡林场SOD苹果论“个”卖[N];宁夏日报;2010年
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1 林玉玲;龙眼体胚发生过程中SOD基因家族的克隆及表达调控研究[D];福建农林大学;2011年
2 于双江;具有SOD和GPx活力的超分子双功能酶模型的构建[D];吉林大学;2010年
3 李红艳;人参蛋白活性研究[D];长春中医药大学;2010年
4 赵晴;慢性缺血致血管性痴呆大鼠线粒体氧化损伤机制及依达拉奉保护作用的研究[D];吉林大学;2007年
5 边文会;子宫内膜异位症乏氧紧张状态及补肾温阳化瘀法对其影响[D];河北医科大学;2009年
6 吴波;吴茱萸种质资源遗传多样性及抗旱生理研究[D];广州中医药大学;2013年
7 齐晓龙;共轭亚油酸对产蛋鸡抗氧化机能的影响[D];中国农业科学院;2013年
8 杜鹏;晕船易感大鼠脑干差异表达蛋白质的筛选和鉴定[D];第二军医大学;2005年
9 阿萨(Md.Asaduzzaman Khan);白藜芦醇通过调节抗氧化酶活性而呈现抗肿瘤效应[D];中南大学;2013年
10 孙晓彩;p38MAPK参与肢体缺血预处理诱导的大鼠脑缺血耐受及其机制初探[D];河北医科大学;2006年
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1 刘茜;小建中汤对脾胃虚寒大鼠MDA、SOD及环核苷酸水平的影响[D];陕西中医学院;2011年
2 侯婧;煤工尘肺大鼠学习记忆能力改变及脑组织中MDA、SOD的水平变化[D];山西医科大学;2011年
3 赵怡;枯草芽孢杆菌ATCC 9372 Mn-SOD的克隆、表达与特性研究[D];暨南大学;2011年
4 田君;大鼠二次脑损伤合并海水浸泡后脑组织SOD、MDA变化的实验研究[D];福建医科大学;2010年
5 黄开建;原发性高血压患者血清MDA、SOD、ox-LDL水平及依达拉奉对其影响的临床研究[D];福建医科大学;2010年
6 李江虹;益气活血方对NSAIDs胃黏膜损伤患者血清SOD、MDA的影响[D];南京中医药大学;2010年
7 刘志成;松材线虫sod基因的克隆及其亲缘关系的探讨[D];河北师范大学;2011年
8 钟敏;SOD检测在中枢神经系统白血病诊断中的意义及青蒿琥酯干扰作用机制探讨[D];南方医科大学;2009年
9 郭宇飞;远志对D-半乳糖致衰大鼠学习记忆、海马LTP及脑组织SOD、MDA的影响[D];山西医科大学;2010年
10 宋联进;降粘抗栓片Ⅲ号对脑梗死患者神经功能缺损的疗效及对血清MDA、SOD、Hcy的影响[D];第四军医大学;2010年
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