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《华南理工大学》 2003年
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可控酶解从海洋鱼蛋白中制备生物活性肽的研究

林伟锋  
【摘要】:本文主要以沙丁鱼蛋白为原料,利用可控酶解技术、超滤和离子交换法分离手段,研究制备生物活性肽的方法,并进行抗疲劳活性研究。 在可控酶解工艺优化的研究中,主要研究了pH值、水解时间、蛋白酶的种类和用量、底物的初始浓度和种类、水解温度以及搅拌方式对水解效果和酶解物的分子量分布的影响,实验结果如下: 基于水解体系的pH值变化对其酶解物的分子量分布和肽提取率的高低影响很小,确定水解过程中不必加碱保持体系pH值的恒定。水解过程可分为三个阶段,分别是快速上升阶段、缓慢增长阶段和平衡阶段,可作用底物浓度下降是导致水解过程产生这三个阶段的主要原因;随着水解时间的延长,酶解物的平均肽链长度下降,表明了大分子量肽组分含量降低,低分子量肽含量升高。四种蛋白酶中以胰蛋白酶的水解效果最好,其次是碱性蛋白酶和复合蛋白酶,中性蛋白酶的水解效果最差;四种蛋白酶使用量均以2000U/g~3000U/g的范围比较合适。底物初始浓度过高,将降低水解反应速度,胰蛋白酶水解沙丁鱼蛋白的底物初始浓度以7.5%比较合适;沙丁鱼蛋白的水解效果优于红三鱼蛋白。胰蛋白酶和碱性蛋白酶的最佳水解温度应是55℃左右,而复合蛋白酶、中性蛋白酶的最佳水解温度则为50℃左右,而鱼自溶酶最佳水解温度则为45℃。连续搅拌的水解效果更佳。起始底物浓度、酶的种类和底物的种类等因素明显影响氮提取率和肽提取率与水解度之间关系。 通过数学推导及实验分析,得出可控酶解动力学模型及其相关参数,分别为:DH=9.8041n[1+(1.701E_0/S_0-0.00367)t]和R=(16.678E_0-0.036S_0)exp[-0.102(DH)],动力学常数k_2=16.678min~(-1)和k_d=1.7015min~(-1),最低临界初始蛋白酶浓度E_0=c_0S_0,最大临界底物初始浓度S_0=E_0/c_0,c_0=2.159×10~(-3)。 超滤分离方法的研究表明,酶解液的PCL和平均分子量减小,将提高平均透过速率、膜效能和组分的透过率,降低组分的截留率;证实了分离膜对水解液中不同分子量组分具有分离的作用,通过二级超滤处理,酶解液可被具有不同截留分子量的分离膜分离成三部分。 离子交换法的研究表明,较低离子强度的初始缓冲液、合适的上样量及恰当离子强度的洗脱剂有利于提高交换容量和分离效果;两浓度两步洗脱法有利于提高分离效果,减少洗脱剂的用量;在中性条件下,中性蛋白酶酶解液中的中性肽和带正电荷的肽的含量最高,而胰蛋白酶则最低。实验结果表明,离子交换法能有效地实现酶解液中肽组分的分离。 动物实验证明,活性肽能显著延长小白鼠的游泳时间,活性肽的剂量与小白
【学位授予单位】:华南理工大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:TQ464.7

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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10 唐道邦;张鹭;徐玉娟;张友胜;吴继军;;雄蚕蛾蛋白酶解前后肌肽含量的对比研究[J];食品科技;2008年11期
中国博士学位论文全文数据库 前6条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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10 蒋少军;李志忠;张新璞;胥顺吉;;大麻纤维的生物酶脱胶技术[A];铜牛杯第九届功能性纺织品及纳米技术研讨会论文集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【同被引文献】
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5 梁拥军;孙向军;杨璞;张欣;;罗非鱼鱼皮胶原蛋白多肽的制备及其理化性质研究[J];安徽农业科学;2009年04期
6 许晓琴;徐丽;付翠萍;霍乃蕊;马俪珍;;利用有限酶解技术提高鲶鱼食用肉粉溶解度的研究[J];安徽农业科学;2011年16期
7 余礼碧,施燕,王占利,余永芳;脑蛋白粉的制备及其酶解方法的研究[J];氨基酸和生物资源;2000年03期
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中国重要会议论文全文数据库 前1条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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9 周思静;裴颖;高美须;李淑荣;王志东;范蓓;;高活性β-葡萄糖苷酶丹贝发酵工艺研究[J];核农学报;2012年08期
10 裴小平;唐道邦;肖更生;蒋爱民;;抗氧化肽制备的应用现状及趋势[J];食品工业科技;2009年02期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 彭小红;赵谋明;吴肖;吴进卫;;金华火腿酶解过程中产物呈味特性的变化趋势研究[A];“科技创新与食品产业可持续发展”学术研讨会暨2008年广东省食品学会年会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前9条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【二级参考文献】
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7 乐国伟,施用晖,谢君,王之盛,杨凤;灌注寡肽与游离氨基酸对来航公鸡氨基酸吸收及循环中肽的影响[J];动物营养学报;1997年04期
8 林藩平;生物活性肽在食品及饲料业中的开发利用[J];福建畜牧兽医;2000年02期
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【相似文献】
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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4 赵思明;姚松年;刘友明;熊善柏;;稻米淀粉及其级分的结晶特性研究[A];2002农业工程青年科技论坛论文集[C];2002年
5 陈建华;黄少烈;朱宝璋;游鹏程;;分子蒸馏技术在天然产物分离纯化上的应用进展[A];全国中药标准研究学术研讨会论文集[C];2005年
6 王念跃;赵伟;端木浩;李勇;黄宇峰;;人肝癌组织特异性γ-谷氨酰转移酶分离纯化[A];第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编[C];2006年
7 王彩梅;蔡少丽;吴义真;林俊涵;章文贤;施巧琴;林琳;;Cryptococcus laurentii B40胞外脂肪酶的分离纯化及特性分析[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年
8 刘卫平;;马铃薯病毒PVX的分离与纯化的研究[A];中国作物学会马铃薯专业委员会2000年年会论文集[C];2000年
9 姚育翠;李向荣;;大孔吸附树脂分离纯化玫瑰花中原花青素[A];第九届全国中药和天然药物学术研讨会大会报告及论文集[C];2007年
10 李君珂;姜子涛;李荣;;树脂吸附法分离纯化首乌叶总黄酮[A];管产学研助推食品安全重庆高峰论坛——2011年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨全国食品科学与工程博士生学术论坛论文集[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 王宏磊;中药苷类有效成分提取 辅料、工艺各不同[N];中国医药报;2006年
2 陈光曙 丁华 王量迪 陈晓常;研究推广《鱼蛋白有机液肥》[N];宁波日报;2011年
3 李军;兰州粗鱼蛋白制备鱼蛋白复合肽技术问世[N];中国特产报;2004年
4 何国庆 张灏;生物活性肽的开发与利用[N];中国食品报;2009年
5 向杰;我国鱼蛋白肽生产实现无害化[N];科技日报;2006年
6 山东农业大学动物科技学院 高明航夏海涛 高林 张英学;生物活性肽在畜牧业中的应用[N];中国畜牧兽医报;2008年
7 宋柯;“酶法多肽学说”奏响肽健康主旋律[N];中国医药报;2006年
8 马浩剑李昕;王柯:五年做到国内第一[N];常州日报;2007年
9 本报记者 白毅;多种提取手段推动中药研发[N];中国医药报;2005年
10 郑蕾;牛羊鲜骨“肽”值钱 下脚料里能创新[N];中国县域经济报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 林伟锋;可控酶解从海洋鱼蛋白中制备生物活性肽的研究[D];华南理工大学;2003年
2 于娜;卵黄多肽的分离纯化及降血脂活性研究[D];沈阳农业大学;2012年
3 陆志科;竹叶生物活性成分提取分离及其抗菌活性研究[D];中南林学院;2004年
4 饶国华;利用低次烟叶蛋白制备生物活性肽及烟用香精的研究[D];华南理工大学;2006年
5 邓尚贵;采用复合酶控制水解青鳞鱼蛋白的研究[D];华南理工大学;2004年
6 徐金瑞;黑大豆种皮花色苷抗动脉粥样硬化及其抗氧化机制研究[D];西北农林科技大学;2006年
7 韩俊友;牛蛙皮肤抗菌肽分离纯化、基因克隆表达及生物学特性的研究[D];吉林大学;2007年
8 马春玲;海洋酵母普鲁兰类酵母碱性蛋白酶发酵生产、特性研究及基因克隆[D];中国海洋大学;2007年
9 陈杰;高密度培养盘基网柄菌及重组可溶性人Fas配体表达的研究[D];浙江大学;2008年
10 华颖;纤维蛋白溶解酶的发酵制备、分离纯化及酶学性质研究[D];江南大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 姜军;山药多糖的分离纯化及其化学结构的初步研究[D];扬州大学;2007年
2 韦红;荷叶黄酮的分离及功能初步研究[D];扬州大学;2006年
3 王新保;乳铁蛋白抗菌肽的制备及分离纯化[D];江南大学;2008年
4 宋庆明;蚕豆肽制备及其生物活性的研究[D];天津科技大学;2009年
5 张巍;笃斯越桔叶片多糖的提取、纯化及其体外抗肿瘤活性研究[D];吉林大学;2009年
6 逄敏洁;烟草废弃物中茄尼醇等有效成分的提取分离与含量分析[D];西北大学;2008年
7 李瑞燕;党参水溶性多糖的提取工艺研究[D];山西医科大学;2007年
8 袁贤达;蝮蛇酶解活性肽的制备工艺及其化学成分研究[D];长春中医药大学;2010年
9 蔡小丽;狗肠新生物活性肽的分离纯化及结构测定[D];华中科技大学;2005年
10 袁媛;高纯灵芝酸的分离纯化工艺研究[D];合肥工业大学;2007年
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