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《华南理工大学》 1997年
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海藻糖的发酵制备和保护机理的研究

周青峰  
【摘要】:本论文对海藻糖的测定、菌种选育、发酵条件、分离提取、发酵优化控制及保护机理进行了初步的研究。 建立了一种用海藻糖酶分析生物材料中海藻糖含量的方法,最佳分析条件为pH5.6,50℃,20min。 对蒴果绒黑粉类酵母AS.1565菌株进行诱变处理,选育到一株性能较优良的突变株。在摇瓶培养条件下,其细胞干重为17.83mg/ml,海藻糖含量为3.94mg/ml,胞外多糖含量为0.12mg/ml。 最适摇瓶发酵培养基组成为:葡萄糖8.0%、玉米浆0.8%、硫胺素0.04%、有效霉素A0.5μg/ml、KH_2PO_40.2%、MgSO_4·7H_2O0.085%、NH_4SO_40.1%、MnSO_4·7H_2O0.04%、硅油0.01%。最适发酵条件为:30℃、pH6.0、转速180rpm、装液量50ml、种龄30小时、接种量5%。 在摇瓶发酵培养的基础上,进行了5升发酵罐发酵实验。培养48小时后,细胞干重达到29.7mg/ml,海藻糖含量达到6.3mg/ml,比未优化前分别提高66.57%和59.50%。 在对分批发酵过程进行分析的基础上,提出了发酵动力学模型。 dX/dt=μ_mX(1-X/X_m) dP/dt=V_mSX/(K_m+S)-adX/dt -dS/dt=1/Y_(p/s)·dP/dt+1/Y_(x/s)·dX/dt+mX 提取海藻糖的最佳工艺条件是:105℃干燥处理菌体5h后。用50%的乙醇-水溶液常温提取1.5hr。然后通过Amberlite MB-1A离子交换柱层析去除提取液中的杂质离子,用Bio-Gel P-2柱层析除去残留的还原性糖类,浓缩结晶。 当海藻糖/磷脂比例达到1:1时,基本能抑制脂质体的融合。当海藻糖/磷脂比例达到2:1以上时,脂质体的保存率达到90%以上。在足够数量的海藻糖存在下,通过真空干燥保存载药脂质体是可行的。
【学位授予单位】:华南理工大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:1997
【分类号】:TQ929

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