收藏本站
《华南理工大学》 2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

红发夫酵母(Phaffia rhodozyma)的诱变和原生质体融合及发酵优化研究

田小群  
【摘要】:本论文对红发夫酵母(Phaffia rhodozyma)的诱变和筛选,高产虾青素突变株的培养特征,发酵助剂对虾青素合成的促进作用,高产虾青素突变株与啤酒酵母的原生质体融合以及融合株发酵特征进行了研究。 利用亚硝基胍对红发夫酵母进行重复诱变,经过二苯胺、β-紫罗酮的筛选,得到一株高产类胡萝卜素的突变株NT221,YM培养基摇瓶培养虾青素含量达到1,200μg/g,比亲株提高50%。研究发现,突变株NT221对酵母抑制剂2-脱氧葡萄糖、制霉菌素、抗霉素A、放线菌酮、CuSO_4的抵抗能力比亲株强。培养基中添加500mg/L CuSO_4有助于阻止菌种产类胡萝卜素能力的退化。 研究了摇瓶培养条件下温度、pH、装液量、接种量对NT221生物量、虾青素含量及产量的影响。20℃最有利于虾青素的积累和细胞生长。pH4.0最有利于酵母的生长,pH5.0最利于虾青素的积累;低装液量有利于细胞的生长和虾青素的形成;接种量5~10%较适宜细胞生长及虾青素的合成。正交设计L_(16)(4~5)研究结果表明:在装液量、温度、培养时间、pH、接种量五个因子中,装液量是影响细胞生长和虾青素形成的最显著因子。其次是温度。 对于红发夫酵母生长和虾青素的合成最好的碳源为葡萄糖、棉子糖、蔗糖,最好的氮源是蛋白胨、酵母粉和玉米浆;在四种磷酸盐中磷酸氢二钾最益于虾青素的合成;用正交设计优选出最佳的摇瓶培养基是:葡萄糖20g/L,玉米浆5g/L,K_2HPO_4 1g/L,MgSO_4 2g/L,酵母粉3g/L。 对红发夫酵母突变株NT221在5L反应器中的发酵特征研究表明:流加培养比分批培养的生物量和虾青素产量有较大幅度的提高,分别提高46.8%和49.8%;在流加培养中,流加葡萄糖的方式对生物量及虾青素产量产生影响,以pH-stat控制的葡萄糖流加比间歇流加其生物量和虾青素产量分别提高14.5%和2.5%。 一些特殊生长因子和无机盐可作为发酵助剂在一定浓度下提高虾青素含量和产量。肌醇在30mg/L时虾青素含量提高率高达34.1%;L-赖氨酸在100mg/L时虾青素含量提高率达到36.7%;核黄素在7.5mg/L时虾青素的含量比对照提高了35.4%。0.5mg/L氯酸钠可使虾青素含量提高30.6%,0.5mg/L的氯化镉可使虾青素的含量提高31.4%。 原生质体形成率与细胞的生理状态有关。装液量为70-100mL/250mL三角瓶、0-3代酵母、培养时间12h,培养基中添加200~400mg/L的MnCl_2,这些条件可使红发夫酵母原生质体形成率达到80~90%。红发夫酵母原生质体形成率和再生率最佳酶解条件是:pH8.0、0.8mol/LKCl、溶壁酶浓度10mg/mL、酶解时间16h和酶解温度22℃。啤酒酵母原生质体形成率和再生率最适的条件是:菌体培养时间12h、溶壁酶浓度10mg/mL、酶解温度3℃和酶解时间1h;红发夫酵母和啤酒酵
【学位授予单位】:华南理工大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:TQ920.1

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 倪辉;洪清林;肖安风;李利君;蔡慧农;苏文金;;一株法夫酵母虾青素高产菌株的生产性能[J];生物工程学报;2011年07期
2 ;[J];;年期
3 ;[J];;年期
4 ;[J];;年期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 肖明;王江新;胡章立;;莱茵衣藻两个质体末端氧化酶基因的相互作用及其功能[A];中国藻类学会第八次会员代表大会暨第十六次学术讨论会论文摘要集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 田小群;红发夫酵母(Phaffia rhodozyma)的诱变和原生质体融合及发酵优化研究[D];华南理工大学;2003年
2 孟春晓;雨生红球藻中虾青素合成关键酶基因的顺式作用元件研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2005年
3 朱明军;红发夫酵母Phaffia rhodozyma培养生产虾青素的研究[D];华南理工大学;2001年
4 董庆霖;利用雨生红球藻和红发夫酵母代谢过程中的协同效应提高虾青素产量[D];天津大学;2004年
5 蹇华丽;红法夫酵母酶法破壁提取虾青素及其β-环糊精包合的研究[D];华南理工大学;2005年
6 汪文俊;红法夫酵母发酵生产虾青素及其代谢调控研究[D];华中科技大学;2006年
7 金超;转基因法夫酵母高产3S,3'S虾青素的研究[D];天津大学;2011年
8 滕长英;雨生红球藻控制虾青素合成的关键酶基因的转录调控元件[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2003年
9 梁成伟;蓝藻与绿藻类胡萝卜素合成酶基因的比较基因组学及代谢调控研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2007年
10 苗凤萍;雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)虾青素酯和脂肪酸的鉴定及差异表达基因的分析[D];中国科学院研究生院(武汉植物园);2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李婷;雨生红球藻中虾青素的提取及抗氧化活性研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
2 张睿钦;雨生红球藻细胞转化及虾青素的提取[D];中国海洋大学;2012年
3 刘宏超;虾壳生物活性物质提取及综合利用[D];广东海洋大学;2010年
4 韩伟;虾青素高产菌株的推理筛选与发酵条件优化[D];山东农业大学;2010年
5 段楠;高产虾青素的红发夫酵母菌株进化工程研究[D];天津大学;2010年
6 杨瑞;法夫酵母发酵生产虾青素及其包合物的研究[D];海南大学;2011年
7 冯畅;虾青素对AA肉鸡血液理化指标和免疫功能的影响研究[D];湖南农业大学;2010年
8 何磊;产虾青素海洋酵母菌YS-185的鉴定、发酵优化及保藏稳定性的研究[D];上海海洋大学;2011年
9 张森;红法夫酵母生产虾青素的研究[D];北京化工大学;2012年
10 林舒乐;乳酸钠对法夫酵母发酵产虾青素的影响[D];集美大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026