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《华南理工大学》 2002年
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隐甲藻高密度发酵培养和油脂改性研究

王永华  
【摘要】:二十二碳六烯酸(DHA)在婴幼儿大脑和视力发育中有非常重要的生理作用,并可治疗心血管疾病,提高人体免疫力等。隐甲藻细胞油脂富含DHA脂肪酸,基本不含EPA,可作为婴幼儿、孕妇食品DHA的良好来源。本论文研究了不同的培养基组成和培养条件对隐甲藻生长、油脂和DHA积累的影响,确定了较好的碳源、氮源、无机盐浓度、维生素浓度,溶氧、pH等条件,并用分批流加的方式进行培养;初步研究了不同碳源、氮源条件下,脂肪酸合成中的一些酶活性变化;探讨了超临界CO_2萃取隐甲藻油脂的最佳工艺参数;并进一步用酶法改性隐甲藻油脂的酰基组成,探讨了不同的反应条件对辛酸结合率的影响。 在隐甲藻(Crypthecodinium cohnni)细胞培养中,接种后的培养液适宜的细胞数为6×10~5个/ml。在摇瓶培养条件下,最佳的碳氮源组成为:葡萄糖20g/L,酵母膏和KNO_3共2g/L,其中两者比例为1:2(mol/mol);最佳的无机盐浓度为:9g/L NaCl、0.8g/L KH_2PO_4、12mmol/L Mg~(2+);最佳的维生素浓度:10~(-5)g/L V_(812)、10~(-5)g/L V_H。 对于隐甲藻细胞来讲,氮源限制因素和油脂积累关系并不明显,但当氮源不是限制因素时,随着碳氮比的增大,细胞油脂含量提高。丙酮酸、柠檬酸、苹果酸在培养初期加入,有利于隐甲藻细胞的生长,而不利于隐甲藻细胞油脂积累;丙酮酸的加入使DHA含量增大,当柠檬酸的加量为2g/L时,DHA含量最大,而苹果酸的加入使DHA含量下降。在培养60h后加入这三种物质与初期加入相比,丙酮酸有利于DHA的积累;柠檬酸和苹果酸有利于油脂和DHA的积累。在研究中还发现,隐甲藻细胞有时会发生凝聚现象,凝聚成球状的藻细胞生物量较高。 在5L反应器培养中,在培养初期,溶氧水平对藻细胞的生长影响不大,当培养18小时后,应提高搅拌速度和通气量,从而增大溶氧水平,发酵pH保持在6.5,温度为26℃。分批补料培养条件下,最终藻细胞生物量达16g/L,油脂和DHA产量分别为4g/L和1.2g/L。 只有通过对脂肪酸代谢调节酶系的进一步研究认识,人们才能够通过基因工程技术,对菌种进行分子水平的改造,才能从根本上提高藻细胞合成油脂和DHA的能力。用橄榄油和Tween80的培养基中,藻细胞中可能开放乙醛酸循环途径,抑制脂肪酸合酶活性,利用外源油脂在体内链延长和脱饱和酶作用下,合成DHA,
【学位授予单位】:华南理工大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:TS201.3

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【引证文献】
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【同被引文献】
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10 曹春晖;两种赤潮藻对锰的生理生态响应[D];中国海洋大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 肖咏之;中国沿海甲藻孢囊分类、分布和孢囊形成动力学研究[D];暨南大学;2001年
2 辜小莲;大亚湾海域甲藻孢囊生态动力学研究[D];暨南大学;2002年
3 韩笑天;中国近海几种重要赤潮甲藻分类学及其系统发育学研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2004年
4 张莉红;扇贝养殖对浮游植物群落影响的初步研究[D];中国海洋大学;2005年
5 赵玉庭;长江口及邻近海域尿素的来源、分布及其在甲藻赤潮发生中的作用初探[D];中国海洋大学;2013年
6 刘永健;胶州湾浮游植物分子遗传多样性研究[D];中国海洋大学;2004年
7 康伟;广东典型海域表层沉积物中赤潮藻类休眠体的分布及赤潮发生潜势研究[D];暨南大学;2010年
8 丁玲;东海陆架区悬浮颗粒物中浮游植物生物标志物的比例变化及济州岛西南泥质区种群结构重建[D];中国海洋大学;2008年
9 赵俊梅;三种海洋滤食性贝类对两种赤潮甲藻摄食生理的初步研究[D];中国海洋大学;2004年
10 李京;东海赤潮高发区营养盐结构及对浮游植物优势种演替的作用研究[D];中国海洋大学;2008年
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