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《华南理工大学》 2002年
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隐甲藻高密度发酵培养和油脂改性研究

王永华  
【摘要】:二十二碳六烯酸(DHA)在婴幼儿大脑和视力发育中有非常重要的生理作用,并可治疗心血管疾病,提高人体免疫力等。隐甲藻细胞油脂富含DHA脂肪酸,基本不含EPA,可作为婴幼儿、孕妇食品DHA的良好来源。本论文研究了不同的培养基组成和培养条件对隐甲藻生长、油脂和DHA积累的影响,确定了较好的碳源、氮源、无机盐浓度、维生素浓度,溶氧、pH等条件,并用分批流加的方式进行培养;初步研究了不同碳源、氮源条件下,脂肪酸合成中的一些酶活性变化;探讨了超临界CO_2萃取隐甲藻油脂的最佳工艺参数;并进一步用酶法改性隐甲藻油脂的酰基组成,探讨了不同的反应条件对辛酸结合率的影响。 在隐甲藻(Crypthecodinium cohnni)细胞培养中,接种后的培养液适宜的细胞数为6×10~5个/ml。在摇瓶培养条件下,最佳的碳氮源组成为:葡萄糖20g/L,酵母膏和KNO_3共2g/L,其中两者比例为1:2(mol/mol);最佳的无机盐浓度为:9g/L NaCl、0.8g/L KH_2PO_4、12mmol/L Mg~(2+);最佳的维生素浓度:10~(-5)g/L V_(812)、10~(-5)g/L V_H。 对于隐甲藻细胞来讲,氮源限制因素和油脂积累关系并不明显,但当氮源不是限制因素时,随着碳氮比的增大,细胞油脂含量提高。丙酮酸、柠檬酸、苹果酸在培养初期加入,有利于隐甲藻细胞的生长,而不利于隐甲藻细胞油脂积累;丙酮酸的加入使DHA含量增大,当柠檬酸的加量为2g/L时,DHA含量最大,而苹果酸的加入使DHA含量下降。在培养60h后加入这三种物质与初期加入相比,丙酮酸有利于DHA的积累;柠檬酸和苹果酸有利于油脂和DHA的积累。在研究中还发现,隐甲藻细胞有时会发生凝聚现象,凝聚成球状的藻细胞生物量较高。 在5L反应器培养中,在培养初期,溶氧水平对藻细胞的生长影响不大,当培养18小时后,应提高搅拌速度和通气量,从而增大溶氧水平,发酵pH保持在6.5,温度为26℃。分批补料培养条件下,最终藻细胞生物量达16g/L,油脂和DHA产量分别为4g/L和1.2g/L。 只有通过对脂肪酸代谢调节酶系的进一步研究认识,人们才能够通过基因工程技术,对菌种进行分子水平的改造,才能从根本上提高藻细胞合成油脂和DHA的能力。用橄榄油和Tween80的培养基中,藻细胞中可能开放乙醛酸循环途径,抑制脂肪酸合酶活性,利用外源油脂在体内链延长和脱饱和酶作用下,合成DHA,
【学位授予单位】:华南理工大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:TS201.3

【引证文献】
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【参考文献】
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【同被引文献】
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10 张彦青;贾士儒;张五九;;响应面法优化酿酒酵母乙醛脱氢酶和乙醇脱氢酶酶活检测方法[J];中国酿造;2011年07期
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10 关文强;丁香油的超临界CO_2萃取及在果蔬保鲜中的应用研究[D];天津大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张慧;超临界CO_2萃取花椒风味物质的工艺开发研究[D];西北大学;2010年
2 朱莉;超临界CO_2萃取槟榔籽油的研究[D];海南大学;2011年
3 梅志刚;隐甲藻生产DHA的研究[D];华南理工大学;2011年
4 王震宇;不同夹带剂条件下超临界CO_2萃取蜂胶黄酮的研究[D];福建农林大学;2009年
5 李杰;超临界CO_2萃取鸡矢藤中有效成分的工艺研究[D];郑州大学;2012年
6 廖攀;丹参酮生物合成相关基因的克隆及其代谢调控[D];上海师范大学;2010年
7 应乐;藤茶超临界CO_2萃取物体外活性与工艺优化[D];浙江大学;2012年
8 王海宾;多聚羟基烷酸的代谢调控与基因工程菌的构建[D];山西大学;2003年
9 高拥军;沙棘油的超临界CO_2萃取与应用[D];南京林业大学;2004年
10 肖浩平;富铬酵母发酵工艺的研究[D];江南大学;2004年
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