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《华南农业大学》 2001年
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鸡球虫对4种抗球虫药物的耐药性及其机理研究

马立农  
【摘要】:柔嫩艾美尔球虫(Eimria.tenella)是严重危害养鸡业的全球性鸡球虫病原之一。目前,控制球虫病的主要手段是依赖抗球虫药物的化学防治,但是球虫耐药性的产生严重地影响抗球虫药物的防治效果。弄清球虫耐药机理是找到更有效的防治方法的重要基础工作。 本研究对柔嫩艾美尔球虫敏感株在实验室条件下,采用4种抗球虫药物单用和联用、饮水剂和混饲剂、诱导初期适时停药等儿种方法,诱导产生多种耐药株,以期找到诱导耐药株产生的更适合的方法。比较了敏感株与诱导耐药株在透射电子显微镜下的虫体超微结构、RAPD技术测定的基因组DNA多态性、火焰光度计测定的虫体Na~+、K~+浓度、试剂盒测定的虫体ATP酶活性,荧光偏振法测定的子孢子膜流动性,以期找出球虫耐药机理。本研究的主要结果如下: 1.在用地克珠利单一药物的饮水剂进行诱导的过程中,诱导初期适时停药,经过12次继代便诱导出能耐1.25mg/L地克珠利饮水剂的耐药株。说明饮水给药,并配合诱导初期适时停药,可加速地克珠利耐药株的形成。 2.以氯化锂—ATP酶抑制剂为饮水剂,分别配合马杜霉素混饲剂和盐霉素混饲剂,仅3次继代,便分别诱导出马杜霉素耐药株和盐霉素耐药株。同样,以利多卡因—Na~+离子通道阻断剂为饮水剂,分别配合马杜霉素混饲剂和盐霉素混饲剂,仅3次继代,便分别诱导出马杜霉素诱导耐约株和盐霉素诱导耐药株。说明诱导过程有ATP酶抑制剂和Na~+离子通道阻断剂参与,能明显加快耐药株的形成。 3.各耐药株体内的葡萄糖含量明显高于敏感株。与透射电镜下超微结构显示的各耐药株与敏感株体内淀粉颗粒呈明显差异的结果相吻合。 4.采用RAPD技术检测并结合EcoR酶切基因组DNA试验发现敏感株与地克珠利诱导耐药株之间存在基因组DNA多态性。说明地克珠利诱导耐药株可能是敏感株基因突变的结果。 5.敏感株体内Na~+、K~+浓度和ATP酶活性均显著高于马杜霉素诱导耐药株和盐霉素诱导耐药株。说明马杜霉素耐药株和盐霉素耐药株体内ATP酶活性下降和Na~+、K~+浓度降低,可能是耐药性形成的两个原因。
【学位授予单位】:华南农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:S859.79;S852.7

【引证文献】
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【同被引文献】
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