旱稻种质类缘鉴别与遗传基础RAPD分析

【摘要】： 本研究初步确立了32份稻作（主要是旱稻）在籼、粳亚种中的分类地位， 其中有9份属于籼稻，13份偏籼，4份偏粳，6份粳稻。还对部分旱稻种质进 行了农艺特征观察，对产量性状与7个数量性状间的相关进行测验，得到了单 株产量的直线回归方程，回归直线的F测验达极显著。 硅胶干燥水旱稻叶片适于总基因组DNA提取，所提取的DNA分子量在45kb 左右，能成功用于RAPD扩增。经优化组合，水旱稻RAPD的最佳反应体系为： 50～100ng DNA模板，1.2U的Taq酶，2.5mmol/L的Mg~(2+)，0.25mmol/L的 dNTPs，0.5μmol/L引物，10mmol/L Tris-Cl（pH8.0），50mmol/L KCl，0.1％ 明胶，反应终体积为20μL。10个引物共获得99条清晰可辨的条带，其中93 条为多态性条带，占总扩增片段的93.9％，所扩增的片段在0.2～3.0kb间。 不同引物扩增的条带数在5～14条，平均为9.9条。各种质间的遗传距离在 0.11～0.75间，平均为0.35。引物S60、S80、S1308和S1319能将42份稻种 质全部区分开来，但没有获得水、旱稻，籼、粳稻种群间及不同地域种质的特 异标记带，因而在聚类中，籼、粳亚种也没有明显聚类界线。说明RAPD标记只 能在一定程度上鉴别稻种质或品种，而不能作为籼粳型分化标记。引物S80所 产生的一条约1.0kb、一条约0.8kb的带（新旱2号的特异标记带），S1308产 生一条约2.7kb，是旱稻新品系系列所特有。S80还产生一条约1.5kb的带， 是籼稻所特有（个别非典型的粳稻也具有）。S1319所产生的一条约2.5kb的 带，为香珍矮的特异标记带，没有获得其它种质的特异标记带。