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《华南热带农业大学》 2001年 硕士论文
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旱稻种质类缘鉴别与遗传基础RAPD分析

曾莉娟  
【摘要】: 本研究初步确立了32份稻作(主要是旱稻)在籼、粳亚种中的分类地位, 其中有9份属于籼稻,13份偏籼,4份偏粳,6份粳稻。还对部分旱稻种质进 行了农艺特征观察,对产量性状与7个数量性状间的相关进行测验,得到了单 株产量的直线回归方程,回归直线的F测验达极显著。 硅胶干燥水旱稻叶片适于总基因组DNA提取,所提取的DNA分子量在45kb 左右,能成功用于RAPD扩增。经优化组合,水旱稻RAPD的最佳反应体系为: 50~100ng DNA模板,1.2U的Taq酶,2.5mmol/L的Mg~(2+),0.25mmol/L的 dNTPs,0.5μmol/L引物,10mmol/L Tris-Cl(pH8.0),50mmol/L KCl,0.1% 明胶,反应终体积为20μL。10个引物共获得99条清晰可辨的条带,其中93 条为多态性条带,占总扩增片段的93.9%,所扩增的片段在0.2~3.0kb间。 不同引物扩增的条带数在5~14条,平均为9.9条。各种质间的遗传距离在 0.11~0.75间,平均为0.35。引物S60、S80、S1308和S1319能将42份稻种 质全部区分开来,但没有获得水、旱稻,籼、粳稻种群间及不同地域种质的特 异标记带,因而在聚类中,籼、粳亚种也没有明显聚类界线。说明RAPD标记只 能在一定程度上鉴别稻种质或品种,而不能作为籼粳型分化标记。引物S80所 产生的一条约1.0kb、一条约0.8kb的带(新旱2号的特异标记带),S1308产 生一条约2.7kb,是旱稻新品系系列所特有。S80还产生一条约1.5kb的带, 是籼稻所特有(个别非典型的粳稻也具有)。S1319所产生的一条约2.5kb的 带,为香珍矮的特异标记带,没有获得其它种质的特异标记带。


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