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《华南热带农业大学》 2002年
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香蕉成熟相关基因的克隆及表达的定量分析

张德有  
【摘要】: 本研究通过RT-PCR和PCR扩增的方法,从巴西香蕉(Musa Acuminata AAA.SPP.)果实中扩增得到四条片段——香蕉凝集素(Lectin)基因cDNA片段和DNA片段、香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因cDNA片段和DNA片段。分别将它们与pGEM-T Easy Vector连接,转化E.coli DH5α,得到重组子,经酶切鉴定和PCR鉴定后,进行了序列的测定。通过序列分析得知,香蕉凝集素(Lectin)基因cDNA片段长508 bp;香蕉凝集素(Lectin)基因DNA片段长575bp,有一个长为67bp的内含子;香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因cDNA片段长1,316bp;香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因DNA片段长1,858bp,有三个内含子区,分别长90 bp,83 bp和370bp;在总共的四个内含子序列中,分别都符合GT-AG规则。此四条片段的核苷酸序列分别与GenBank中发表的Lectin基因(AF001527)及Pectate Lyase基因(X92943)具有95%以上的同源性。同时,香蕉凝集素(Lectin)基因的cDNA片段和DNA片段所推测出的氨基酸序列与GenBank中发表的Lectin基因(AF001527)的氨基酸序列也具有93%以上的同源性。 本研究还用RT-PCR的方法对香蕉凝集素(Lectin)基因和香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因在香蕉不同组织和果实采后不同成熟阶段的表达情况进行了研究。分别提取香蕉根、叶、及不同成熟阶段果皮和果肉共12个组织的Total RNA,通过RT-PCR,结果发现香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因在四个组织阶段中特异表达,分别是:成熟度4、5的果皮和成熟度3、4的果肉组织;香蕉凝集素(Lectin)基因在七个组织阶段特异表达。分别是:成熟度2、3、4的果皮和成熟度2、3、4、5的果肉组织。证明这两个基因都具有组织特异性,都在果实特定的成熟阶段表达,并且在果皮和果肉中表达的成熟阶段也不一样。 在这两个基因表达的定性研究之后,还对这两个基因的表达进行了定量研究。 首先通过定量PCR方法研究香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因的表达情况。发现香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因在四个组织中的表达强度依次为:成熟度4果肉>成熟度3果肉>成熟度5果皮>成熟度4果皮。 其后通过竞争性PCR技术对香蕉凝集素(Lectin)基因的表达情况进行相对定量研究。结果显示成熟度2的果皮组织中,每微克Total RNA含有0.012,665 张惋有:晋唬地硫书共总困的记险及取这的灭骨方折 ng转录本;成熟度3的果皮组织中,每微克Total RNA含有0刀19,149 un转录 本;成熟度4的果皮组织中,每微克Total RNA含有 0.001,564 ng转录本;成 熟度2的果肉组织中,每微克Total RNA含有*739,199 ng转录本;成熟度3 的果肉组织中,每微克Total RNA含有又963,732 ng转录本;成熟度 4的果肉 组织中,每微克 TOtal RNA含有 4.879,877 ng转录本;成熟度 5的果肉组织中, 每微克 TOtal RNA含有 3.584,009 ng转录本。 参照相关研究的结果,关于应用PCR技术,特别是关于应用竞争性PCR 技术来检测基因的表达情况,进行了讨论。 最后,将香蕉凝集素儿ect士)基因的DNA片段登录到GenBank,登录号 (GenBank Accession Number)为:AY103481。
【学位授予单位】:华南热带农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:S668.1

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【引证文献】
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1 孙科源;荔枝凝集素基因的克隆与表达分析[D];河南科技大学;2011年
2 林莹;番木瓜果胶裂解酶基因的克隆[D];福建农林大学;2006年
3 倪海枝;草莓离体再生研究及plB基因siRNA表达载体构建[D];华中农业大学;2008年
【参考文献】
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1 莫磊兴,邹瑜,李小泉,林贵美;香蕉的采后生理与保鲜技术[J];广西农业科学;1998年05期
2 金志强,彭世清,孔德骞,郑学勤,李建国;香蕉后熟过程中乙烯的生物合成及其与ACC含量的关系[J];热带作物学报;1995年S1期
3 宋俊岐;赵春晖;贺焰;田波;;控制果实成熟的植物基因工程研究进展[J];生物技术通报;1997年05期
4 于萍;果实成熟机理和几个生理问题[J];生物学杂志;1996年04期
5 左丽,袁静,郭辉玉;疱疹病毒定量PCR的建立[J];微生物学报;1998年02期
6 高东微,黄霞,黄学林;香蕉(Musa spp.)的体外植株再生及外源基因转移[J];细胞生物学杂志;1998年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 薛炳烨,束怀瑞;应用基因工程改良果实成熟特性研究进展[J];山东农业科学;2002年04期
2 孙丽萍,王秀峰,杨建平,于明礼,于喜艳;番茄果实蔗糖磷酸合成酶基因的克隆与序列分析[J];山东农业科学;2005年02期
3 魏国芹;戴洪义;孙玉刚;梁美霞;安淼;;榅桲离体培养繁殖的研究[J];山东农业科学;2010年01期
4 刘媛媛;张春庆;吴承来;;LeJA2基因沉默表达载体导入番茄转化系统的建立[J];山东农业科学;2010年02期
5 吴志平;植物转基因方法在桑树上的应用[J];安徽农学通报;2003年04期
6 张宝琼;范眸天;屈云慧;于丽霞;李涵;;利用卡那霉素筛选非洲菊转基因植株的技术研究[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年03期
7 夏珣;闫明旭;李名扬;眭顺照;;Metallothionein克隆载体及表达载体的构建及转化矮牵牛的初步研究[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年07期
8 张霞;刘敦菊;徐立;眭顺照;李名扬;;白兰叶挥发油提取方法及工艺条件研究[J];安徽农学通报(上半月刊);2011年03期
9 张希太;;高粱DNA导入小麦“矮早8”引起后代变异的研究及SSR分析[J];安徽农学通报(上半月刊);2011年05期
10 张希太;;牛胸腺DNA导入“藳优9415”后代变异及SSR分析[J];安徽农学通报(上半月刊);2011年07期
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1 黄月琴;薛建平;;植物抗病分子机制及抗病基因工程研究进展[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 尹钧;任江萍;李志岗;李磊;周苏玫;卫丽;宋丽;;转基因抗穗发芽小麦的获得[A];中国作物学会2007年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2007年
3 吴洁;周宇;张雪梅;阎文昭;;幽门螺杆菌热休克蛋白基因HspB-C对甘薯遗传转化的研究[A];中国核科学技术进展报告——中国核学会2009年学术年会论文集(第一卷·第8册)[C];2009年
4 陈昆松;张上隆;;果实成熟衰老功能基因研究与调控[A];中国园艺学会第四届青年学术讨论会论文集[C];2000年
5 曹家树;王永勤;余小林;叶纨芝;向珣;卢刚;;白菜小孢子发育相关基因BCMF2的分离和表达特征分析[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年
6 黄浩;柳李旺;龚义勤;陈崇顺;张慧荣;;萝卜总RNA提取与mRNA差异显示技术初步研究[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年
7 于远;张显;于蓉;杨玉梅;;西瓜花蕾总RNA提取与mRNA差异显示技术[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
8 齐靖;申连英;毛永民;曹柳青;兰海波;陈亮;;枣转基因研究前景展望[A];第五届全国干果生产、科研进展学术研讨会论文集[C];2007年
9 马艳芝;张玉星;;梨属植物基因组DNA提取部位对RAPD扩增的影响[A];第二届全国果树分子生物学学术研讨会论文集[C];2009年
10 来琳琳;黄婷婷;张景海;宋永波;;转基因植物生产药用蛋白研究概述[A];2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2007年
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1 张妙霞;野生香蕉(Musa spp., AB group)抗寒相关基因的克隆与表达分析[D];福建农林大学;2010年
2 俞志明;EXPA7亚家族调控水稻根毛伸长机制研究[D];浙江大学;2010年
3 胡芳;甜柿果实采后生理变化对1-MCP处理的响应机制及电学特性变化的研究[D];西北农林科技大学;2010年
4 冯守千;红梨着色机理的研究[D];山东农业大学;2011年
5 田红梅;甜瓜蔗糖磷酸合成酶基因的功能鉴定与分析[D];山东农业大学;2011年
6 马进;水稻条纹病毒(RSV)RNA3、RNA4的克隆与抗RSV转基因水稻的培育[D];山东农业大学;2011年
7 赵美荣;扩展蛋白与植物激素调节的干旱胁迫下小麦细胞生长的关系研究[D];山东农业大学;2011年
8 郝金凤;无载体无选择标记转基因耐贮藏甜瓜的培育[D];内蒙古大学;2010年
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2 魏礼玲;MYB转录因子家族相关EST干涉载体构建及遗传转化的研究[D];华中农业大学;2010年
3 张鲁军;离子束诱导普通小麦小偃81 HMW-GS 1Ax1缺失突变家系突变机制研究[D];郑州大学;2010年
4 刘无双;拟南芥种子特异表达基因启动子分析[D];山东农业大学;2010年
5 于军伟;苹果α-法尼烯合成酶基因转化番茄研究[D];山东农业大学;2010年
6 王京梅;叶籽银杏叶生雌性生殖器官发育相关基因的克隆与序列分析[D];山东农业大学;2010年
7 郭梁;甜樱桃实生后代品质性状的遗传变异及远缘杂种根癌病抗性鉴定[D];山东农业大学;2010年
8 赵云霞;马铃薯L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶基因在番茄中的功能分析[D];山东农业大学;2010年
9 王晓菡;中国芍药品种遗传多样性SRAP分析和核心种质的初步构建[D];山东农业大学;2010年
10 颉瑞霞;油用亚麻(胡麻)再生体系和农杆菌介导的遗传转化体系研究[D];甘肃农业大学;2010年
【同被引文献】
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1 牛建新,鲁晓燕,于艳华;外植体和培养因子对草莓不定芽诱导的影响[J];北方园艺;1999年03期
2 张利义,高遐虹,于同泉,王有年;草莓离体再生体系的研究[J];北京农学院学报;2004年02期
3 齐晓天;王玉成;杨传平;曾丽萍;;二色补血草凝集素(Lectin)序列分析及表达[J];东北林业大学学报;2008年11期
4 程林梅,孙毅,岳焕荣;大豆生物工程研究进展[J];大豆科学;2001年01期
5 杨明亮;宋雯雯;康明;杨志超;张颖;马健;王继安;;大豆凝集素含量测定方法的改进与种质资源分析[J];大豆科学;2008年02期
6 林金科,开国银;茶树RNA的提纯与鉴定[J];福建农业大学学报;2003年01期
7 陈金河;狐尾椰子的生物学特性及其栽培技术[J];福建热作科技;2005年02期
8 高清华;叶正文;张学英;郑宏清;;草莓生物技术育种研究进展[J];分子植物育种;2006年S1期
9 陈维信,吴振先,苏美霞,季作梁;荔枝常温下泡沫箱加冰保鲜研究[J];广东农业科学;2000年03期
10 罗桂环;我国荔枝的起源和栽培发展史[J];古今农业;2001年03期
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2 冯蔚;海南无核荔枝胚胎发育及败育的机理初探[D];海南大学;2010年
【二级引证文献】
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1 李荣荣;番木瓜果实成熟期若干基因的克隆与表达分析[D];福建农林大学;2010年
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1 韩今朝;香蕉冻害及防冻[J];福建农业科技;1986年05期
2 江梅;国际市场香蕉供过于求[J];世界热带农业信息;1995年02期
3 苏金茹,房树贵,王志才;香蕉贮藏保鲜技术[J];北方园艺;1996年02期
4 陈师媛;中国香蕉受日商青睐[J];世界热带农业信息;1998年05期
5 黄育宗;外销香蕉的质量要求[J];中国南方果树;1999年03期
6 ;香蕉“二轻、二重、一控、一巧”施肥法[J];世界热带农业信息;1999年06期
7 朱佳满;怎样加快我国香蕉产业化进程[J];农村实用技术与信息;2004年07期
8 小吕;;香蕉保健新发现[J];农村实用技术;2006年02期
9 李鄂平;;香蕉蕾前蕾后管理技术[J];果农之友;2006年06期
10 ;世界香蕉产业概况[J];世界热带农业信息;2006年12期
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1 曾莉莎;赵志慧;陈元熙;姜子德;;广州地区香蕉上镰孢菌种类及多样性分析[A];2010年中国菌物学会学术年会论文摘要集[C];2010年
2 费继锋;李华平;周国辉;肖火根;;香蕉线条病毒检测方法的研究[A];第三次全国植物病毒和病毒防治学术研讨会论文集[C];2003年
3 李华平;周国辉;徐春香;饶雪琴;;黄瓜花叶病毒衣壳蛋白基因转化香蕉研究[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
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5 陆永跃;梁广文;曾玲;;不同香蕉品种上双带象甲的发生和危害[A];走向21世纪的中国昆虫学——中国昆虫学会2000年学术年会论文集[C];2000年
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7 邓成菊;谢学立;刘菊华;金志强;徐碧玉;;两个香蕉乙二醛酶家族基因的克隆(摘要)[A];第二届全国果树分子生物学学术研讨会论文集[C];2009年
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1 吴明;国产香蕉撑起果业亮点[N];农民日报;2005年
2 本报记者 杨春莲 通讯员 符斌;香蕉地里“种”出富裕村[N];钦州日报;2009年
3 刘慧;应加强香蕉产销预警体系建设[N];中国经济时报;2009年
4 本报记者 刘妍;纽约城里一个崭新的香蕉共和国[N];中国服饰报;2010年
5 记者 孙志平 赵叶苹 王晖余;乙烯利催熟的香蕉到底能不能吃?[N];新华每日电讯;2011年
6 李道刚;从欧盟内部看“香蕉争端”的由来[N];人民法院报;2005年
7 ;国产香蕉与国外香蕉哪个更“香”[N];云南科技报;2002年
8 记者 钟祺 姚惠怡 俞长庆 通讯员 黄启华 梁春艳;“种玉米比种香蕉强多了”[N];东莞日报;2008年
9 ;吃香蕉预防“秋季病”[N];中国食品报;2009年
10 记者 陆崇林;盯住大户广泛发动 做好今冬明春以香蕉为重点的水果流通工作[N];钦州日报;2009年
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1 冯斗;香蕉乙烯受体cDNA的克隆与特异性表达及RNAi技术应用于鉴定植物基因功能的方法研究[D];华南热带农业大学;2003年
2 王海海;棉花果胶裂解酶基因(GhPEL)的功能研究及农杆菌介导棉花胚性愈伤组织转化体系的建立[D];南京农业大学;2009年
3 陈廷速;人表皮生长因子基因的克隆、表达及其在植物中的遗传转化研究[D];福建农林大学;2002年
4 谢学立;香蕉果实成熟相关基因的克隆与表达分析[D];华南热带农业大学;2007年
5 徐立;香蕉果皮带毛和早花突变体的筛选、鉴定及突变机理初步研究[D];华南热带农业大学;2006年
6 刘德兵;低温胁迫对香蕉幼苗生理特性的影响及冷诱导相关基因的分离[D];华南热带农业大学;2007年
7 刘逸尘;中国明对虾体内凝结反应过程中相关免疫基因的克隆与表达研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2005年
8 王素雅;酶法液化制备澄清型香蕉汁[D];江南大学;2004年
9 吴琪;熊本牡蛎(Crassostrea sikamea)、葡萄牙牡蛎(Crassostrea angulata)精子bindin蛋白基因研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
10 刘莹;甘露聚糖结合凝集素对T淋巴细胞免疫功能调节作用的初步研究[D];南方医科大学;2011年
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1 张德有;香蕉成熟相关基因的克隆及表达的定量分析[D];华南热带农业大学;2002年
2 郑雯;香蕉与枯萎病病程相关基因的鉴定[D];海南大学;2010年
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6 乐海鳌;海南康苗农业开发有限公司扩种750亩香蕉项目可行性研究[D];南京理工大学;2003年
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