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《华南热带农业大学》 2003年
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荔枝SSR标记的研究及其对部分荔枝种质的遗传多样性分析

李明芳  
【摘要】: 中国是荔枝的发源地,种质资源非常丰富,仅海南就有4,000hm~2荔枝实生树,此外,在坝王岭、五指山、尖峰岭、吊罗山和乐东金鼓岭上还有成片的野生荔枝,一起构成了一个巨大的海南荔枝种质资源库,既是我们目前进行实生选种的基础,又是将来杂交育种的源泉。 在培育荔枝新品种的过程中,最常用的是实生选种和芽变选种。而荔枝杂交育种一直都没有采用,因为对现有荔枝种质的遗传背景不清楚。而要想从更深层次上发掘和利用那些珍贵的宝藏,就必须找到一个强有力的进行荔枝种质分析的工具。 鉴于此,本研究采用近年来发展起来的分子标记技术开展了荔枝SSR标记的研究工作,以便为荔枝群体遗传结构的研究提供一个强有力的、高效的检测手段。并利用自行开发的荔枝特异性SSR标记对37个荔枝种质和2个龙眼品种进行了遗传多样性分析。 主要结果如下: (1) 首次成功地开发了22个荔枝SSR标记。应用SAM法分离、克隆了100个荔枝SSR序列,加上搜索数据库所获得的一个SSR序列,一共101个序列用于特异引物的设计。仅从71个序列的82个位点设计出特异引物。合成52条特异引物与5′-锚定简并引物配成52对,对其中的41个位点进行检测。其中19对引物扩增出相应大小的片段,另外15对SSR引物扩增出了非预期片段。最后,从34对出带的引物中,筛选出多态性引物28对,获得22个荔枝位点特异性SSR标记。从测序算起,产生多态性SSR标记的效率为44%。 (2) 用34对荔枝的SSR引物对两个龙眼属植物品种石硖、储良进行转移性扩增,其中22对引物在26个SSR位点有强带扩增,转移扩增率为64.7%。说明荔枝绝大多数SSR引物对龙眼属植物具有适用性。 (3) 用开发出来的荔枝SSR引物对37个荔枝栽培品种和2个龙眼品种进行遗传多样性分析,获得遗传相似性矩阵,其范围在0~1之间,平均0.556。其 中,三月红与海垦互4号、海垦1且号间的遗传相似性最小:白糖罂与海垦 8 号之间的遗传相似性最大,相似系数为0.952;并鉴定出错蛛红与海垦 13号是同一个品种。 (4)采用UPGMA $对39个种质进行聚类分析,供试品种在相似系数为0.556 处被划分为5个类群。 (5)无核荔枝A。号与A;。号之间的遗传相似性系数为0.762,大于无核荔枝A。 号与两个黑叶实生苗之间的相似性(与黑叶失是0.714,与黑叶圆是0.6), 从而支持了用A;。号作砧本优于用黑叶作砧木的效果这一事实。并认为用海 垦4号、海垦13号(即缩练红)和海垦18号作砧木比用问 号作砧木嫁 接繁殖A.的效果可能更好。
【学位授予单位】:华南热带农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S667.1

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