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清澜港红树林土壤微生物区系和土壤细菌16S rDNA的多态性研究

王岳坤  
【摘要】:从海南清澜港红树林区采集19个土壤样品,运用了微生物分离培养技术测定了土壤可培养细菌、放线菌和真菌的个体数量。分析土壤含水量、盐度、pH值、N、P、K含量等对土壤可培养微生物(细菌、放线菌、真菌)个体数量的影响。通过菌种分离和测定分离菌株的抗肿瘤、抗白色念珠菌、抗金黄色葡萄球菌的活性,分析不同土壤样品可培养的拮抗细菌、拮抗放线菌菌落形态的多样性,为红树林土壤微生物资源的利用提供参考数据。通过直接提取土壤细菌DNA,运用PCR、变性梯度凝胶电泳和分子克隆等技术,分析土壤细菌16S rDNA的多态性。从变性梯度凝胶上回收两个DNA条带,构建A克隆文库和B克隆文库。从A克隆文库中随机抽取13个克隆子进行序列分析,发现克隆子A-1共出现3次,与11个不同序列的A克隆子最相似的22个GenBank序列中,未培养细菌相似序列占77%;从B克隆文库中随机抽取10个克隆子进行序列分析,发现与10个B克隆子序列最相似的20个GenBank序列中,未培养细菌相似序列占85%。从构建的系统树中发现:有4个A克隆子序列与sulfate-reducing bacterium(AJ012598)的系统关系比较近,序列的相似率79-88%。


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