收藏本站
《华南热带农业大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

番木瓜乳管特异表达启动子的克隆及功能分析

杨英军  
【摘要】:目前,启动子是国内外研究的一个热点,已发现了大量组织特异性启动子和诱导型启动子。热带果树番木瓜作为理想的生物反应器植物受体,在其乳管系统中表达外源蛋白具有易收获、易分离纯化等诸多优点,因此,分离番木瓜乳管特异表达的启动子具有重要意义。 本研究以我国优良的番木瓜品种“穗中红”为试验材料,利用染色体步移技术获得了番木瓜乳管中两种重要的蛋白酶proteinase omega基因和chymopapain基因的启动子区序列,并利用基因工程的原理和方法,构建了这两个基因启动子的缺失载体,分别采用基因枪轰击法和农杆菌介导的转化法将这些载体导入番木瓜的叶片和烟草中,进行了GUS基因的瞬时表达研究和稳定整合研究,以分析启动子各区段的功能,获得的主要结论如下: 1.经过三次染色体步移,从番木瓜品种“穗中红”基因组中克隆到了蛋白酶proteinase omega基因(登录号:X66060)的部分序列及其启动子区序列,片段全长1,505 bp,3′端长466 bp的片段与番木瓜的proteinase omega基因的5′端同源性为96%;5启动子区长度为1,039 bp,在数据库中没有搜索到同源区段,表明为第一次克隆得到。将全长序列递交GenBank数据库,登录号为AY695444。通过Promoterprediction软件对proteinase omega基因启动子区分析,结果表明在905 bp-955 bp和947 bp-997 bp的位置存在可能的基础启动子序列,其可能性分别为0.79和0.66,推测转录起始位点(即帽结构)为ATG前面的第50位的T或92位的A。进一步用PlantCARE软件对5′上游远端调控序列进行顺式作用元件分析,发现多种重要元件如TATA-box、CAAT-box、Atl-motif、HSE、I-box、ABRE、ERE、EIRE等。 2.利用染色体步移技术从“穗中红”基因组中分离到蛋白酶chymopapain基因(登录号:X97789)的部分序列及其5′侧翼区序列,片段全长719 bp,3′端长163bp的片段与番木瓜的chymopapain基因的5′端同源性为99%;5′侧翼区长度为556bp为启动子区,在数据库中没有搜索到同源区段,表明为第一次克隆得到。将全长719bp序列递交GenBank数据库,登录号为AY803756。用在线软件Promoter Prediction
【学位授予单位】:华南热带农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S667.9

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 董朝菊;;菲律宾研究发现多食番木瓜好处多[J];中国果业信息;2011年06期
2 廖建良;;广东番木瓜产业发展的对策与建议[J];吉林农业科学;2011年03期
3 刘健帮;;广州地区番木瓜矮化高产栽培技术与效益分析[J];广东农业科学;2011年14期
4 潘祖建;陈豪军;周全光;甘卫堂;;5个番木瓜品系比较试验[J];南方农业学报;2011年08期
5 唐文忠;陆国昆;廖芬;黄茂康;黄伟雄;黄僚才;;番木瓜幼叶原生质体分离研究[J];南方农业学报;2011年05期
6 陈豪军;潘祖建;周全光;甘卫堂;;大果型番木瓜品系(种)比较试验[J];广东农业科学;2011年10期
7 冯瑞祥;李卫红;周常清;游恺哲;伍丽芳;;危害番木瓜苗的一种新害虫——番木瓜瘿蚊研究初报[J];中国热带农业;2011年04期
8 万涛;肖德兴;常青山;;番木瓜胚胎发育与杂交种子败育的研究[J];果树学报;2011年04期
9 ;番木瓜新品种简介[J];福建果树;2011年02期
10 万涛;肖德兴;田双;潘平香;;番木瓜胚珠发生与雌配子体形成的研究[J];中国农学通报;2011年22期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李芳;沈欣杰;赵凯;袁华招;李天红;;苹果山梨醇运输基因MdSOT3启动子克隆与功能分析[A];中国园艺学会2011年学术年会论文摘要集[C];2011年
2 游恺哲;林冠雄;李卫红;;信息技术在番木瓜组培工厂化育苗中的应用研究[A];中国青年农业科学学术年报[C];2004年
3 武改霞;李婷婷;孙现超;;与ToMV CP互作基因IP-L的启动子克隆分析[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
4 阮小蕾;李华平;;抗PRSV的辐射诱变番木瓜植株的抗病性测定[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
5 蔡健和;秦碧霞;周雪平;陈永惠;;番木瓜曲叶病毒病初步研究简报[A];2005年中南、西南植物病理学会和中国菌物学会联合学术年会论文集[C];2005年
6 冯黎霞;周国辉;李华平;;转复制酶基因番木瓜抗病性测定和纯合系的获得[A];中国植物病理学会2004年学术年会论文集[C];2004年
7 武华玉;黄京书;乔木;彭先文;冯政;梅书棋;;猪TCAP基因启动子克隆及活性分析[A];第十二次全国畜禽遗传标记研讨会论文集[C];2010年
8 卢秉国;;生物技术在番木瓜上的应用[A];福建师大福清分校2003年会议论文汇编[C];2003年
9 李华平;张曙光;饶雪琴;阮小蕾;周国辉;范怀忠;;抗病毒转基因番木瓜华农1号的安全性评价[A];中国植物病理学会2007年学术年会论文集[C];2007年
10 杨英军;周鹏;;番木瓜proteinase omega基因启动子的克隆及序列分析[A];中国遗传学会七届一次青年研讨会暨上海高校模式生物E——研究院第一届模式生物学术研讨会论文汇编[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;美中红番木瓜[N];今日信息报;2005年
2 武威振;万寿之果——番木瓜[N];中国食品质量报;2003年
3 记者 张晔 通讯员 董志昕;番木瓜可能蕴藏人类性别起源秘密[N];科技日报;2009年
4 刘永霞 许永新;番木瓜北方温室栽培要点[N];农民日报;2009年
5 温鸿耀;怎样防治番木瓜病害[N];广东科技报;2001年
6 吴志丹;台湾番木瓜良种 国荣2号[N];福建科技报;2004年
7 林更生;番木瓜不是木瓜[N];福建科技报;2004年
8 林更生;番木瓜的性别可控制[N];福建科技报;2004年
9 黄家南;夏季管好番木瓜[N];福建科技报;2006年
10 德宏州果树站 番汝昌;一年生鲜食番木瓜栽培试验成功[N];云南科技报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨英军;番木瓜乳管特异表达启动子的克隆及功能分析[D];华南热带农业大学;2005年
2 王向阳;侵染番木瓜和胜红蓟的双生病毒研究[D];浙江大学;2004年
3 申艳红;番木瓜若干果实成熟相关基因克隆及遗传转化的研究[D];福建农林大学;2009年
4 何玮毅;双T-DNA共转化获得转基因番木瓜的研究[D];福建农林大学;2009年
5 卜友泉;NFBD1启动子克隆、鉴定、转录调控机制及其在细胞生长、凋亡中的作用研究[D];重庆医科大学;2007年
6 张军科;樱桃(Prunus mahaleb L.)PGIP基因及其启动子克隆[D];西北农林科技大学;2000年
7 岳相辉;线粒体促凋亡蛋白Smac抑制IAPs调控膀胱癌细胞凋亡的研究[D];华中科技大学;2006年
8 卢学春;LRP16基因启动子分析、基因功能及在白血病细胞中表达的初步研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2003年
9 涂礼莉;海岛棉纤维发育相关基因表达谱分析及功能基因的发掘[D];华中农业大学;2007年
10 冯政;猪骨骼肌发育相关新基因家族BTG/TOB的克隆及功能研究[D];华中农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈中海;番木瓜性别的生化标记与分子标记研究[D];福建农林大学;2001年
2 阮松;番木瓜与柱花草间种模式研究[D];海南大学;2012年
3 曾继吾;番木瓜组织培养及种质超低温保存研究[D];湖南农业大学;2003年
4 卢秉国;番木瓜育性的研究[D];福建农林大学;2002年
5 张建波;番木瓜叶肉原生质体分离以及GFP瞬时表达研究[D];海南大学;2011年
6 梁栋;番木瓜β-半乳糖苷酶同源基因启动子克隆与功能鉴定[D];福建农林大学;2008年
7 孙奇;番木瓜性别分化与内源激素及多胺关系的研究[D];福建农林大学;2004年
8 齐振宇;番木瓜杭州地区设施栽培初探[D];浙江大学;2006年
9 谭宏华;HMGA1基因启动子克隆及活性区域的分析[D];南华大学;2011年
10 张更林;结核杆菌分泌蛋白ESAT-6基因转化番木瓜的研究[D];华南热带农业大学;2002年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026