收藏本站
《华南热带农业大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

产几丁质酶海洋放线菌C203的分离鉴定及其酶基因的克隆

蔡海宝  
【摘要】: 近年来,有关几丁质及其降解产物如几丁寡糖、壳聚糖等的研究与开发在国内外引起了普遍关注,它们在医药、食品、环保等众多领域显示出广阔的应用前景。采用生物酶降解法生产几丁寡糖、壳聚糖已成为理想的途径,它与化学生产法相比具有反应条件温和、不污染环境等特点。许多微生物都能产几丁质酶,但只有部分在实际中得到应用,主要原因是菌株的产酶能力太低。因此筛选出产酶活力高、稳定、潜力大等具有多种优良特性的菌株是解决实际应用问题的一条重要途径。 本文从海洋产几丁质酶菌株的分离、筛选、菌株的鉴定、几丁质酶基因的克隆、几丁质酶的分离和性质研究以及酶蛋白的分析等几个方面进行了系统研究,结果如下: 通过透明圈筛选法,从南海海域采集的样品中,分离到38株产几丁质酶的菌株,其中32株细菌、5株放线菌和1株真菌。选取了其中1株编号为C203的菌株作为供试菌株,该菌产酶能力较强并且在底物中存在葡萄糖时依然产酶。通过对其16S rDNA序列、形态及生理生化特征进行分析,鉴定出C203属于链霉菌属(Streptomyces),可能是来自海洋环境的一个新种,并构建了其系统发育进化树。 对菌株C203液体发酵工艺和培养基组成进行了优化。实验考察了碳源、氮源、无机盐、pH值及接种量等对C203产酶活性的影响,并通过正交实验对培养基配比进行了优化。确定其最佳培养基组成及发酵条件为:胶体几丁质(w/v为1%)20%(v/v),葡萄糖0.5%,酵母膏0.3%,K2HPO4 0.04%,陈海水配制,初始pH值7.0~7.2,种龄48h,接种量5%,28℃,200r/min培养6d。 菌株C203产酶发酵液离心后的上清液经透析、真空浓缩、再通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳得到一有几丁质酶活性的条带,回收此活性条带,再利用SDS-PAGE电泳分析,得出其分子量约为44KD。通过对该几丁质酶理化性质进行研究后发现:该酶的最适作用温度为60℃;最适pH值为7.2;Mg~(2+)和Fe~(2+)对酶活性有一定的促进作用,而Cu~(2+)和Zn~(2+)则能强烈抑制其活性;最适底物浓度为1%的胶体几丁质。 通过对微生物产几丁质酶基因家族进行分析,设计了一对保守引物。利用这对引物,以菌株C203基因组DNA为模板,克隆到一段长度为609bp的几丁质酶基因保守序列。然后再通过设计一系列的随机引物(AD引物)和特异引物(SP引物),利用TAIL-PCR技术,分别克隆到该保守片段两端的侧翼序列,经拼接后获得一段总长度为1563bp的基因序列,经BLAST分析发现和该基因碱基序列同源性最高的是菌株S. thermoviolaceus的产几丁质酶基因(Chi 40),同源性为84%。将该基因序列输入NCBI的ORF查找器进行阅读框架分析,结果发现该序列包含一个从234~1484bp,长度为1251bp,编码416个氨基酸的几丁质酶基因开放阅读框。将翻译后的氨基酸序列进行BLAST分析,结果表明和该氨基酸序列同源性在80%以上的都是微生物产生的几丁质酶,最高的是菌株S. aureofaciens产的几丁质酶,同源性为83%。 利用DNAMAN软件对菌株C203几丁质酶的疏水性、亲水性、等电点和分子量等性质进行了分析,同时还预测了其二级结构,结果显示该蛋白的等电点为5.86,分子量为44208.8。
【学位授予单位】:华南热带农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:Q93

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 王振东;罗春艳;杨晨;张殿朋;吴慧玲;刘伟成;;海洋细菌QDC01的鉴定及其几丁质酶基因的克隆与分析[J];农业生物技术学报;2013年06期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 徐杰;水稻秸秆降解放线菌的分离鉴定及其降解机理研究[D];哈尔滨工业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 夏天;GS115-pPIC9k-ChiA4.0工程菌发酵生产HaSNPV几丁质酶的分离提取、杀虫抑菌机制及大田防治的研究[D];西北大学;2011年
2 杨雪松;海洋几丁质降解菌的筛选、酶的分离纯化及酶学性质研究[D];广西民族大学;2011年
3 马淑娟;白僵菌和绿僵菌对樟巢螟的致病力及林间防治[D];福建农林大学;2013年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 罗洁,黎碧娜,陈达美;改性甲壳素和壳聚糖在食品中的应用[J];广东化工;1999年02期
2 余长缨,韩宝芹,李静,刘万顺,戴继勋;海洋弧菌几丁质酶的产酶条件及分离纯化研究[J];高技术通讯;2002年09期
3 沈东风,孔祥东,贾之慎;壳聚糖及其衍生物的抗菌活性研究进展[J];海洋科学;2000年07期
4 竺国芳,赵鲁杭;几丁寡糖和壳寡糖的研究进展[J];中国海洋药物;2000年01期
5 罗丽娟,施季森;一种DNA侧翼序列分离技术——TAIL-PCR[J];南京林业大学学报(自然科学版);2003年04期
6 李智盈,韩宝芹,贾志良,戴继勋;海洋弧菌Z010 产生几丁质酶的发酵条件研究[J];青岛海洋大学学报(自然科学版);1999年04期
7 于朝晖,刘丽美;几丁质的临床应用概述[J];山东医药工业;2001年04期
8 杨铭铎,曲志华,李元瑞;几丁质/几丁聚糖及其衍生物在食品中的应用[J];食品科学;2001年05期
9 缪辉南,戴建凉;海洋生物抗肿瘤活性物质的研究进展[J];生物工程进展;1995年01期
10 杨文博,冯波,佟树敏,张历;产几丁质酶链霉菌SO1菌株的筛选及培养条件[J];天津农业科学;1997年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郭苗莉,朱江波,陈蓉芳,张天宝;应用基因表达谱芯片研究MNNG诱致小鼠胚胎畸形肢体基因表达的变化[J];癌变.畸变.突变;2005年02期
2 陈兰英,赵桢,王晓涛,屈二军,陈建南;HSP70基因在人胃癌、食道癌及宫颈癌中高表达和癌变关系的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年04期
3 程烽;盛燕;施静艺;陈漪;徐潮;刘智;梁军;潘春明;朱忠勇;宋怀东;;重叠延伸PCR法构建UGRP1基因启动子的点突变表达载体[J];癌变.畸变.突变;2007年01期
4 温居一;张积仁;李鹏;张军;王斌;;NADH对二乙基亚硝胺所致L02人肝细胞株p53基因突变和c-erbB2基因表达的影响[J];癌变.畸变.突变;2009年05期
5 金艺凤;李铁臣;王莹;刘东华;孙珍贵;;ERCC1和XPD单核苷酸多态性与非小细胞肺癌铂类化疗敏感性的关系[J];癌变·畸变·突变;2010年05期
6 王朝霞;生物信息学:一门前沿交叉学科[J];安徽教育学院学报;2002年06期
7 王继英;武英;郭建凤;呼红梅;张印;;莱芜黑猪保种群促卵泡素β亚基和雌激素受体基因、基因型变化情况[J];山东农业科学;2007年01期
8 解永梅;张成玲;赵永强;张薇;张广民;;山东省大白菜黑腐病病原的鉴定及其生物学特性的研究[J];山东农业科学;2007年06期
9 姚良同;丁延芹;刘尧;陈一然;杜秉海;李俊;;玉米秸秆低温快速腐熟菌的筛选、鉴定及效果试验[J];山东农业科学;2008年03期
10 陈静;胡晓辉;苗华荣;张建成;禹山林;;花生SRAP-PCR技术体系的优化[J];山东农业科学;2008年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 朱林;江昌俊;叶爱华;李叶云;余梅;邓威威;;茶树ATP硫化酶和硒半胱氨酸甲基转移酶基因植物表达载体的构建[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 王在贵;何瑞国;钱世钧;刘朝良;;特异腐质霉纤维素酶的酶谱分析[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
3 窦瑞木;雷清泉;张改强;;番茄内生细菌TB-2生化特性及对番茄灰霉病菌的抑制作用[A];经济策论(上)[C];2011年
4 张新妙;马润宇;;用膜结晶技术制备蛋白质晶体的研究[A];第二届全国膜分离技术在食品工业中应用研讨会论文集[C];2006年
5 刘春;;鳢舒伯特气单胞菌内脏类结节病的研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
6 高娟;唐明森;王艳玲;蒋再学;竺薇;罗满林;;重组猪α干扰素发酵工艺的研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
7 马镝;;产壳聚糖酶菌株的筛选、鉴定及抑菌活性研究[A];科学发展与社会责任(A卷)——第五届沈阳科学学术年会文集[C];2008年
8 邓利玲;胡小芳;卢明玥;钟耕;;冷榨南瓜子饼蛋白粉酶法水解工艺及其产物性质研究[A];管产学研助推食品安全重庆高峰论坛——2011年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨全国食品科学与工程博士生学术论坛论文集[C];2011年
9 黄华伟;王印庚;陈霞;张凤萍;;渡夏期养殖刺参腐皮综合征的发生与环境因子间的关系[A];农产品质量安全与现代农业发展专家论坛论文集[C];2011年
10 庄绪静;曹雅忠;李克斌;尹姣;;同源建模和分子对接方法的应用与发展[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张冬梅;牙龈卟啉单胞菌侵入血管内皮细胞后粘附分子表达及信号调控的研究[D];中国医科大学;2008年
2 徐荣燕;嗜热真菌糖苷酶的基因克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
3 张婕;嗜热真菌热稳定几丁质酶基因的克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
4 殷慧群;猪诱导性多潜能干细胞的建立[D];安徽农业大学;2010年
5 张俊忠;东祁连山高寒草地土壤真菌多样性研究[D];甘肃农业大学;2010年
6 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
7 郎亚军;Ectoines高效制备技术及其应用研究[D];大连海事大学;2010年
8 彭莹;土星拟威尔酵母WC91-2菌株嗜杀因子和β-1,3-葡聚糖酶的研究[D];中国海洋大学;2010年
9 王燕;两株海洋病原菌的分离鉴定、致病机理研究及三株海洋新菌的分类鉴定[D];中国海洋大学;2010年
10 陈士国;几种海洋动物酸性多糖的结构和活性研究[D];中国海洋大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李福存;发酵鸭血肠生产工艺研究[D];华中农业大学;2010年
2 高红梅;ETEC对断奶腹泻仔猪胃肠道紧密连接蛋白ZO-1的影响[D];华中农业大学;2010年
3 罗晶晶;斑点叉尾鮰生鱼片加工过程中的微生物变化[D];华中农业大学;2010年
4 李浩丽;Bacillus pumilus CN8菌株高效降解猪血Hb酶的分离纯化与降解机制探讨[D];华中农业大学;2010年
5 余洋;卤制甲鱼加工工艺及贮藏特性研究[D];华中农业大学;2010年
6 郎晓磊;肠道菌对苏云金芽胞杆菌家蚕杀虫活性的作用[D];华中农业大学;2010年
7 罗丽;柠檬形克勒克酵母(34-9)对柑橘意大利青霉抑菌机理的研究[D];华中农业大学;2010年
8 王树云;斑点叉尾鮰病毒ORF6和ORF10基因的原核表达及其功能的初步研究[D];华中农业大学;2010年
9 逯晋忠;苏云金芽胞杆菌对云斑天牛的抗性研究[D];华中农业大学;2010年
10 汪艳杰;水稻polycomb基因家族甲基化状态初步检测[D];华中农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴雪芬;黄顺;朱广慧;王晖;;樟巢螟综合防治研究[J];安徽农业科学;2006年10期
2 田士林;李莉;;香樟在我国中部引种适应性研究[J];安徽农业科学;2006年11期
3 金显春;郭文杰;杨勇;陶文沂;;直接降解稻草秸秆的菌株筛选及其发酵过程研究[J];安徽农业科学;2006年20期
4 许天委;张世清;黄俊生;;爪哇正青霉Q-5产几丁质酶发酵条件的研究[J];安徽农业科学;2006年24期
5 王伟霞;李福后;;微生物几丁质酶的研究进展[J];安徽农业科学;2007年32期
6 顾丽嫱;李春香;刘凤娇;;金龟子绿僵菌对小菜蛾的室内毒力测定[J];安徽农业科学;2009年26期
7 常金梅;何衍彪;赵燕龙;柳凤;詹儒林;;绿僵菌致病力的制约因素研究[J];安徽农业科学;2010年06期
8 熊国如;杨本鹏;王俊刚;蔡文伟;冯翠莲;张树珍;;微生物几丁质酶研究进展[J];安徽农业科学;2010年22期
9 杨雪松;李丽;刘红全;;海洋微生物几丁质酶的研究进展[J];安徽农业科学;2011年16期
10 朱明媛;田丽;刘新利;;球孢白僵菌分生孢子可湿性粉剂配方的筛选[J];安徽农业科学;2012年08期
中国博士学位论文全文数据库 前7条
1 张婕;嗜热真菌热稳定几丁质酶基因的克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
2 王芳;杆状病毒几丁质酶基因功能分析[D];浙江大学;2004年
3 郭润芳;疏绵状嗜热丝孢菌热稳定几丁质酶纯化及其编码基因的克隆与表达[D];山东农业大学;2005年
4 范艳华;球孢白僵菌降解寄主体壁的几丁质酶和蛋白酶的分子改良[D];西南大学;2006年
5 陶勇;一株产几丁质酶细菌的鉴定、酶的性质及其基因的克隆与表达[D];四川大学;2006年
6 何学友;金龟子绿僵菌松墨天牛优良菌株筛选及其林间宿存研究[D];福建农林大学;2007年
7 燕红;两株芽胞杆菌纤维素酶诱导产生机制及其作用的研究[D];哈尔滨工业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 解娇;白僵菌悬乳剂研制及其对玉米螟防治初探[D];吉林农业大学;2011年
2 施英利;温州蜜桔桔皮提取物对小菜蛾的生物活性[D];浙江大学;2004年
3 李双祁;水稻秸秆同时糖化与乳酸发酵的研究[D];湖南农业大学;2003年
4 刘鑫宇;三倍体毛白杨木素结构的研究[D];北京林业大学;2004年
5 肖舸;绿色木霉的筛选与产纤维素酶发酵条件优化及部分酶学性质研究[D];四川大学;2004年
6 李亚澜;纤维素高效降解菌的分离鉴定及固态发酵条件研究[D];西南交通大学;2005年
7 张雯;淡紫拟青霉产几丁质酶条件和几丁质酶生化特性研究[D];福州大学;2005年
8 侯晓娟;碱性纤维素酶产生菌的分离、选育、发酵产酶条件及酶学性质研究[D];西北大学;2006年
9 高金权;木腐蕈菌对稻草基质的降解特性研究[D];西南大学;2006年
10 康园;棉铃虫核多角体病毒ORF44(Ha44)的结构与功能研究[D];中国科学院研究生院(武汉病毒研究所);2007年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 徐杰;许修宏;刘月;李洪涛;;添加菌剂对堆肥化过程中微生物群落代谢影响的Biolog解析[J];南京理工大学学报;2014年01期
2 缑敬轩;董文宾;曾桥;;微杆菌Z4产几丁质酶的发酵条件研究[J];陕西科技大学学报(自然科学版);2014年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 杨冰;水稻秸秆纤维素降解菌复合系I-D的筛选及其降解特性的研究[D];湖南农业大学;2013年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄秀梨;安丹玫;;不同碳、氮源与诱导物对球孢白僵菌产几丁质酶的影响[J];北京师范大学学报(自然科学版);1986年01期
2 黄秀梨;荣倩;黄德君;;外界条件对球孢白僵菌几丁质酶的影响[J];北京师范大学学报(自然科学版);1987年04期
3 柴平海,张文清,金鑫荣;低聚壳聚糖功能性质及应用[J];大学化学;1999年02期
4 王海波,金沙,陶芸;蚕豆叶片几丁质酶的抗虫性研究[J];复旦学报(自然科学版);1994年03期
5 章莹;几丁质应用于肿瘤治疗的研究现状[J];国外医学(肿瘤学分册);1996年06期
6 方波,江体乾;新型类肝素物质的研究——水溶性磺化羟丙基壳聚糖的研制[J];华东理工大学学报;1998年03期
7 赵文伟,于黎,钟晓光,张月芳,孙家珍;水溶性壳聚糖的制备与应用[J];化学通报;1994年04期
8 魏玉西,李钐;N,O-羧甲基甲壳胺的制备及其对草莓保鲜效果的初步研究[J];海洋科学;1998年02期
9 李鹏程,宋金明;甲壳质/壳聚糖及其衍生物的应用化学[J];海洋科学;1998年05期
10 沈东风,孔祥东,贾之慎;壳聚糖及其衍生物的抗菌活性研究进展[J];海洋科学;2000年07期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨承勇,周世宁;几丁质酶的研究及应用前景[J];仲恺农业技术学院学报;1999年01期
2 郑爱萍,李平;细菌几丁质酶研究进展[J];中国生物工程杂志;2002年04期
3 高武军,孙毅,王景雪,李润植;植物几丁质酶及其基因工程研究进展[J];世界农业;1999年03期
4 李江,胡学军,苏乔,安利佳;水稻几丁质酶基因的克隆及序列分析[J];农业生物技术学报;1998年04期
5 郭润芳,李多川,王荣;疏绵状嗜热丝孢菌热稳定几丁质酶的纯化及其性质研究[J];微生物学报;2005年02期
6 肖业臣,罗晓斌,冯佩富,钟仰进,曹阳;昆虫几丁质酶的研究进展[J];生物技术;2003年01期
7 陶勇,龙章富,金虹,谢晶,陶科,冉红艳,葛绍荣,刘昆,刘世贵;均匀设计法对产几丁质酶细菌C4发酵条件的优化[J];生物技术;2004年06期
8 黄秀梨;项伯衡;;白僵菌Beauveria bassiana的几丁质酶[J];北京师范大学学报(自然科学版);1981年02期
9 贡成良,小林淳,宫岛成寿,金伟,吴祥甫;美国白蛾核型多角体病毒几丁质酶基因核苷酸序列研究[J];病毒学报;1999年03期
10 刘晨光,陈西广,刘万顺;几丁质酶Hevamine的三级结构和催化机理[J];生命的化学;1999年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘明艳;田玉敬;张洪斌;;昆虫几丁质酶的分离纯化及其抑制剂筛选的研究[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
2 邱立友;汪世山;余功德;吴云汉;;几丁质酶产生菌的筛选及产酶条件的研究[A];全国生物防治学术讨论会论文摘要集[C];1995年
3 蔡银杰;;几丁质用于植物病害生物防治——几丁质对土壤微生物的作用[A];全国生物防治学术讨论会论文摘要集[C];1995年
4 李力;黄胜元;关雄;;产几丁质酶的苏云金杆菌菌株筛选及酶合成条件[A];全国生物防治暨第八届杀虫微生物学术研讨会论文摘要集[C];2000年
5 刘玉春;周志刚;何夙旭;姚斌;;基于免培养技术对蟹塘底泥细菌及几丁质酶基因多样性的分析[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
6 谢池楚;蔡峻;刘传;陈月华;;苏云金芽胞杆菌几丁质酶的基础表达及诱导合成的多态现象[A];2010年第四届全国微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2010年
7 赵培静;夏枫耿;缪承杜;任文彬;黄俊生;;一株产几丁质酶芽孢杆菌分离鉴定及其活性的初步研究[A];十一五农业环境研究回顾与展望——第四届全国农业环境科学学术研讨会论文集[C];2011年
8 彭锟;林毅;黄小红;沙莉;苏争先;蔡文旋;张鸿声;;苏云金杆菌几丁质酶的研究[A];第四届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第三届生物农药研讨会论文集[C];2006年
9 钟万芳;郭慧芳;方继朝;;Serratia sp.几丁质酶基因的比较研究[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
10 邱君志;陈宇熹;;虫生真菌座壳孢几丁质酶的初步研究[A];第八届海峡两岸菌物学学术研讨会论文集[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前9条
1 记者 林岳夫;海洋微生物几丁质酶研究取得进展[N];中国海洋报;2001年
2 本报记者 王爱娥;“碧护”给农作物一把保护伞[N];农资导报;2009年
3 记者 林岳夫;酶解法生产几丁寡糖达国际先进水平[N];中国海洋报;2009年
4 本报记者 林岳夫 李文星;而今迈步从头越[N];中国海洋报;2002年
5 林岳夫;海洋生物科研结硕果[N];中国海洋报;2004年
6 朱仲权;海状元818生物肥药兼用效果好[N];兵团日报(汉);2004年
7 本报记者 刘志伟;抗逆诱导剂 农业的新武器[N];科技日报;2001年
8 林枫;多氧清通过“AA级绿色食品生产资料”认证[N];农民日报;2002年
9 刘兴飞;壳寡糖杀菌诱导功能卓越[N];农资导报;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郝之奎;Chitinolyticbacter meiyuanensis的筛选鉴定及其发酵产几丁质酶研究[D];江南大学;2011年
2 沙莉;苏云金芽胞杆菌几丁质酶活性研究[D];福建农林大学;2011年
3 缑敬轩;几丁质及高附加值产物酶法生产关键技术研究[D];陕西科技大学;2012年
4 刘东;苏云金芽孢杆菌几丁质酶特性分析及其基因启动子序列的确定[D];南开大学;2010年
5 屈明博;亚洲玉米螟几丁质合酶基因表达与生理功能研究[D];大连理工大学;2012年
6 刘晓健;飞蝗几丁质合成关键基因特性及转录调控研究[D];山西大学;2013年
7 肖亮;地衣芽孢杆菌MY75几丁质酶特性及表达调控元件的研究[D];南开大学;2010年
8 王凯;黄曲霉生防菌的筛选鉴定及高效菌株JPP1的生防机制[D];哈尔滨工业大学;2013年
9 孙培莉;酸性哺乳动物几丁质酶在支气管哮喘发病机制中的作用[D];南京医科大学;2008年
10 袁照年;甘薯抗蔓割病突变体的离体筛选及几丁质酶基因导入研究[D];福建农林大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 沙莉;苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)几丁质酶基因的克隆、表达及其工程菌的构建[D];福建农林大学;2004年
2 伊亚莉;紫花苜蓿几丁质酶Class Ⅰ基因的克隆、序列分析及其表达[D];中国农业科学院;2011年
3 唐勇军;几丁质酶产生菌的筛选及初步应用的研究[D];湖南农业大学;2003年
4 占智高;家蚕表皮型几丁质合成酶基因的克隆及表达分析[D];西南大学;2010年
5 魏巍;棉铃虫几丁质酶cDNA克隆及表达研究[D];中国农业科学院;2002年
6 孙兰英;几丁质酶基因对黄瓜遗传转化的研究[D];东北农业大学;2003年
7 林成增;稻瘟病菌假定几丁质酶基因功能分析[D];福建农林大学;2010年
8 周樱;豚鼠气单胞菌CB101中几丁质酶基因的克隆及其异源表达的全酶蛋白和酶片段的功能研究[D];厦门大学;2002年
9 钟万芳;苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因及几丁质酶基因的克隆与特征分析[D];西南农业大学;2003年
10 谢宇飞;苏云金芽孢杆菌010菌株chi36基因克隆、表达和活性测定[D];福建农林大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026