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《广州医学院》 2010年
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抗细胞分裂周期蛋白25B(CDC25B)自身抗体ELISA试剂盒的制备及在食管鳞状细胞癌患者中的应用

董珺  
【摘要】:研究背景及研究目的 细胞分裂周期蛋白25B (CDC25B)是CDC25磷酸酶家族中的一员,它在肿瘤细胞的生长中起了重要的作用。最近的研究表明,食管鳞状细胞癌患者血清中抗CDC25B自身抗体水平明显高于正常人以及其它类型的肿瘤;然而抗CDC25B自身抗体诊断及预后的价值还不是很清楚。本文的研究目的是用自行制备的反向捕获酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测食管鳞状细胞癌患者血清中抗CDC25B自身抗体并探讨食管鳞状细胞癌患者血清中抗CDC25B自身抗体的临床意义。 研究方法 裂解食管鳞癌细胞株Eca-109并纯化蛋白用于自行制备ELISA试剂盒。利用试剂盒进行反向捕获酶联免疫吸附试验(ELISA)检测134例原发性食管鳞状细胞癌患者和134例正常人血清中的抗CDC25B自身抗体。并将食管鳞状细胞癌患者血清中的抗CDC25B自身抗体水平与其它肿瘤标记物癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌相关抗原(SCC-Ag)进行比较。 研究结果 使用Eca-109细胞裂解物提纯抗原,制备反向捕获ELISA试剂盒,可用于检测食管鳞癌患者血清中的抗CDC25B自身抗体。食管鳞状细胞癌患者血清中抗CDC25B自身抗体的水平(A450 = 0.9173±0.4729)明显高于正常人(A450 = 0.3775±0.2618, P 0.01),其接收器工作性能曲线(ROC)下面积为0.870(95%置信区间:0.835-0.920)。当选取A450为0.7254作为临界值时,敏感性和特异性分别为56.7%和91.0%,而CEA和SCC-Ag的阳性率分别为13.4%和17.2%。同时使用CEA、SCC-Ag和CDC25B自身抗体联合检测,其阳性率(60.4%)显著高于用CEA和SCC-Ag联合检测(26.9%,P 0.0001)。虽然抗CDC25B自身抗体的水平与患者总的生存期并无明显相关性,但是患者血清中抗CDC25B自身抗体的水平与肿瘤的临床分期高度相关(P 0.01),在临床分期为III-IV期的食管鳞状细胞癌患者中,血清中抗CDC25B自身抗体阳性的患者5年生存率仅为6.7%,而阴性的患者为43.4%(P = 0.001,log-rank)。同样,在N1期食管鳞癌患者中,血清中抗CDC25B自身抗体阳性的患者5年生存率为13.6%,而阴性的患者为54.5%(P = 0.04,log-rank)。 结论 1、用Eca-109细胞裂解物提纯蛋白作为抗原制备反向捕获ELISA试剂盒,可用于检测食管鳞癌患者血清中抗CDC25自身抗体的表达; 2、与肿瘤标志物CEA、SCC-Ag相比,检测血清中的抗CDC25B自身抗体对食管鳞状细胞癌的临床诊断有更高的价值; 3、抗CDC25B自身抗体可作为判断晚期食管鳞状细胞癌预后的血清学标志物。
【学位授予单位】:广州医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R735.1

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