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《广州医学院》 2009年
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临床分离耐喹诺酮类解脲支原体gyrA和parC基因突变的检测

王鹏  
【摘要】: 目的研究临床分离的耐喹诺酮类解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,Uu) gyrA基因和parC基因突变情况。 方法应用支原体液体培养及固体培养,通过药敏试剂盒检测筛选出对喹诺酮类药物(包括环丙沙星、氧氟沙星、司帕沙星)耐药的Uu 15株,提取其DNA,应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增gyrA和parC基因的喹诺酮耐药决定区(Quinolone-Resistant Determining Region,QRDR),并将扩增的目的基因片段进行纯化测序,测序后采用Blast比对法分析临床耐药株与解脲支原体血清3型标准菌株(ATCC700970)的序列差异。 结果5株单纯环丙沙星耐药的Uu有3株仅出现了parC的点突变,即248位C突变为T,致83位丝氨酸变为亮氨酸;另2株未发现突变。而10株表现为两种或三种喹诺酮类药物交叉耐药的Uu的gyrA和parC两个基因片段均出现了点突变,其中9株的parC突变位置同上,另有一株第298位C突变为T,未发生氨基酸的改变;gyrA为第336位C突变为A,致112位天冬氨酸被谷氨酸取代。 结论分离到的15株Uu有13株存在QRDR的突变,可能是导致Uu对喹诺酮类耐药的重要因素;且gyrA和parC两个基因同时存在突变可能与多种喹诺酮类药物交叉耐药相关;此外,临床分离Uu对喹诺酮类药物耐药可能还存在其他耐药机制。
【学位授予单位】:广州医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R759;R450

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