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《广州中医药大学》 2011年
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针刺对术后大鼠胃肠平滑肌收缩粗肌丝调节和ICC细胞的影响

胡永辉  
【摘要】:目的 本研究探索靳三针穴组中的“足三针”穴调整腹部术后胃肠运动功能的机制,从平滑肌收缩的粗肌丝调节和胃肠起搏细胞ICC两个层面进行了研究,旨在为其临床推广应用提供科学的理论基础。 方法 1、文献研究 回顾了近20年来现代医学关于胃肠平滑肌收缩粗肌丝相关调节机制的研究状况,现代医学对ICC细胞的研究进展,现代医学关于术后胃肠运动功能紊乱的实验研究和临床治疗状况,以及中医对其病因病机的认识和治法,并采用系统评价的方法对所查及的文献进行分析。 2、实验研究 制作SD大鼠结肠肠肠吻合模型。设针刺组、模型组、空白组进行比较。术后麻醉清醒即予针刺。针刺组取穴为“足三针”(后三里、三阴交、太冲),用直径0.18mm,长10mm的环球牌0.5寸毫针浅刺各穴位,以大鼠有反应为度,每5分钟缓慢提插捻转2-3次。模型组、空白组每天同一时间放于自制固定器中15min。每日针刺1次,每次15分钟,连续治疗3天。观察并记录大鼠术后首次排便时间,术后1-3天每天排便粒数、排便重量。实验结束后处死大鼠测量小肠推进率。取胃体中部距贲门1/3的胃运动起搏区、盲肠下2cm处结肠(相当吻合口处)组织,分为三部分:一部分制作石蜡切片用免疫组化法观测组织肌球蛋白轻链激酶、肌球蛋白和肌动蛋白的含量;一部分用于制作电镜标本以观察ICC超微结构的改变;一部分用RT-PCR法检测CALM1的基因表达。 结果 1.排便观察: ①首次排便时间:针刺组术后首次排便时间与模型组比较有显著性差异(P0.05)。 ②术后大鼠排便重量变化:术后第一至三天排便重量模型组与空白组、针刺组与空白组均有显著性差异(P0.01)。针刺组与模型组比较,术后第一天排便重量无明显差异,术后第二第三天出现显著性差异(P0.05) 2.小肠推进率: 术后模型组与空白组的小肠推进率有显著性差异(P0.05),针刺组与模型组比较,小肠推进率有显著性差异(P0.05) 3.胃肠组织CAM基因表达的改变:术后及针刺后CAMl未有明显改变(P0.05)。 4.胃肠组织肌球蛋白轻链激酶的的含量:结肠平滑肌MLCK含量空白组最高,模型组明显下降(与空白组比较P0.05),而针刺组较模型组有所上升(P0.05)。而结肠粘膜上皮里MLCK含量空白组最低,模型组显著升高(与空白组比较P0.05),针刺组较模型组有所减少(P0.05)。胃平滑肌及粘膜上皮MLCK含量三组间变化不大(P0.05)。 5.胃肠组织肌球蛋白的含量:结肠组织肌球蛋白含量空白组最高,模型组明显下降(与空白组比较P0.05),而针刺组较模型组有所上升(P0.05)。胃组织肌球蛋白含量三组间变化不大(P0.05)。 6.胃肠组织平滑肌肌动蛋白的含量:模型组结肠组织肌动蛋白含量术后明显下降(与空白组比较P0.05),而针刺组较模型组有所上升(P0.05)。胃组织肌动蛋白含量三组间变化不大(P0.05)。 7.胃肠组织c-kit含量:结肠组织c-kit含量模型组后明显下降(与空白组比较P0.05),而针刺组较模型组有所上升(P0.05)。胃组织c-kit含量三组间变化不大(P0.05)。 8.胃肠ICC电镜超微结构的改变:模型组ICC细胞核皱缩,异染色质趋边,呈斑块状;突起明显减少或消失;胞浆空泡形成,胞膜泡状化;胞浆内细胞器数量明显减少,结构出现异常:线粒体数量减少,内质网扩张,许多中间丝排空,次级溶酶体增多,基底膜缺乏或不完整。部分细胞胞浆内微细结构辨认不清。针刺组ICC细胞核保持正常形态,细胞突起损伤不明显,异染色质部分趋边;存在大量线粒体、核糖体、内质网和高尔基体;胞浆内细胞器形态结构较为清楚,少量线粒体肿胀、内质网扩张;基底膜维持完整。 结论 1.针刺能缩短腹部术后大鼠首次排便时间,促进排便和小肠运动功能的恢复。 2.针刺对平滑肌粗肌丝调节具有调整作用,其调整作用是通过改变肌球蛋白轻链激酶,肌球蛋白,肌动蛋白含量而实现的,而与钙调蛋白无关。 3.针刺能增加腹部术后胃肠起搏细胞ICC细胞的数量,并改善ICC的超微结构,这可能是针刺调整腹部术后胃肠功能的机理之一。
【学位授予单位】:广州中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R245

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【参考文献】
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