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《广州中医药大学》 2017年
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XXM及其单体对2VO大鼠作用及机制研究

张君  
【摘要】:目的:探讨XXM及其相关单体成分KAE对慢性缺血缺氧引起的脑损伤的作用及其机制。方法:采用双侧颈总动脉永久性结扎(bilateral common carotid arteries occlusion,2-VO)建立大鼠慢性脑缺血动物模型;Morris水迷宫、斜板实验以及抓握实验检测慢性脑缺血大鼠的行为学;HE染色和尼氏染色观察大鼠脑组织病理性变化;试剂盒检测脑组织内SOD活性以及MDA含量;ELISA检测脑组织VEGF、NT-3和BDNF的含量;Western blotting检测脑组织抗氧化蛋白、神经保护蛋白等的表达水平。采用CoCl2诱导的PC12建立缺氧损伤细胞模型,Western blotting检测细胞抗氧化蛋白、神经保护蛋白等的表达水平。结果:1.XXM可改善慢性脑缺血大鼠的行为功能,表现如下:(1)XXM可改善慢性脑缺血大鼠学习记忆障碍,表现在以下方面:①XXM中、高剂量可显著缩短2-VO大鼠在Morris水迷宫定位航行实验中的潜伏期;②XXM高剂量可显著增加2-VO大鼠在Morris水迷宫空间探索实验中穿越所在位置的次数;③XXM可显著增加2-VO大鼠在Morris水迷宫空间探索实验中第一次穿越平台所在位置的时间,且与游泳速度无关。(2)XXM可改善2-VO大鼠协调运动行为能力,表现为XXM高剂量可显著增加2-VO大鼠在斜板试验和抓握试验中的评分。(3)2-VO大鼠出现明显的海马CA1区、皮层和白质损伤,XXM剂量可减轻2-VO大鼠的海马、皮层以及白质神经元的损伤,其中以中、高剂量效果最为明显。2.KAE可改善慢性脑缺血大鼠的行为功能,表现如下:(1)KAE可改善慢性脑缺血大鼠学习记忆障碍,表现在以下方面:①KAE高剂量可显著缩短2-VO大鼠在Morris水迷宫定位航行实验中的潜伏期;②KAE高剂量可显著增加2-VO大鼠在Morris水迷宫空间探索实验中穿越所在位置的次数;③KAE可显著增加2-VO大鼠在Morris水迷宫空间探索实验中第一次穿越平台所在位置的时间,且与游泳速度无关。(2)KAE可改善2-VO大鼠协调运动行为能力。表现为XXM高剂量可显著增加2-VO大鼠在抓握试验中的评分。(3)2-VO大鼠出现明显的海马CA1区、皮层和白质损伤,KAE可减轻2-VO大鼠的海马、皮层以及白质神经元的损伤,其中以高剂量效果最为明显。3.XXM可改善慢性脑缺血大鼠缺血损伤,表现在以下方面:(1)XXM可显著升高2-VO大鼠脑组织中SOD活性以及抗氧化蛋白Dj-1表达水平,并能显著减少脑组织中MDA的含量;(2)XXM可显著增加2-VO大鼠脑组织中神经保护因子-3,VEGF以及BDNF的含量,并且显著提高海马中GAP蛋白的表达水平;(3)XXM可显著增加2-VO大鼠脑组织中突触素的表达水平;(4)XXM可显著降低海马中线粒体损伤蛋白PTP表达水平以及免疫炎性反应蛋白P2X7的表达水平。4.KAE可改善慢性脑缺血大鼠缺血损伤,表现在以下方面:(1)KAE可显著升高2-VO大鼠脑组织中SOD活性,并能显著减少脑组织中MDA的含量;(2)KAE可显著增加2-VO大鼠脑组织中以及抗氧化蛋白Dj-1表达水平。5.XXM及其单体KAE可改善CoC12诱导的PC12缺氧损伤,主要表现在,XXM和KAE通过增加DJ-1以及降低Nrf2实现对缺氧细胞的抗氧化保护作用。结论:XXM及其单体KAE可显著改善慢性脑缺血诱导的脑损伤,明显提高2-VO大鼠学习记忆能力障碍和协调运动功能障碍,其机制可能与减少神经元损伤,抗氧化应激以及免疫炎性反应,改善突触结构域功能异常以及能量代谢障碍有关,同时对脑部重塑具有一定作用。这些都提示,XXM及其单体对缺血性中风具有一定的治疗潜能。
【学位授予单位】:广州中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R285.5

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