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《广州中医药大学》 2000年
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清毒饮和养正片对白血病细胞凋亡的作用及其机理研究

潘习龙  
【摘要】: 急性白血病属于中医虚劳、血证、温病等范畴,其发病原因为精气内虚、 温热毒邪炽盛,发病机理不外乎邪毒内蕴、正气虚弱、血行瘀滞、痰邪凝滞, 临床采用辨证和辩病的方法,给予扶正、解毒、化瘀及砷剂等治疗。 导师组根据多年的工作经验,认为急性白血病的本质为正虚邪盛,正虚 邪盛贯穿于白血病的全过程,治疗上应清热解毒、凉血止血、活血化瘀、化 痰散结与补气养血、滋阴填精兼顾,在中医理论指导下,拟定了治疗急性白 血病的两个复方清毒钦和养正片,清毒饮以清热解毒、凉血止血、活血化瘀、 化痰散结的药物组成,养正片以益气养血、滋阴填精的药物组成,清毒饮中 大部分药物具有抗肿瘤作用,即细胞毒作用,养正片以改善机体免疫功能的 药物为主组成,通过改善机体的免疫功能而起到间接抗肿瘤的目的。根据中 医辨证用于急性白血病的不同证型,可与化疗同时应用,起到增效减毒的作 用,也可单独应用于化疗间歇期或不适宜化疗者,经临床观察证实有较好的 疗效,以往的实验研究也证实清毒饮和养正片可延长荷瘤小鼠生存期,改善 小鼠免疫功能,提高IL-2、IL-6、TNF-α活性及其mRNA表达。 细胞凋亡是机体维持自身稳定的一种基本生理机制。机体通过细胞凋亡 消除损伤、衰老与突变的细胞,维持生理平衡,当组织细胞凋亡异常时,可 导致各种疾病的发生。目前,国内外对细胞凋亡的基础研究及其在疾病诊疗 -2. 中的应用研究,正越来越受到医学界的重视。 细胞凋亡在白血病的发生发展中起重要作用,白血病细胞的凋亡是减少 的,而细胞凋亡是由基因编程控制的,Be12、P53、Fas等癌基因与白血病细 胞凋亡有较密切关系。诱导凋亡是白血病治疗的一个重要途经,某些中药可 能具有诱导凋亡的作用,其作用机制是目前研究的一个热点。 我们采用L72 12白血病小鼠模型,用原位末端标记法(TUNEL)观察清毒 饮、养正片及化疗对 L72的白血病细胞凋亡的影响,并同时观察了小鼠肝、 脾指数的变化,结果发现清毒饮组、化疗组的肝、脾指数均较模型组有减小 (P<0.05),清毒饮组优于养正片组,与化疗合用则肝脾指数减小更明显 叩刃),表明清毒饮、养正片有一定抗白血病作用,且与化疗合用有增效 作用,TUNEL结果发现清毒饮组、养正片组、化疗组都可见较多凋亡阳性白血 病细胞,清毒饮组优于养正片组,与化疗合用则更明显,凋亡指数均大于模型组 (P(0.of),证明清毒饮、养正片具有诱导L7212的白血病细胞凋亡的作用,以 清毒饮组较明显,且可以提高化疗的诱导凋亡作用。这或许是临床治疗白血病 的机理所在。 用免疫组织化学方法检测小鼠L7212白血病骨髓有核细胞的BCL-2、P53、 Fas的表达,结果显示 L72白血病细胞的 BCL-2蛋白表达明显增高,给予清 毒饮、养正片处理后,BCL-2有所下降,以清毒饮组下降较养正片组明显,与 化疗合用后下降更明显(P<0.05);L7212白血病有Fas表达减低,给予清毒 饮、养正片、化疗处理后FAS有一定升高,清毒饮组亦较养正片组明显,清 毒饮加化疗组则尤其明显(P<0.oi),而 P53表达在 L7212白血病细胞稍减低, 经清毒饮、养正片、化疗处理后,P53表达的阳性率及表达强度均有所升高, 也以清毒饮组较明显,与化疗合用后升高更明显,但统计学处理差异无显著 性意义(P>0.05),酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测sEas显示与模型组比 较,清毒饮组 SFas 明显降低(p<0.05),养正片组则无明显变化:与空白组 -3- 比较,清毒饮组则无明显变化,养正片组则明显升高…狈.05厂 以上表明清 毒饮、养正片确能下调BCI。-2的表达水平,提高FAS的表达水平,而对P53 作用不甚明显,清毒饮可使sEas的水平降低,养正片对sEas的作用较弱, 这可能是清毒饮、养正片诱导细胞凋亡的机制所在。 总之,本研究表明清毒饮、养正片有诱导白血病细胞凋亡的作用,且清 毒饮较养正片明显,清毒饮、养正片与化疗结合可以提高化疗的诱导凋亡作 用,这也许是临床治疗自血病有较好疗效的原因之一,清毒饮、养正片通过 下调BCLZ表达,提高FAS表达而诱导细胞凋亡,清毒饮、养正片对P53的 影响尚不够明显。
【学位授予单位】:广州中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2000
【分类号】:R273

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【参考文献】
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