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《广州中医药大学》 2006年
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中药活性成分对肿瘤自杀基因旁杀伤效应及GJIC的影响

吴映雅  
【摘要】:恶性肿瘤是严重危害人类健康和生命的重大疾病。基因治疗给恶性肿瘤患者带来了曙光,国外已把基因治疗作为恶性肿瘤常规治疗无效后的一种标准治疗尝试。但十多年来基因治疗的实验和临床研究结果表明,肿瘤基因治疗远未达到人们当初期望的那样有效。自杀基因治疗虽然存在旁杀伤机制,理论上能完全消除肿瘤细胞达到治愈的效果,但由于目前载体转染效率较低、靶向性不够等问题还没有解决,因而未能达到预期的效果,且因病毒载体的使用等带来了一定的毒副作用。如何有效地提高治疗效果,同时减少其毒副作用是目前仍须解决的关键问题。现有研究发现,几乎所有自杀基因系统都存在旁杀伤效应,增强旁杀伤效应能降低对高转染率的需求,减少载体及前体药物用量和毒性,增强基因治疗系统对肿瘤杀伤力。因此,增强旁杀伤效应目前已成为提高肿瘤基因治疗疗效的重要策略。产生旁杀伤效应的主要机制有:缝隙连接细胞通讯(Gap Junctional Intercellular Communication,GJIC)介导,细胞凋亡介导和免疫介导等。根据上述这几种机制,目前形成旁杀伤效应的增效策略主要有:促进GJIC、诱导癌细胞凋亡,提高患瘤机体免疫力等。常用的技术手段包括基因转染法及药物诱导法。中药是一个天然药物宝库,在促进肿瘤GJIC、诱导癌细胞凋亡或提高患瘤机体免疫功能等方面都有优势或潜力,且毒副作用相对较少,从中寻找自杀基因增效药物,建立中西医结合疗法具有可行性。 研究目的意义:本课题选择被报道有促细胞GJIC或诱导癌细胞凋亡作用的抑癌中药成分芹黄素、白藜芦醇、姜黄素,研究其对自杀基因系统是否有协同增效作用,获得有肯定作用的中药成分,探讨其通过GJIC或细胞凋亡机制增强自杀基因旁杀伤效应的药理靶点,阐明其增效的机理,为建立肿瘤基因治疗联合中医药疗法,推进肿瘤基因治疗的临床应用和抗癌中药新药开发打下基础。 1.实验方法: 1.1 中药活性成分对自杀基因旁观者效应影响的体外筛选:MTT法体外检测大鼠肝癌细胞CBRH7919对芹黄素、白藜芦醇、姜黄素的敏感程度,以确定用药浓度。选择对细胞抑制率低的浓度进行实验。上述三种中药活性成分各自以不同浓度与GCV分别或共同作用于大鼠肝癌CBRH7919的tk~-细胞,以及含10%tk~+细胞的tk~+、tk~-混合细胞,MTT检测各组存活率,两两比较分析各组存活率的差异和旁观者效应大小,并用金正钧Q值分析中药与自杀基因系统联合的相互作用是否具有协同性。Q值为联合用药时实测药效与理论药效的比值,Q≤0.85为拮抗作用,0.85≤Q1.15为相加作用,q≥1.15为协同作用。 1.2 对有效中药成分对自杀基因治疗系统增效机制研究:分别用不同浓度的白藜芦醇、姜黄素与GCV分别或共同作用于大鼠肝癌CBRH7919的tk~-细胞以及含10%tk~+细胞的
【学位授予单位】:广州中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R730.5

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
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【参考文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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【同被引文献】
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