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《广州中医药大学》 2007年
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清热解毒活血法治疗狼疮性肾炎疗效及作用机理探讨

李燕  
【摘要】: 目的(1)总结中西医对狼疮性肾炎(LN)的发病机制和防治措施的研究进展;(2)观察清热解毒活血中药对瘀热痹阻证LN的临床疗效。(3)观察Ⅳ型LN患者血清对正常人肾小球系膜细胞(GMC)增殖的影响以及清热解毒活血中药对Ⅳ型LN血清干预下GMC增殖、细胞凋亡、GMC中Bcl-2蛋白合成和Bcl-2mRNA表达的影响,从细胞分子生物学水平探讨清热解毒活血中药治疗LN的机制,为临床应用提供实验依据。 方法(1)文献研究:通过查阅大量古代和现代中、西医国内外文献,总结和评价有关LN的中医认识、病因病机、西医发病机制以及中西医防治措施方面的研究现状。(2)临床研究:用简单随机化、前瞻性的研究方法,将60例瘀热痹阻证LN患者按1:1比例分为对照组和治疗组。对照组采用常规西医治疗,治疗组在对照组的基础上加用清热解毒活血中药治疗,3月为一疗程。观察患者主要症状、证候(面部红斑、发热、口疮、双手红斑、关节疼痛、关节肿胀、肌肉疼痛、脱发、浮肿、胸痛、心悸、乏力、烦躁、手足心热、口干、失眠、耳鸣、痤疮、咽痛、月经血块)和实验室检查指标(白细胞、淋巴细胞、血红蛋白、血小板、尿白细胞、尿红细胞、尿蛋白、尿素氮、肌酐、血浆白蛋白、血沉、C_3、C_4、CH_(50)、抗核抗体、抗双链DNA抗体(抗ds-DNA抗体)、凝血功能等)的改善情况,计算治疗前后的狼疮活动评分(SLEDAI)和中医证候积分,评定疾病疗效和证候疗效。(3)实验研究:①将正常对照血清和不同浓度(5%、10%、15%、20%)的Ⅳ型LN患者的血清作用于GMC,观察其对GMC增殖的影响,并选择对GMC增殖影响最显著的一组血清(x%)用于下一步的实验。②结合血清药理学方法,分为5组进行观察(Ⅰ组为空白对照组、Ⅱ组为对照组血清+x%LN血清组、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别为低、中、高浓度含药血清+x%LN血清组),分别采用MTT法检测GMC的增殖及抑制率,荧光法和流式细胞仪技术检测GMC细胞凋亡。③再将实验分为5组进行,1组为空白对照组、2组为对照组血清+x%LN血清组、3、4、5组分别为低、中、高浓度含药血清+x%LN血清组,采用western blot检测GMC中抑凋亡基因Bcl-2蛋白的合成、采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)测定Bcl-2mRNA的表达。 结果(1)文献研究:①病名:根据狼疮性肾炎的临床表现可归属于中医“阴阳毒”、“红蝴蝶疮”、“阳毒发斑”、“痹证”、“水肿”、“虚劳(肾劳)”等范畴。②病因病机:肝肾阴虚、热毒血瘀为瘀热痹阻证LN的病机特点。③治疗:主要分为分型论治、分期论治、中成药治疗、自拟方治疗、单味药或中药提取物治疗、中药注射液治疗及其它疗法,取得较好的疗效,目前多数学者采用清热解毒活血法为主治疗LN。④现代医学研究:LN发病复杂,与遗传因素(遗传易感因素等)、GMC增殖及凋亡异常、免疫调节功能异常(细胞因子网络失衡、自身抗体如抗ds-DNA抗体、抗心磷脂抗体等的产生和免疫复合物清除能力下降等)以及神经、内分泌、代谢因素等有关,其中,肾小球固有细胞如GMC增殖、凋亡异常是LN发生、发展的重要机制,因此,防治措施力图抑制肾小球固有细胞如GMC的增殖、诱导细胞凋亡。治疗上有糖皮质激素、免疫抑制剂、其它疗法(血浆置换、免疫吸咐疗法、免疫球蛋白)等,但西医治疗存在着治疗方案不规范、部分患者对治疗不敏感或产生耐药、副作用大等缺点,因此,研究疗效确切、经济、副作用较小的中医药治疗方案成为当前临床研究的重点。(2)临床研究:治疗组疾病疗效评定总有效率和证候疗效评定总有效率分别为83.33%、93.33%,疾病疗效高于对照组,差异无统计学意义(P>0.05),证候疗效明显高于对照组,差异有非常显著性意义(P<0.01)。治疗组治疗后SLEDAI和中医证候积分较治疗前均明显减少,差异有非常显著性意义(P均<0.01);治疗组治疗后SLEDAI的降低优于对照组,但无统计学意义(P>0.05),中医证候积分较对照组明显降低,差异有非常显著性意义(P<0.01)。二组患者的LN主症较治疗前均可明显减轻,差异有非常显著性意义(P均<0.01),且治疗组治疗后LN主症的改善作用优于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05),与对照组相比患者的烦躁、咽痛、痤疮、月经血块、口干、手足心热、耳鸣、心悸症状也明显减轻,差异有非常显著性意义(P均<0.01)。在实验室检查方面,治疗组患者治疗后白细胞、淋巴细胞、血红蛋白、血小板、血浆白蛋白、C_3、C_4、CH_(50)明显升高,尿红细胞、尿蛋白、ANA滴度、血沉、血浆纤维蛋白原明显降低,抗ds-DNA抗体转阴的作用也较明显,与治疗前相比,差异均有非常显著性意义(P均<0.01);其中,在降低血沉、抗ds-DNA抗体转阴方面的作用优于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。(3)实验研究:①Ⅳ型LN患者血清对GMC增殖的影响:发现不同浓度(5%、10%、15%、20%)的Ⅳ型LN血清均可明显促进GMC增殖,与对照血清相比有非常显著性差异(P<0.01),其中以15%Ⅳ型LN患者血清最为显著。②观察清热解毒活血中药对GMC增殖和凋亡的影响:在15%Ⅳ型LN患者血清干预下,不同浓度(低、中、高浓度)的含药血清均可明显抑制GMC的增殖、诱导GMC的细胞凋亡,与对照组血清相比差异有非常显著性意义(P<0.01),其作用呈较明显的量效关系,其中,以高浓度含药血清组的上述作用最为显著,与其余各组比较差异均有非常显著性意义(P均<0.01)。③GMC中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白合成、Bcl-2mRNA表达的检测:对照血清组的Bcl-2蛋白合成、Bcl-2mRNA的表达比空白对照组显著增强;而在15%Ⅳ型LN患者的血清干预下,不同浓度(低、中、高浓度)的清热解毒活血中药的含药血清与对照组血清相比均可明显抑制GMC中抑凋亡基因Bcl-2蛋白合成和Bcl-2mRNA的表达,其作用呈较明显的量效关系,其中,以高浓度含药血清组的上述作用最为显著。 结论(1)LN的发病机制较为复杂,GMC增殖、细胞凋亡异常是LN发病的重要机制;西医治疗存在部分患者不敏感、副作用大等缺点,研究能抑制GMC增殖、诱导GMC细胞凋亡的中药具有广阔的研究的临床应用前景。(2)临床研究显示:清热解毒活血中药不仅可以显著改善瘀热痹阻证LN的主症,改善各项标示狼疮活动的实验室检查指标,而且可以明显减少SLEDAI和中医证候积分,对瘀热痹阻证LN有较好的治疗作用,副作用小。(3)实验研究发现:Ⅳ型LN患者血清可明显促进GMC的增殖,以15%Ⅳ型LN患者血清最为明显。而清热解毒活血中药的含药血清可明显抑制15%Ⅳ型LN患者血清干预下的GMC增殖、诱导GMC的细胞凋亡、抑制抑凋亡基因Bcl-2蛋白的合成、下调Bcl-2mRNA的表达,这可能是清热解毒活血中药治疗LN的分子机理,从而为临床广泛应用提供了实验和理论依据。
【学位授予单位】:广州中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R259

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9 胡宗艳;T2DM患者外周白细胞计数规律研究及清热解毒法的干预[D];山东中医药大学;2012年
10 王国顺;活血化瘀法在充血性心力衰竭治疗中的应用[D];南京中医药大学;2001年
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