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《广州中医药大学》 2008年
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出血中风阳类证影响因素的研究及其病证结合动物模型的初建

贾真  
【摘要】: 背景 中风病是人类病死的“重要杀手”,具有“四高”特点,其中出血中风临床病死率远高于缺血中风,严重影响个人生活质量,给家庭和社会带来沉重负担,中医药救治出血中风突显出独特的学术优势,我们在国家十五攻关期间提出“出血中风急性期分阴类证、阳类证为纲辨证”简便易行诊断标准,并通过多中心随机对照试验证实了出血中风阴阳辩证的可行性及普适性,结果提示出血中风急性期阳类证占80%以上。中医在辩证时十分重视素体、宿疾等因素对证候的影响,在出血中风阴阳辩证标准的临床应用中观察发现患者的个体特异性与证候及病情进退密切相关,“素体阳胜者,易发阳类证;素体阴盛者,易发阴类证”,因此有必要开展患者体质、年龄、既往史等因素对出血中风的阴阳辩证影响作用的研究。另一方面,出血中风基础研究中,中医药对于动物模型的药效学和可能作用机制探讨多停留于脑出血病的水平,很少结合中医病因、证候等因素进行研究,疾病的动物模型并不能模拟复制出血中风的某些证候特征,存在一定的局限性,建立病证结合的出血中风动物模型日益受到重视。 目的 本研究旨在“十五”国家科技攻关出血中风阳类证、阴类证急性期救治临床试验基础上,从现代医学角度初步探讨出血中风患者年龄、性别、形体、既往史等基本因素对中风病急性期始发态证候的影响作用,从而进一步深化出血中风急性期阴阳类证的辩证应用。同时建立出血中风阳类证病证结合大鼠模型,并初步探讨针对性治疗(益脑脉和通腑醒神胶囊)的作用机制,为出血中风病证结合动物模型的研究和出血中风急性期阳类证辨证救治方案的可能作用机制作一些有益的探索。 方法 本研究临床部分对“十五”攻关“中风病急性期综合治疗方案研究”课题的出血中风阳类证的影响因素进行回顾性分析。将原始资料中研究对象的基本因素,包括年龄、性别、形体、病程、饮酒史、吸烟史、高血压病史、糖尿病史、心脏疾病史、血脂异常病史等10个因素、“国标”辩证和“阴阳类证”辨证结果数量化后建立数据库,利用SPSS13.0统计分析软件先做单因素分析,然后对经单因素分析有显著意义的自变量做多因素Logistic回归分析。 本研究实验部分将200只Sprague—Dawley(SD)大鼠随机分为8组:A组(高血压性脑出血组,30只)、B组(腑实证组,30只)、C组(热证组,30只)、D组(阳类证组,30只)、E组(病证结合组,30只)、F组(治疗组,30只)、G组(正常对照组,10只),H组(假手术组,10只)。采用灌服复方地芬诺酯(CDX)法制作腑实证模型,灌服热性药物煎剂复制热证模型,采用灌服CDX与热性药物煎剂复制阳类证模型;采用双肾双夹法+脑内注入胶原酶法制作高血压性脑出血模型,结合阳类证和高血压性脑出血模型制作方法复制病证结合模型;治疗组灌服针对治疗出血中风阳类证的益脑脉和通腑醒神胶囊(具有清热、平肝、破瘀、涤痰、通腑、醒神等作用)。本文分别从证候、疾病、微观指标、药物反证方面对模型大鼠进行评价:①证候方面:记录大鼠死亡情况、观察大鼠的易激惹程度、眼结膜的充血、饮水量、大便、舌象等证候学表现,并在光镜下观察舌的组织病理学改变。②疾病方面:采用干湿重法测定大鼠脑含水量,观察脑组织的病理学和超微结构改变,测定血压变化,采用Bederson评分法评价神经行为学的改变;③微观指标:检测血液流变学的改变;④观察针对性治疗药物对上述各项指标的作用,从药物反证角度评价模型的合理性。同时分别于术后12h、24h、2d、3d、7d不同时点采用原位杂交和免疫组化法观察大鼠脑组织血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA及其蛋白的动态表达。 结果 临床研究:对404例出血中风患者阴阳类证辩证结果和基本因素的logistic回归分析提示:阳类证中年龄≥60岁的患者占57.1%,与阴类证比较差异有显著性(P<0.05),年龄的回归系数为-0.760,OR值为0.468;阳类证患者中男性占66.3%,与阴类证比较差异有显著性(P<0.01),性别的回归系数为-0.704,OR值为0.495。 实验研究:病证结合组大鼠的死亡率为23.3%,与假手术组比较差异无显著性(P>0.05)。该组模型大鼠出现烦躁、易激惹、眼结膜深红、口渴、大便干结、舌暗红等症状或体征(P<0.05或P<0.01),该模型大鼠的舌象的病理学特点表现为代谢增强为主;血液流变学的各项指标均升高(P<0.05)。该模型大鼠出现血压明显升高,脑含水量增加,偏瘫等神经缺损体征(P<0.05或P<0.01),脑组织光镜下出现注射点周围可见大片出血,血肿周围出现变性坏死,水肿明显;电镜下出现神经元和胶质细胞的线粒体肿胀,血管基膜断裂,内皮细胞肿胀等类似高血压脑出血的组织形态学改变;治疗性药物益脑脉和通腑醒神胶囊对出血中风阳类证大鼠模型各项评价指标均有不同程度改善(P<0.05或P<0.01)。HO-1mRNA和蛋白表达主要见于血肿周围组织、相应部位皮质及海马的胶质细胞,并于术后48小时达到高峰,灌服益脑脉和通腑醒神胶囊治疗后HO-1mRNA及其蛋白表达均上调。 结论 临床部分:年龄、性别是出血中风阳类证发病的影响因素,女性、年龄≥60岁是出血中风阳类证的保护因素,即在出血中风中年龄小,男性患者出现阳类证的可能性大,提示在出血中风阴阳类证的临床辩证施治中要考虑患者的性别、年龄等因素。 实验部分:本研究初步建立的出血中风阳类证的大鼠模型,且该模型能够部分模拟人类高血压脑出血阳类证的发病特点、病理变化和临床症状,是一种较为成功的病证结合动物模型,针对性治疗可能作用机制是通过上调大鼠脑组织HO-1mRNA及蛋白表达,从而对抗氧化应激反应引起的脑损害来实现的。
【学位授予单位】:广州中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R255.2;R-332

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【引证文献】
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