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《广州中医药大学》 2008年
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仙鱼汤减轻肺癌化疗副反应的实验研究与临床研究

王孔治  
【摘要】: 目的:研究仙鱼汤提取工艺;探讨仙鱼汤联合化疗对小鼠Lewis肺癌的生长抑制、免疫调节、血液系统、细胞周期的影响,并对其抗癌作用机制进行探讨;观察仙鱼汤减轻肺癌化疗副反应的临床研究。 方法:1.提取工艺研究方法:以总黄酮、总多糖的提取总量为考察指标,采用正交试验法考察以水为溶媒的提取条件。2.实验研究:复苏Lewis肺癌细胞株,皮下注射细胞悬液复制Lewis肺癌荷瘤小鼠。按照体重随机分为6组,荷瘤模型组、仙鱼汤低浓度组(1.092 g·ml~(-1))、仙鱼汤中浓度组(2.184 g·ml~(-1))、仙鱼汤高浓度组(4.368g·ml~(-1))、顺铂组(3mg/kg)、顺铂加仙鱼汤组(4.368 g·ml~(-1)),每组10只。接种15天后,观察小鼠生活状态;电子天平称重测定瘤肿抑制率和小鼠脾脏指数;血球计数仪检测血常规;HE染色观察肿瘤生长、肿瘤坏死、间质反应和肿瘤及肿瘤周围炎性细胞浸润情况。体外培养肺癌Lewis细胞株,随机分为六组:肺癌细胞组、仙鱼汤低浓度组(1.092 g·ml~(-1))、仙鱼汤中浓度组(2.184 g·ml~(-1))、仙鱼汤高浓度组(4.368 g·ml~(-1))、顺铂组(2u g·ml~(-1))、顺铂加仙鱼汤(4.368 g·ml~(-1))组。各组不同处理因素作用48小时后,倒置光学显微镜观察小鼠Lewis肺癌细胞生长密度及形态变化;收集细胞,四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞的增殖;流式细胞仪分析细胞周期;原位末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡。3.临床研究:将90例合格的中晚期非小细胞肺癌患者随机分为仙鱼汤组、化疗组和仙鱼汤加化疗组,仙鱼汤组患者予口服仙鱼汤治疗;化疗组患者接受化疗,仙鱼汤加化疗组接受化疗及口服仙鱼汤治疗。各组均治疗一个疗程,比较各组的瘤体大小、肺癌主要临床症状、生存质量、体重、免疫功能及毒副反应等。 结果:1.提取工艺:溶媒用量、提取次数对各指标都有显著影响,优选出最佳的提取工艺即溶媒用量为15倍,每次提取时间为30min,提取3次,浸泡10min。2.体外实验:①各治疗组肿瘤的生长明显受到抑制,肿瘤重量均低于荷瘤模型组,差异均有显著性意义(P<0.01)。中药各组随着药物剂量的增加,瘤重逐渐减轻。顺铂+仙鱼汤组对肿瘤生长抑制最明显,抑瘤率为68.98%。与单纯顺铂组相比抑瘤率为(59.63%),顺铂+仙鱼汤组亦有显著差异(P<0.05)。②与荷瘤模型组相比,仙鱼汤中浓度组与高浓度组可降低荷瘤小鼠的脾指数,统计有显著性差异(P<0.01),而仙鱼汤低浓度组无作用。与荷瘤模型组相比,顺铂组的脾脏指数明显偏低(P<0.01),然而顺铂+仙鱼汤组小鼠的脾脏指数较顺铂组小鼠明显提高,且差异有显著性意义(P<0.01)。③各仙鱼汤组与荷瘤模型组小鼠的WBC,RBC,Hb比较无显著性差异。顺铂组小鼠外周血WBC、RBC、Hb较荷瘤模型组明显降低,统计有显著性差异(P<001)。相比顺铂组,仙鱼汤加顺铂组的WBC明显升高,有统计学意义(P<0.05),而对RBC、Hb影响不大。④HE染色观察各治疗组肿瘤组织的坏死、凋亡面积增大。⑤各治疗组可显著降低肺癌细胞MTT-OD值,使S期细胞比率下降,G_1期细胞比率增加,细胞凋亡增多。其中顺铂+仙鱼汤组作用最明显,差异均有显著性意义(P<0.01,P<0.05)。与顺铂组相比,顺铂+仙鱼汤组亦有显著差异(P<0.01)。3.临床研究:对瘤体改变观察显示,仙鱼汤加化疗组有效率(46.67%)高于化疗组(26.67%),但无显著性差异(P>0.05)。仙鱼汤组(3.33%)有效率低于化疗组(P<0.01);瘤体稳定率比较,仙鱼汤加化疗组稳定率最高(83.33%),但与化疗组(60.00%)无显著性差异(P>0.05),仙鱼汤组稳定率(70.00%)高于化疗组,但无显著性差异(P>0.05)。与化疗组相比,仙鱼汤组在咳嗽、发热、气短、乏力等方面有较好的有效性(P<0.05);而在血痰、胸痛、纳差等方面,无显著性差异(P>0.05)。仙鱼汤加化疗组与仙鱼汤组比较,二组均可明显改善各症状,但二者相比较均无显著性差异。仙鱼汤组和仙鱼汤加化疗组治疗后患者KPS评分提高,与化疗组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。三组治疗后均能不同程度增加患者的体重,通过对比,联合组和仙鱼汤比化疗组能明显增加患者的体重(P<0.05或P<0.01)。仙鱼汤组与联合组治疗后,自然杀伤细胞和淋巴细胞转换率均较治疗前提高,以仙鱼汤组提高较为明显(P<0.01),与化疗组比较有显著性差异(P<0.01)。治疗后各组CD_4~+、CD_8~+、CD_4~+/CD_8~+总体方差有显著性比较,经LSD比较,化疗组与仙鱼汤组及仙鱼汤加化疗组均存在显著差异,但仙鱼汤组与仙鱼汤加化疗组在治疗后不存在差异(P>0.05)。提示仙鱼汤能在一定程度上具有提高患者机体免疫功能的作用。仙鱼汤组无明显不良反应,联合组不良反应率较化疗组明显减少,特别是在血液系统、谷丙转氨酶、恶心呕吐、血尿素氮、肌酐、心率、过敏、头发、周围神经、皮肤等方面具有显著性差异(P<0.05)。 结论:1.仙鱼汤能促进顺铂抑制小鼠Lewis肺癌的生长,其机制可能与阻滞细胞周期进程、促进细胞凋亡有关。2.仙鱼汤能提高Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能,对小鼠血液系统无明显毒副作用。与顺铂联合运用可降低顺铂的毒副作用。3.仙鱼汤毒副作用较少,具有稳定瘤体,改善中晚期非小细胞肺癌患者的临床主要症状,提高患者生活质量,增加体重,提高免疫力等作用;与化疗结合,能提高化疗药物的治疗效果,减轻其毒副反应。
【学位授予单位】:广州中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R734.2;R285.5

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