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《广州中医药大学》 2009年
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胃炎Ⅰ号对慢性萎缩性胃炎癌前病变的干预作用

阮氏秋河  
【摘要】: 胃癌是消化道最常见的肿瘤之一,对胃癌早发现、早诊断、早治疗可明显提高其生存率。一般认为,胃粘膜上皮细胞在发展为恶性肿瘤之前,常经历多年持续的癌前病变,及早识别和治疗癌前病变是防治胃癌的有效途径。世界卫生组织胃癌专家会议指出慢性萎缩性胃炎(CAG)伴有不典型增生时是癌前病变。中药治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变取得了较好的临床疗效,对于慢性萎缩性胃炎发病机理的研究正在逐渐深入到分子和基因水平。本课题运用分子生物学技术探讨中药胃炎Ⅰ号治疗慢性萎缩性胃炎的分子机制。 本文分为两个部分,第一部分文献研究主要总结了中医对慢性萎缩性胃炎病因病机的认识以及现代医学对慢性萎缩性胃炎癌前病变病因、发病机制、治疗方面的研究成果;第二部分实验研究,在成功复制慢性萎缩性胃炎动物模型的基础上,运用生化,放射免疫,明胶酶谱法,荧光定量PCR(SYBR Green)方法,研究慢性萎缩性胃炎自由基,炎症因子,金属基质蛋白酶2(MMP2)和金属基质蛋白酶抑制因子2(TIMP2)的活性,和表达的影响。 1.研究目的 观察胃炎Ⅰ号对慢性萎缩性胃炎癌前病变大鼠胃组织病理变化、自由基损伤、炎症因子,MMP-2及其抑制因子TIMP-2活性和RNA表达的影响。 通过观察慢性萎缩性胃炎癌前病变大鼠血清自由基损伤情况、炎症因子表达,胃组织MMP-2及其抑制因子TIMP-2活性和基因表达情况,及胃炎Ⅰ号的干预机制,以期揭示慢性萎缩性胃炎癌前病变的发病机制,并为胃炎Ⅰ号治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变寻找新的靶点。 2.研究方法 60只SD大鼠,随机分为6组:模型组、空白阻、胃炎Ⅰ号方高、中、低剂量组和维酶素组,每组10只。除空白组只给生理盐水灌胃外,其余各组均采用甲基-硝基-亚硝基胍(MNNG)(1 g/L)和盐酸雷尼替丁胶囊(0.03 g/kg)灌胃建立慢性萎缩性胃炎模型,造模后各组均给予胃炎Ⅰ号(2.16g/kg·d;1.08g/kg·d;0.54g/kg·d)治疗90天。疗程结束后取血,分离出血清,使用生化方法测定过氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)和含量,使用放射免疫法测定血清IL-1β、TNF-α含量。应用明胶酶谱法测定胃组织MMP2和TIMP2的活性,荧光定量PCR(SYBR Green)技术检测大鼠胃组织MMP-2,TIMP-2的mRNA表达水平,同时进行形态学观察。 3.研究结果 3.1.空白组的胃粘膜厚度正常,上皮细胞及腺体排列整齐。模型组出现明显的胃粘膜炎症、腺体萎缩及化生表现,未见明显的异型增生。胃炎Ⅰ号各治疗组与模型组比较有明显差异,表明胃炎Ⅰ号能有效的改善CAG的病理改变。 3.2.与模型组比较,胃炎Ⅰ号方3个治疗组血清SOD含量明显升高(P<0.05),血清MDA的含量明显下降(P<0.01),胃炎Ⅰ号各治疗组之间及胃炎Ⅰ号各组与维酶素组之间比较无统计学差异(P>0.05)。 3.3.与空白组比较模型组血清IL-1β含量略升高,但没有统计学差异(P>0.05)。与模型组比较各治疗组血清IL-1β含量略有降低,但没有统计学差异(P>0.05)。 与空白组比较各组大鼠血清TNF-α含量均有不同程度升高,但只有模型组有显著差异(P<0.05)。与模型组比较,给予胃炎Ⅰ号方中,低剂量组和维酶素组血清TNF-α含量明显降低,而胃炎Ⅰ号高剂量组TNF-α含量降低不明显。 3.4.与空白组比较各组大鼠胃粘膜MMP-2活性均有不同程度升高,以模型组最为明显(P<0.05)。与模型组比较,给予胃炎Ⅰ号各组和维酶素组MMP-2活性明显降低(P<0.05),而胃炎Ⅰ号中剂量组MMP-2活性降低最明显。 与空白组比较各组胃粘膜TIMP-2活性均有不同程度下降但只有模型组有显著差异(P<0.05)。与模型组比较,给予胃炎Ⅰ号方各组和维酶素组胃组织TIMP-2活性明显升高(P<0.05),其中胃炎Ⅰ号中剂量组升高最明显,优于维酶素组。 3.5.造模后各组大鼠胃粘膜MMP-2 RNA的表达均有不同程度升高。给予胃炎Ⅰ号和维酶素后,治疗组MMP-2RNA的表达明显降低,其中胃炎Ⅰ号中剂量组效果最佳。 造模后各组大鼠胃粘膜TIMP-2 RNA的表达均有不同程度降低于空白组。与模型组比较给予胃炎Ⅰ号方各治疗组和维酶素组胃粘膜TIMP-2RNA的表达有升高趋势,但没有统计学差异(P>0.05)。 4.结论 4.1胃炎Ⅰ号能改善实验性慢性萎缩性胃炎大鼠的胃粘膜病理改变。 4.2胃炎Ⅰ号能通过升高血清SOD含量、降低血清MDA含量来减少慢性萎缩性胃炎大鼠的自由基损伤的作用。 4.3胃炎Ⅰ号能减少炎症因子TNF-α含量。 4.4慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织中MMP2的活性升高而TIMP-2活性降低损伤因素增加而保护因素降低,所以有增加癌前病变损伤。 胃炎Ⅰ号各组和维酶素组可降低MMP-2活性,增加TIMP-2活性从而达到降低慢性萎缩性胃炎的癌前病变的作用。
【学位授予单位】:广州中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R259

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