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《广州中医药大学》 2010年
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丽安康的药学及治疗围绝经期骨质疏松症的药理研究和安全性评价

蔡大可  
【摘要】: 目的: “丽安康”为“当归补血汤”的衍生方,已有细胞生物学实验研究证明该衍生方具有雌激素样作用和促进成骨细胞增殖和分化作用,从而在微观层面上为该方治疗围绝经期骨质疏松症提供了确切的实验依据。但目前对该方的研究尚缺乏有效成分的控制和整体动物药效的验证,所以本课题进行药学研究和药效毒理研究,并结合前期的细胞研究结果和药理研究结果阐述其整体动物疗效的作用机理,为本方治疗围绝经期骨质疏松症提供宏观水平的应用依据。 方法和结果: 1.丽安康的提取工艺研究 根据前期的细胞实验结果和药材特性,本研究以相应的有效成分为考察指标,运用4因素3水平的正交试验对提取工艺进行优化研究。其中,黄芪、当归共煎工艺研究以黄芪甲苷和总固物为考察指标,选取加水量、提取时间、提取次数、干燥温度等4个因素进行考察,最终确定“当归、黄芪加8倍量水煎煮3次,每次1.5小时,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.35-1.40(60℃),70℃下减压干燥”为最佳共煎工艺;淫羊藿醇提工艺以淫羊藿苷和总固物为考察指标,选取乙醇浓度、乙醇量、提取时间、提取次数等4个因素考察,最终确定“淫羊藿加14倍量70%乙醇提取2次,每次1小时,滤过,滤液合并,减压回收乙醇,减压浓缩成相对密度为1.20(50℃)的清膏”为最佳醇提工艺。 在确定最佳提取工艺的基础上,本研究对制剂成型工艺进行了探索。由于方中提取物含有大量多糖,容易导致制剂粘性大、易吸潮,为满足制剂要求和保证用药效果,本研究从崩解时间、吸湿百分率、休止角、临界相对湿度等方面考察制剂成型方案。最终确定方案为,各干膏粉与适量微晶纤维素、羧甲基淀粉钠等辅料,混匀,以处方量4.2%交联聚维酮为崩解剂制备颗粒,低温干燥(55℃)后,颗粒与2.3%微晶纤维素为润滑剂混合,压片,包衣,即得。所得制剂崩解时限(26min)、临界湿度(64%)适中。 2.丽安康的有效成分含量测定方法研究 本研究建立了柱前衍生-HPLC法测定方中黄芪甲苷的含量,即以吡啶-苯甲酰氯(2.5:1)为衍生化试剂,对黄芪甲苷进行苯甲酰化;在Phenomenex Gemin C18色谱柱(50 mm×4.6 mm,5μm)上以乙腈-0.1%三乙胺溶液(98:2)洗脱30 min在230 nm检测样品中黄芪甲苷的含量。相比于HPLC-ELSD法,该法样品前处理更简单,专属性更强、准确度和灵敏度更高、重现性更好。同时本研究建立了对方中阿魏酸和淫羊藿苷含量的HPLC同步测定方法,即采用Phenomenex Luna C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.1%醋酸溶液作为流动相进行梯度洗脱,检测波长为316 nm,流速为1.0mL-min-1;该法准确、快速、灵敏、重复性好。实验结果表明,制剂中黄芪甲苷的含量为0.38mg/片、淫羊藿苷为2.02mg/片、阿魏酸为0.017 mg/片。 3.丽安康的药理研究 本研究以整体动物为研究对象,建立自然衰老模型和去势模型的对照研究模式,从骨形态指标、外周血内分泌物指标、下丘脑神经递质指标、免疫指标、脏器指标等进行研究骨质疏松症的药理作用研究。药理作用结果表明:在骨形态方面,丽安康可减缓两个模型大鼠的骨质疏松和骨小梁结构退化症状。在外周血内分泌物方面:丽安康提取物对两个模型大鼠均具有调节大鼠β-内啡肽的分泌以及性激素水平、提高大鼠血清SOD水平同时降低MDA水平的作用;但仅本方对衰老模型具有显著下调FSH/LH的比值的作用。在下丘脑神经递质方面,丽安康抑制去势模型中大鼠下丘脑单胺递质NE及5-HT水平的上升,而在自然衰老动物模型中,本方能抑制自然衰老大鼠下丘脑单胺递质NE. DA、5-HT水平的下降。在免疫方面,丽安康提取物可减缓自然衰老大鼠T-淋巴细胞亚群CD4/CD8比值下降,提高该模型大鼠的细胞免疫功能;对于去势动物模型则无影响。在相关脏器指标方面,本方可改善因切除卵巢引起的大鼠子宫内膜萎缩、阴道黏膜萎缩等退变;可改善因自然衰老引起的大鼠子宫、阴道、卵巢萎缩等退变。 4.丽安康的辅助药理研究 围绝经期妇女容易出现免疫力下降和记忆力减退、潮热等症状,不但影响患者生活质量,而且严重影响药物的疗效。鉴于此,本研究通过研究本复方对免疫抑制模型、记忆障碍模型、发汗动物模型的药理作用,阐述其对主症的辅助治疗作用。结果如下:①.可提高醋酸泼尼松致免疫抑制小鼠的体液免疫功能;②.可提高醋酸泼尼松致免疫抑制小鼠的特异性细胞免疫功能;③.可提高醋酸泼尼松致免疫抑制小鼠的巨噬细胞吞噬功能;④.可提高醋酸泼尼松致免疫抑制小鼠的胸腺指数及脾指数;⑤.对记忆形成、巩固、再现障碍模型小鼠记忆功能均有一定的改善作用;⑥.可缓解注射毛果芸香碱溶液致发汗小鼠的发汗程度。 5.丽安康的毒理研究 根据丽安康的药效作用,特别针对内分泌功能调节相关的的靶器官(卵巢、子宫等生殖系统),进行相关的毒理研究。结果显示,各用药组和对照组动物无一死亡外观体征无异常改变,行为活动正常;进食量、饮水量、体重增长和粪便性状等与对照组比较,均无异常改变。子宫、卵巢的组织结构及细胞形态在用药的高剂量组与不用药的对照组之间比较无明显差别。 结论: 由上述实验结果可知,丽安康剂制备工艺完善,各种工艺参数均说明该方剂的提取和成型中指标成分转移率符合要求,工艺中各种影响因素的规律明确并且量化可控。指标成分的检测方法准确、重复性良好,保证成品的质量可控,从而最大限度地保留细胞活性实验所证实的相关活性成分,并为药理实验验证细胞实验结果提供保证。药理实验结果表明,具有治疗围绝经期骨质疏松症的药理学基础,验证该方在细胞实验中具有的雌激素样作用和直接促进成骨细胞生长的药理作用;根据5类指标结果和细胞研究结果可知,本方具有两方面作用,第一,直接作用于骨骼组织,缓解骨密度下降。第二,通过对靶器官的改善,促进卵巢分泌雌激素,并调节下丘脑-垂体-卵巢轴的作用,改善造成骨质疏松症的体内环境。毒理研究结果表明,而且本方的相关器官具有较高的安全性。本研究围绕着该方的指标成分的提取和检测、相关器官的药理作用和毒理作用进行深入研究,其结果表明该方能够体现中医药治疗该疾病的优势并阐明药理作用,为丽安康的治疗围绝经期骨质疏松症的临床运用提供实验研究基础。
【学位授予单位】:广州中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R285.5

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【参考文献】
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1 白立炜,葛焕琦,张立,赵丽娟;杜仲叶醇对糖尿病大鼠骨密度的影响[J];吉林大学学报(医学版);2003年05期
2 方建伟;中西医结合治疗骨质疏松症的临床观察[J];临床医学;2005年09期
3 王永东,刘晓青;中药黄芪对成骨细胞体外成骨能力的观察[J];华夏医学;2004年03期
4 赵晓利;卵巢储备降低的判断及不孕妇女COH方案选择[J];国外医学(计划生育分册);1997年01期
5 李健,贾宪生;薄层扫描法测定淫羊藿中朝藿定C的含量[J];贵州医药;2004年02期
6 黄慧玲;黄芪甲甙的含量测定方法[J];海峡药学;2003年02期
7 谢娟平;孙文基;;淫羊藿属植物化学成分及药理研究进展[J];海峡药学;2006年05期
8 李肖甫,敬明辉;围绝经期妇女FSH、LH、FSH/LH比值测定[J];郑州大学学报(医学版);2005年01期
9 曹正中;俞家华;甘立宪;陈毓群;;膜荚黄芪苷的结构[J];化学学报;1985年06期
10 康国发;中药治疗痛性骨质疏松症45例[J];辽宁中医杂志;2004年07期
【共引文献】
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1 樊柏林;刘春霞;杨文祥;田辉;孙凡中;马弋;向继洲;;复方竹节参胶囊的毒理学试验[J];癌变.畸变.突变;2008年06期
2 胡燕平;王欣;宋捷;张旻;王秀文;李波;;五味子水煎剂的遗传毒性研究[J];癌变.畸变.突变;2009年04期
3 张旻;刘晓萌;宋捷;胡燕萍;王秀;李波;;五味子水浸提液对SD大鼠胚胎和胎仔的发育毒性研究[J];癌变·畸变·突变;2010年03期
4 王兰;张永东;梁涛;罗雁;郭红云;张晓文;;独一味胶囊对大鼠动脉管壁增殖细胞核抗原表达的影响[J];癌变·畸变·突变;2011年04期
5 王珍;董梁;李家春;萧伟;谢彩香;黄林芳;王振中;;茯苓产地适宜性分析研究[J];山东农业科学;2011年12期
6 于晓亮;王建华;;木瓜属植物果实中有效成分含量测定[J];山东农业科学;2012年02期
7 徐涛,潘见,袁传勋,金日生,开桂青;液相色谱法制备山柰酚单体[J];安徽化工;2005年02期
8 付俐;刘婧;何黎琴;王效山;洪梅;毕昱;;乙酰水杨酸苦参碱的合成[J];安徽化工;2011年01期
9 张相美;薛正莲;江荣珍;;一株林肯链霉菌变种生理特性的研究[J];安徽工程科技学院学报(自然科学版);2009年01期
10 李大剑;李伟莉;周军;陆耘;刘春丽;;生化糖浆配合利凡诺引产临床观察[J];中医药临床杂志;2006年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 马丽;卢奎;王兰;;固相法合成阿片肽RYLGYL[A];河南省化学会2010年学术年会论文摘要集[C];2010年
2 陈文华;黄国栋;赵凤达;;姜黄水醇提取液对冰乙酸损伤性溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜保护作用及机制研究[A];江西省中西医结合学会第九次活血化瘀学术研讨会活血化瘀临床应用新进展培训班论文集[C];2011年
3 莘仲明;许学锋;陈浩;;二级反渗透工艺制取医药纯化水[A];第二届中国膜科学与技术报告会论文集[C];2005年
4 白雁;王星;龚海燕;张威;;近红外漫反射光谱法定量分析连翘药材[A];第十五届全国光散射学术会议论文摘要集[C];2009年
5 王星;左春芳;雷敬卫;白雁;;近红外光谱法在连翘产区鉴别中的应用研究[A];第十六届全国光散射学术会议论文摘要集[C];2011年
6 马维思;徐江;乔海莉;陈君;李向明;;化橘红GAP基地土壤绿僵菌的分离鉴定[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
7 乔海莉;徐荣;陈君;王霞;马维思;刘同宁;;肉苁蓉花序挥发物的化学成分分析[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
8 罗茂玉;;67份中成药说明书调查与用药安全[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
9 王东晓;朱曼;王欣荣;郭代红;;基于药品说明书解析β-内酰胺类抗生素皮肤过敏试验[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
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1 帅学宏;山豆根多糖提取工艺及免疫学活性研究[D];甘肃农业大学;2010年
2 李会涛;《水产饲料生产良好操作规范》(GMP)技术管理体系构建与生产示范研究[D];中国海洋大学;2010年
3 姜登钊;中药百部归经的研究及其在海洋中药研发中的应用[D];中国海洋大学;2010年
4 林辰壹;新疆葱属植物资源研究[D];新疆农业大学;2010年
5 张延妮;珠子参化学成分及其活性成分的筛选研究[D];陕西师范大学;2010年
6 生书晶;何首乌芪合酶基因(FmSTS)的克隆、鉴定及转化拟南芥研究[D];华南理工大学;2010年
7 孟庆霞;透射光谱成像技术在中药鉴定及快速无损检测中的应用研究[D];暨南大学;2010年
8 郑君;基于文献的中药毒性认识变化规律研究[D];山东中医药大学;2010年
9 付英杰;阿胶低肽及其制剂的研究[D];山东中医药大学;2010年
10 杨波;植物类中药寒热药性与化学成分相关性的文献研究[D];山东中医药大学;2010年
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1 彭浩;秦巴山区虎杖中产白藜芦醇(苷)内生真菌的分离鉴定[D];华中农业大学;2010年
2 魏嘉;电针山羊痛阈及脑内前阿黑皮素原基因表达的时程研究[D];华中农业大学;2010年
3 潘方;高产柚苷酶菌株的选育及发酵过程研究[D];安徽工程大学;2010年
4 徐文平;四川绿茶苦涩味偏重成因分析及降低苦涩味技术研究[D];安徽农业大学;2010年
5 周胜男;马铃薯中酚类物质的提取、纯化及检测方法研究[D];安徽农业大学;2010年
6 张燕;不对称Simmons-Smith反应合成S-(+)-2,2-甲基环丙烷甲酸甲酯[D];郑州大学;2010年
7 罗传军;含氮氧有机物为中性载体的PVC膜离子选择性电极的研究[D];郑州大学;2010年
8 曹磊;四种真菌多糖抗氧化和抗肿瘤及免疫调节活性的研究[D];郑州大学;2010年
9 马伟峰;2-甲氧基雌二醇口服制剂的研究[D];郑州大学;2010年
10 张海燕;复方丹参对犬牙齿移植作用的实验研究[D];郑州大学;2010年
【二级参考文献】
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1 黄海,成羿,朱杭,陈红梅,章煜铭;补肾中药防治去睾大鼠骨丢失的组织学机理研究[J];浙江中医学院学报;2001年01期
2 李赛美,熊曼琪,伍游雅,何敏;双黄益骨方阻断糖尿病大鼠骨质改变的观察[J];中国医药学报;1998年04期
3 王学美,富宏,刘庚信;淫羊藿、枸杞子对老年大鼠线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体和ATP合成的影响[J];北京大学学报(医学版);2002年01期
4 陈亚琼,黄艳红,辛晓燕,叶雪清;菟丝子复方对大鼠性腺轴形态和功能的影响[J];第四军医大学学报;2000年03期
5 张会丰,刘会芝,卢艳,李伟,李芳,李根山;小儿维生素D缺乏性佝偻病成骨细胞表型标志物的研究[J];中国儿童保健杂志;2002年05期
6 黄岚,冯树芳,魏道林,王洪复,金慰芳,高建军;雷公藤多甙体外对成骨细胞功能表达的影响[J];中华风湿病学杂志;2000年02期
7 刘春明,刘志强,窦建鹏,李丽,刘淑莹;朝鲜淫羊藿中生物碱类新成分的分离提取及结构鉴定[J];高等学校化学学报;2003年12期
8 曾靖,黄贤华,叶和杨,赖飞,杨敬格,朱遵平;淫羊藿水提取液的耐缺氧作用[J];赣南医学院学报;2002年04期
9 赖飞,曾靖,黄贤华,叶和扬,朱遵平,杨敬格;淫羊藿水提取液中枢抑制作用的研究[J];赣南医学院学报;2003年03期
10 曾靖,赖飞,叶和杨,黄贤华;淫羊藿水提取液局部麻醉作用的研究[J];赣南医学院学报;2004年01期
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1 董桂芳;王泓;邓淑云;;壮骨强筋汤治疗围绝经期骨质疏松临床观察[J];河北医学;2011年09期
2 林红;;强化健康意识是预防围绝经期和绝经期妇女骨质疏松症的重要策略[J];长江大学学报(自然科学版);2011年04期
3 马健;浅谈更年期妇女高血脂与骨质疏松症的防治措施[J];山西职工医学院学报;2005年02期
4 李淑彦;李大庆;杨露梅;;围绝经期女性糖尿病性骨质疏松肝肾并治探讨[J];四川中医;2008年07期
5 Lane JM;周培康;;骨质疏松现代的诊断和治疗[J];国外医学.老年医学分册;1985年02期
6 谢晶;杜靖远;;骨质疏松症的防治进展[J];华中医学杂志;1993年04期
7 刘忠厚,薛延,徐苓,陶国枢,吴青,孙素元,张宪娣,刘建立,李恩,谢雁鸣,张方直;骨质疏松症的诊断、预防及治疗[J];中国中西医结合杂志;1996年05期
8 韩祖斌;前言——重视骨质疏松症的研究[J];实用老年医学;1997年01期
9 ;骨骼疾病[J];国外科技资料目录(医药卫生);1997年01期
10 冯文涛,陶宪华;骨质疏松症的药物治疗[J];中国药业;1999年07期
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1 梁瑛琳;;骨质疏松症治疗护理进展[A];中华护理学会第11届全国骨科护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2009年
2 庞小芬;王培霞;;利用去卵巢小鼠模型研究抗骨质疏松症中药的作用及机制[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
3 梁春蕊;王茜;;骨显像中骨质疏松症所致隐匿性骨折的鉴别诊断[A];中华医学会第九次全国核医学学术会议论文摘要汇编[C];2011年
4 周君;郭华;夏璐;陈世菊;覃渝茜;刘慧芳;何成奇;;兔膝骨关节炎合并骨质疏松症动物模型的建立[A];中国康复医学会运动疗法分会第十一届全国康复学术大会学术会议论文摘要汇编[C];2011年
5 吴江平;;老年男性慢性阻塞性肺疾病与骨质疏松症的相关性研究[A];中华医学会第三次骨质疏松和骨矿盐疾病中青年学术会议论文汇编[C];2011年
6 吴何嘉;刘斯润;弓健;;MR弛豫技术与DXA评价大鼠骨质疏松的比较研究[A];2009中华医学会影像技术分会第十七次全国学术大会论文集[C];2009年
7 王晓东;邓伟民;洪曼杰;刘丰;王青;孙平;;护骨胶囊治疗绝经后妇女骨质疏松症的临床研究[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
8 宁魏青;杨玲;吴洁;沈彩娥;殷华芬;;苏州地区绝经后妇女骨质疏松症及相关影响因素的研究[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
9 朱伟民;阎华;朱东;赵双龙;;不同运动方式对骨质疏松影响的模拟研究[A];2008年全国生物流变学与生物力学学术会议论文摘要集[C];2008年
10 刘忠厚;;骨质疏松诊断治疗概论与进展[A];中国老年学学会2006年老年学学术高峰论坛论文集[C];2006年
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1 张松伟;骨质疏松症患者谨防冬季骨折[N];中国消费者报;2007年
2 孟刚;预防骨质疏松症从年轻时做起[N];中国消费者报;2007年
3 王金山;年轻女孩也患骨质疏松症[N];中国医药报;2007年
4 熊迎;抗骨质疏松症长效新药面世[N];中国医药报;2007年
5 蒲昭和;骨质疏松症有哪些表现[N];卫生与生活报;2008年
6 记者 李涛;预防维生素D和钙缺失迫在眉睫[N];中国食品质量报;2009年
7 吴晓静;骨质疏松症患者应注意的事项[N];山西科技报;2004年
8 蒲昭和;易患骨质疏松症是什么人[N];民族医药报;2002年
9 健康时报记者  赵晴晴;别让骨头变“酥”了[N];健康时报;2006年
10 叶哲伟;预防骨质疏松 贯穿生命始终[N];家庭医生报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 蔡大可;丽安康的药学及治疗围绝经期骨质疏松症的药理研究和安全性评价[D];广州中医药大学;2010年
2 鲍圣涌;“双固一通”针法治疗绝经后骨质疏松症模型大鼠的机理研究[D];湖北中医学院;2005年
3 王建;大豆异黄酮对不同雌马酚代谢表型绝经后妇女骨质疏松症防治效应及机制研究[D];第三军医大学;2009年
4 王燕;2型糖尿病骨质疏松症的基础与临床研究[D];河北医科大学;2011年
5 邵敏;中药骨康对骨质疏松骨吸收与骨形成影响的研究[D];广州中医药大学;2001年
6 韩利华;脉冲电磁场防治骨质疏松症的体内外实验研究[D];第四军医大学;2004年
7 马元;通补并用法对原发性骨质疏松症生存质量的影响[D];北京中医药大学;2007年
8 朱海;健骨二仙丸防治骨质疏松症机理及蛋白质组研究[D];广州中医药大学;2002年
9 刘素荣;强肾胶囊治疗糖尿病骨质疏松症的临床与实验研究[D];山东中医药大学;2001年
10 杨海涛;去势兔骨质疏松MR定量和功能成像:与骨密度、组织学对照研究[D];华中科技大学;2009年
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1 吴涛;亚洲妇女骨质疏松评价工具的应用效果研究[D];四川大学;2006年
2 孙洁;2型糖尿病与骨质疏松症[D];山东大学;2005年
3 徐攀峰;经皮椎体后凸成形术治疗骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折的临床应用[D];浙江大学;2009年
4 张喜贵;叩击式骨应力刺激仪预防废用性骨质疏松的实验研究[D];福建中医学院;2009年
5 蒋德科;Ⅰ型成骨不全及骨质疏松症两个候选基因的遗传学研究[D];湖南师范大学;2004年
6 刘贾昆;健骨Ⅱ号对实验性骨质疏松大鼠肿瘤坏死因子及转化生长因子表达的影响[D];黑龙江中医药大学;2006年
7 王彦焱;类风湿关节炎患者并发骨质疏松的临床研究[D];新疆医科大学;2008年
8 李兴明;运用肝肾同源理论治绝经后骨质疏松症的探讨[D];广州中医药大学;2009年
9 王金台;仙灵脾治疗绝经后骨质疏松症的实验与临床研究[D];山东中医药大学;2002年
10 闫妙娥;“补肾益气 活血通络”法防治绝经后妇女骨质疏松症的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2004年
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