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穗冠花愈伤组织的诱导和花色素苷积累的研究

王惠珍  
【摘要】: 本文研究了穗冠花Celosia cristata(phumosa)愈伤组织诱导和影响愈伤组织生长及花色素苷积累的培养条件。比较了来自不同苗龄的不同外植体愈伤组织诱导率、愈伤组织生长量及花色素苷含量。筛选并建立了生长快速稳定的产花色素苷的愈伤组织体系JSA10和JSA25。并以JSA10为试验材料,就影响愈伤组织生长和花色素苷积累的条件进行了筛选。主要实验结果如下: 穗冠花种子播种于1/2MS培养基上萌发,无菌苗健壮,对诱导愈伤和花色素苷的积累都有利。以20d或30d龄的无菌苗下胚轴作外植体,效果好,愈伤组织生长量大,花色素苷的含量也高。MS+2,4-D 0.1 mg/L+BA 0.5 mg/L培养基适合愈伤组织诱导和继代培养。 经继代培养筛选分离出JSA10洋红和JSA25橙红两种愈伤组织系列。JSA10愈伤组织生长能力和积累花色素苷能力均比JSA25强。JSA10和JSA25的愈伤组织生长曲线均呈“S”形,JSA10在第8d进入对数生长期,8d~12d是愈伤组织的快速生长期,14d~18d是愈伤组织生长缓慢期,20d以后是愈伤组织衰老期。花色素苷的积累在愈伤组织生长缓慢期(14d~18d)达到高峰。JSA10愈伤组织生长好,花色素苷含量稳定,花色素苷产量高峰期相对较长。JSA25与JSA10相比,生长周期较短,进入对数生长期提前2d,增长高峰期短,较快进入生长缓慢期,花色素苷的积累高峰也是在生长缓慢期。 以JSA10继代培养和进行各种因素的影响实验,发现,2,4-D_(0.2)+BA_(1~2);2,4-D_(0.2)+KT_5;NAA_2+BA_1为适合愈伤组织生长和花色素苷积累的几种组合。其中以2,4-D_(0.2)+BA_2为最好,愈伤 l 组织鲜重增长最快,花色素苦的产量达到最高。 在试验的 10种基本培养基中,MS、BS、LS三种培养基适合 穗冠花愈伤组织生长和花色素昔的积累,其中LS最好。 在 7种所试验的碳源中,以蔗糖效果最好,30~40g/L的浓 度对愈伤组织生长和花色素苦的积累较为有利。浓度高至 90 g/L 时花色素苦的含量最高,但不利于愈伤组织的生长。 培养基中的总含氮量以 30 m mol几为宜,浓度大时促进花色 素芳的积累,但对愈伤组织的生长不利。以 NH/作唯一氮源时, 会对愈伤组织的生长起抑制作用。 光照对愈伤组织的生长和花色素苦的积累有明显的促进作 用。蓝光和红光都促进愈伤组织的生长;而对花色素昔的积累, 蓝光有效。


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