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《华南师范大学》 2005年
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黄瓜毛状根培养及其毛花洋地黄LAE基因转化的研究

齐莹  
【摘要】:本文研究了发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)ATCC15834诱导的黄瓜(Cucumis sativus L)毛状根(hairy roots)培养,细胞分裂素6-BA对黄瓜毛状根生长形态及其SOD、POD酶活性及内源乙烯产生的影响和毛花洋地黄LAE基因对黄瓜毛状根的遗传转化。所获结果如下: 10d龄的“津研四号”黄瓜子叶外植体被含野生农杆碱型Ri质粒pRiA4b的发根农杆菌ATCC15834感染10d后,获得三种不同形态的、能在无激素MS固体培养基上自主快速生长的毛状根。其中Ⅰ型黄瓜毛状根的形态与非转化根(对照)相似,但能产生更多的分枝侧根;Ⅲ型黄瓜毛状根与非转化根的形态差异较大,主根短而粗,伸长很慢,且分枝侧根多而短粗,无根毛;Ⅱ型黄瓜毛状根的形态介于Ⅰ型和Ⅲ型毛状根之间,具有较密的分枝侧根和根毛。PCR扩增结果表明,发根农杆菌Ri质粒上含有rolB和rolC基因的T-DNA部分已在黄瓜毛状根的基因组中整合并得到表达。三种不同形态的黄瓜毛状根中以Ⅰ型黄瓜毛状根的生长速度最快,培养15d后其干重增殖倍数为17.83,分别是Ⅱ型和Ⅲ型毛状根的1.2倍和1.6倍。 培养基中添加不同浓度的细胞分裂素6-BA能影响黄瓜毛状根的形态,促进毛状根的生长并延缓衰老;其中尤以6-BA3.0mg/L处理的效果最明显,其毛状根的主根变得更加短而粗,几乎无侧根产生;培养20d后其生长增殖倍数最大,达17.52倍。与对照(无外源植物生长调节剂MS培养基培养的黄瓜毛状根)相比,培养基中的细胞分裂素6-BA可以减缓黄瓜毛状根可溶性蛋白含量的降低,明显提高毛状根的SOD和POD酶活性,降低黄瓜毛状根内源乙烯的产生,使毛状根的最大生长期推迟5d出现。 利用PCR法扩增并构建了含毛花洋地黄(Digitalis lanata Ehrh.)LAE(lanatoside 15'-O-acetylesterase gene)基因的植物表达载体。利用冻融法将LAE基因导入含有Ri质粒的发根农杆菌ATCC15834中,并通过含LAE基因的发根农
【学位授予单位】:华南师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S642.2

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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9 姜虎生;张思洋;王宏燕;;跳龟灵、对硫磷乳剂对玉米生理指标的影响[J];山东农业科学;2011年06期
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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2 周书栋;杨博智;戴雄泽;张竹青;陈文超;李雪峰;马艳青;;壳聚糖对低温胁迫下辣椒幼苗抗寒性的影响[A];园艺学文集5[C];2010年
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6 孔佩佩;杨树华;贾瑞冬;葛红;;不同丛枝菌根真菌对切花月季部分生理指标的影响[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
7 王磊;卓丽环;李瑞发;;农业废弃物作为百子莲组培苗移栽基质的研究[A];中国球根花卉研究进展2011[C];2011年
8 李国树;徐成东;范树国;邱璐;黄珊;;紫茎泽兰对四种作物种子萌发的影响[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王庆莲;苹果多胺和脯氨酸合成代谢相关基因的功能鉴定[D];山东农业大学;2009年
2 毕明娟;B型烟粉虱诱导的烟草防御信号途径及B型烟粉虱和烟蚜对烟草防御反应的生理适应性差异[D];山东农业大学;2010年
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8 杨艳丽;外源茉莉酸影响马铃薯对晚疫病抗性的初步研究[D];湖南农业大学;2010年
9 姜伟;温室土壤次生盐渍化及其主要盐分对辣椒幼苗胁迫的研究[D];内蒙古农业大学;2010年
10 黄修梅;沙芥与斧形沙芥生理生态适应性及生殖生物学研究[D];内蒙古农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张庆福;枳精氨酸脱羧酶基因(PtADC)转化烟草提高抗脱水研究[D];华中农业大学;2010年
2 魏礼玲;MYB转录因子家族相关EST干涉载体构建及遗传转化的研究[D];华中农业大学;2010年
3 秦华伟;黄瓜再生体系的建立及耐热材料的筛选[D];华中农业大学;2010年
4 卢小三;两个杨树无性系再生体系的建立及抗虫基因Cry1C+9C转化的初步研究[D];华中农业大学;2010年
5 詹秀环;含噻二唑的芳酰基脲类化合物及酰胺类化合物的合成与生物活性研究[D];郑州大学;2010年
6 张鲁军;离子束诱导普通小麦小偃81 HMW-GS 1Ax1缺失突变家系突变机制研究[D];郑州大学;2010年
7 刘无双;拟南芥种子特异表达基因启动子分析[D];山东农业大学;2010年
8 王新春;控释BB肥对苹果园土壤养分及苹果植株生长的影响[D];山东农业大学;2010年
9 文俊玲;氮、钾、有机肥配施对越冬茬黄瓜生长发育及土壤环境的影响[D];山东农业大学;2010年
10 王长宪;利用基因工程创造香樟抗寒树种新种质技术研究[D];山东农业大学;2009年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 于喜艳,何启伟,孔庆国;甜瓜子叶组织培养的研究[J];山东农业科学;2002年02期
2 赵月玲,夏海武,万永霞,马秀兰,李芳;西瓜茎尖快繁技术及其问题探讨[J];山东农业科学;1999年03期
3 李红,吴丽芳,余增亮;植物转基因技术(二)[J];安徽科技;1999年07期
4 孙兰英;黄瓜遗传转化研究进展[J];北方园艺;2004年03期
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10 陶兴林,黄永红,陆璐,赵长增;2个甜瓜品种高效再生体系的建立[J];西北植物学报;2005年04期
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 徐妙云;植物防御素Rs-AFP(R39)基因在河套蜜瓜中的表达[D];内蒙古农业大学;2001年
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3 李靖;苦瓜子叶不定芽诱导研究[D];四川农业大学;2005年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 唐懿;李万宁;刘继;李娟;李焕秀;;苦瓜不定芽再生体系研究进展[J];长江蔬菜;2010年22期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 闫绍鹏;欧美山杨杂种扦插生根的理化与分子机理研究[D];东北林业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 刘玉晗;田间成年“碧秀”苦瓜优株离体快繁体系研究[D];四川农业大学;2008年
2 刘继;田间“碧秀”苦瓜带芽茎段的离体繁殖[D];四川农业大学;2010年
3 于海娣;木豆毛状根培养体系的建立及相关生理生化研究[D];东北林业大学;2012年
4 商丽敏;几丁质酶和葡聚糖酶基因对西瓜遗传转化的研究[D];东北农业大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 胡忠,杨军,郭光沁,郑国锠;宁夏枸杞发根农杆菌转化系的建立及影响转化因素的研究[J];西北植物学报;2000年05期
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【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 于瑞莲;巢建国;;发根农杆菌Ri质粒及在药用植物中的应用[J];现代中药研究与实践;2005年06期
2 闻玉莉;杨世海;;罗勒毛状根的诱导及培养[J];安徽农业科学;2010年04期
3 王跃华;代勇;孙雁霞;徐世军;王晓蓉;;青蒿植物的遗传转化研究[J];西南农业学报;2010年01期
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5 刘兴菊;刘英亘;梁海永;杨敏生;周怀军;;发根农杆菌转化三倍体毛白杨[J];西北林学院学报;2006年01期
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7 姜伊娜;武天龙;;毛状根的研究进展及应用[J];中国农业科技导报;2009年01期
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10 彭正云;刘德华;肖海军;蒋立文;张丽霞;向勤锃;唐道方;;发根农杆菌转化茶树的研究[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2006年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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3 任瑞星;王蕊;邢振建;许建德;;低温诱导在唐山秋瓜育种中的效果研究[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
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6 张兴国;邓小燕;邵长文;孙涌栋;梅茜;苏承刚;;CBF3和Cor15A基因导入黄瓜[A];中国园艺学会第六届青年学术讨论会论文集[C];2004年
7 张兴国;邵长文;孙涌栋;苏承刚;;基因Cor15A和CBF3导入黄瓜基因组[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年
8 杜胜利;韩毅科;魏爱民;张桂华;高述民;陈启民;;黄瓜离体雌核发育早期的特异蛋白研究[A];中国农业生物技术学会第三届会员代表大会暨学术交流会论文摘要集[C];2006年
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10 王永健;陈青君;张锋;;黄瓜遗传育种研究的现状和发展趋势[A];全国蔬菜遗传育种学术讨论会论文集[C];2002年
中国重要报纸全文数据库 前10条
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4 高碑店市新城镇武家村 王建明;春小拱棚黄瓜后期管理经[N];河北科技报;2009年
5 晓虎;怎样防治黄瓜“花打顶”[N];保定日报;2009年
6 相子瑞 张磊;黄瓜育种富了后迟人[N];德州日报;2010年
7 蓝天;如何防止黄瓜味苦[N];山西科技报;2005年
8 陈秋娇;夏黄瓜高产栽培要领[N];山西科技报;2005年
9 永年报农种植专业合作社 吕志军 永年县西河庄乡善寨村 张学民;黄瓜主要病害的防治[N];河北农民报;2011年
10 谭家峰;佳蔬良药话黄瓜[N];民族医药报;2000年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐洪伟;发根农杆菌诱导玉米毛状根再生植株及抗旱性研究[D];东北师范大学;2007年
2 缪旻珉;黄瓜(Cucumis sativus L.)热伤害与热适应生理机制及耐热栽培技术研究[D];南京农业大学;2000年
3 崔金霞;一氧化氮和MAPK在油菜素内酯诱导黄瓜抗氧化防御中的作用[D];浙江大学;2010年
4 刘春香;黄瓜风味品质的构成因素及部分因素遗传参数的研究[D];山东农业大学;2003年
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6 于锡宏;设施内黄瓜对重金属耐受机制的研究[D];东北农业大学;2000年
7 李志英;黄瓜“花打顶”形态、解剖、细胞学特征及相关基因的分离与鉴定[D];山东农业大学;2003年
8 李海云;设施土壤阴离子种类对黄瓜生育障害机理的研究[D];山东农业大学;2002年
9 崔光红;丹参道地药材cDNA芯片构建及毛状根基因表达谱研究[D];中国中医科学院;2006年
10 乔勇进;热处理对黄瓜多胺的影响及减轻冷害作用机理的研究[D];中国农业大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 齐莹;黄瓜毛状根培养及其毛花洋地黄LAE基因转化的研究[D];华南师范大学;2005年
2 段崇香;日光温室黄瓜有机基质栽培合理基质配方及需肥特性的研究[D];山东农业大学;2002年
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4 陈彤;HBsAg S基因克隆及基因转化用黄瓜的组织培养[D];河北大学;2003年
5 张国广;农杆菌介导的Chi和Glu基因转化黄瓜的研究[D];华中农业大学;2004年
6 国艳梅;黄瓜苦味遗传规律研究及AFLP分子标记[D];东北农业大学;2003年
7 罗兵;壳聚糖对黄瓜品质、产量及蔗糖代谢的影响[D];南京农业大学;2003年
8 梅茜;黄瓜幼果cDNA文库构建与部分ESTs分析[D];西南农业大学;2004年
9 冯嘉玥;温室春黄瓜灌溉指标的研究[D];西北农林科技大学;2004年
10 杨慧玲;黄瓜工厂化育苗基质筛选[D];河南农业大学;2002年
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