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《海南大学》 2011年
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海南龙血树种质资源的初步评价

董美超  
【摘要】:海南龙血树不仅是“血竭”的基原植物,也是一种园艺绿化树种,素有“平安树”、“千年不老松”等美誉。近年来,受花卉产业发展和产业结构调整的影响,海南龙血树野生资源蕴藏量急剧减少,为对海南龙血树种质资源的保护、开发和良种选育奠定基础,本研究从形态学、生化标记、ISSR分子标记对已收集的96份海南龙血树种质资源多样性和亲缘关系进行了研究,此外亦对海南龙树细胞学和传粉生物学特性进行了研究。具体实验结果如下: 1.初步建立了海南龙血树种质资源的植物性状描述规范,通过对海南龙血树的叶长、叶宽、叶厚、叶间距等11个植物学性状的测量,聚类分析将已收集的96份海南龙血树分为4类。 2.摸索出有效的海南龙血树基因组DNA提取方法。本研究优化了的CTAB法所提取的基因组DNA纯度高、杂质少、完整性好,A260/A280介于1.7~1.9之间,能够满足ISSR等后续实验的需要。 3.通过正交试验设计建立了海南龙血树ISSR反应体系及扩增程序.最适的20μl反应体系为:DNA模板量60ng,M2+浓度1.5 mmol/L,dNTPs浓度O.25 mmol/L,引物浓度1.Oμmol/L,Taq酶用量1U;最适PCR扩增程序为:94℃预变性5 min,94℃变性30s,52.0℃退火45 s,72℃延伸70s,35个循环,72℃延伸8min,4℃保存。 4.利用筛选出多态性好的10条ISSR引物对96份海南龙血树进行PCR扩增,共产生134条DNA条带,多态性条带133条,占总条带数的99.25%;遗传相似系数(GS)介于0.5896~0.9851,表明收集到的96份海南龙血树的遗传变异较小,在GS=0.71时,将96份种质分为4个类群。 5.通过对形态差异较大的11份海南龙血树种质,进行POD同工酶的遗传多样性聚类分析,可将其分为六类,分类结果和ISSR分子标记及形态学标记相接近。 6.采用染色体压片技术对海南龙血树的染色体数目和核型研究表明:在饱和对二氯苯和0.002mol·L—18羟基喹啉预处理中,后者预处理2h效果最好;海南龙血树核型为:2n=2x=42=22m+20sm,“2B”型,不对称系数为62.67%。主要由中部和近中部着丝粒染色体组成,未观察到随体染色体。 7.对海南龙血树的花部特征和访花昆虫及访花行为、访花频率进行了研究,并对海南龙血树的传粉方式、结实和种子萌发情况进行了检测。结果发现,海南龙血树具有虫媒花的典型花部特征,共观测到访花昆虫5目26种,其中传粉昆虫23种,螟蛾科和夜蛾科是主要的传粉昆虫。在自然条件下,海南龙血树的结实率差异较大,观测到的最低为4.01%,最高为14.99%,在实验室条件下种子萌发率可达71.2%。
【学位授予单位】:海南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S567.19

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