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《海南大学》 2011年
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黑曲霉β-葡萄糖苷酶产酶条件的优化及初步应用研究

王茜  
【摘要】:针对目前β-葡萄糖苷酶生产菌种产酶水平较低的问题,本研究室开展了一系列研究,从海南热带雨林环境中分离到一株高产β-葡萄糖苷酶菌株黑曲霉Glu05(Aspergillus niger Glu05),初始酶活力为32.87 IU/mL。 为了进一步提高该菌株的酶活力,本论文通过单因素实验、Plackett-Burman实验及响应面法(RSA)对该酶的发酵培养基及培养条件进行了优化,得到了最佳培养基配比为:麸皮3%,胰蛋白胨4%, 1μmol NaCl, 1μmol MnSO4, KH2PO40.2%;最佳培养条件为:装液量30 mL(100 mL三角瓶),摇床转速250 r/min,培养温度30℃,pH自然,培养时间5d。优化后的酶活力达到了48.11 IU/mL,较初始酶活力32.87 IU/mL提高了46%。 本实验还对β-葡萄糖苷酶的酶学性质进行了研究,酶促反应的最适缓冲液为醋酸-醋酸钠缓冲液,最适pH为4.2,且该酶在pH 4.0~7.0之间有很好的稳定性;该酶的最适反应温度为60℃,且在4℃~55℃的范围内保温4h,该酶都相对稳定;一般的金属离子及变性剂对该酶活力无显著影响,尿素对该酶有较强的抑制作用。 同时,本研究还做了Aspergillus niger Glu05所产β-glucosidase在促进香草兰生香过程中的体外模拟实验。研究发现,该酶能够明显促进香兰素葡萄糖苷水解生成香气物质香兰素。
【学位授予单位】:海南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:TQ925

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