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《海南大学》 2012年
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蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶基因转化巴西橡胶树的研究

倪彦艳  
【摘要】:果聚糖是一种以蔗糖为底物由果糖基转移酶催化合成的果糖基多聚体,大约有15%的被子植物将其作为主要的贮藏性碳水化合物。除此之外,果聚糖还有许多重要生理功能如:在干旱、高盐等非生物胁迫下参与渗透调节、防止细胞失水、维护膜的稳定性等。植物通过体内果聚糖的代谢来调节环境胁迫,它的积累可以提高植物在多种逆境胁迫下的抗逆性。通过基因枪法和农杆菌介导法将菊芋1-SST基因转入热研7-33-97中,期望获得转1-SST基因的橡胶植株,培育抗逆性的橡胶品种。 本研究分别以热研7-33-97花药、胚状体和长期继代增殖的花药愈伤组织为实验起始材料,进行愈伤组织培养、胚状体诱导和出苗情况方面进行了比较。试验表明:热研7-33-97的胚状体在胚诱导和出苗情况上优于花药和长期继代增殖的花药愈伤组织。胚状体继代增殖技术可间接继代增殖胚状体,继代增殖后仍能快速诱导成胚,是适宜长期继代和增殖保存的好材料。 通过基因枪法转化热研7-33-97,以1.5mg/L的草胺磷为筛选剂,得到10株抗性苗,对抗性苗进行PCR检测,有2株呈阳性。经过RT-PCR验证,结果有2植株呈阳性,Southern Blot杂交后有明显的杂交信号。结果表明:1-SST基因(Sucrose:sucrose1-fructosyltransferase即蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶基因)已经成功整合到橡胶树基因组的DNA中。 在农杆菌介导遗传转化中,采用悬浮培养的共培养方式,以1.5mg/L的草胺磷为筛选剂,得到4株抗性苗,对其中的2株进行PCR检测,发现有两株呈阳性。经过RT-PCR验证,有1株呈阳性。之后进行Southern Blot杂交,但没有明显的杂交信号。
【学位授予单位】:海南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S794.1

【参考文献】
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